177557. lajstromszámú szabadalom • Eljárás stabil vizes steril cisz platina(II)-diamin-diklorid oldat előállítására
9 177557 10 Az alábbiakban ismertetjük a cisz-diamin-diklór-platina nagyfelbontású folyadékkromatográfiás (HPLC) mérését. A cisz-diamin-diklór-platinát vizes p-Bondapak—NH, oszlopon kromatografáljuk injektálási technikát használva. A vegyület detektálását 313 nm-en mért ultraibolya elnyeléssel végezzük, a vegyület mennyiségi meghatározását az elnyelési maximum magasságának egy előzetesen felvett kalibrációs görbéhez való összehasonlítással mérjük. A módszert használhatjuk por alakú és nátriumkloridot és mannitot tartalmazó szilárd halmazállapotú készítmények mérésére. A specifitást a cisz- és a transz-izomer elválasztásával és a bomlás mérésével demonstráljuk (nedvesség, sav, bázis, hő és fény). A cisz—(NH3)2Cl,Pt (II) és a transz—<NH,),CI,Pt (II) szerkezeti képletét a III és a ÍV képleteken mutatjuk be. A nagyfelbontású folyadékkromatográfiás mérés körülményei az alábbiak : Oszlop: vizes Micro-Bondapak - NH? (200 mm x 400 mm) : 027386 vagy ennek megfelelő. Mobil fázis: etilacetát:metanol:dimetilformamid:desztillált viz 25:16:5:5 arányú elegye. Reagensként Bordick és Jackson desztillátumot használunk. A vizet gázmentesítjük használat előtt, ugyanúgy az oldatot a keverést követően. Detektor: Water’s Modell 440 Absorbance Detector. Hullámhossz: 313 nm (ultraibolya tartomány). Érzékenység: 0,1 AUFS. Injektor: 20 pl térfogatú injektor. Az injektor: Valco 7000 psi (595 atü) saválló acélból készült szelep (CV 6 UHPa—C20). Injektált térfogat: 20 pl. Oldószer adagoló rendszer: Water’s Modell 6000A pumpa. Adagolási sebesség: 2,0 ml/perc. Retenciós idő: 2,8 perc (közelítőleg). Kiíró: Heath Modell SR—255B. A kiiró sebessége: körülbelül 1,2 cm/perc. Feszültség : 10 mV. A nagyfelbontású folyadékkromatográfiás analízis leírása : A fentiekben ismertetett körülmények között a standardot és a mintát reprezentáló kromatogramokat kapunk párhuzamos mérésekben. A cisz-diamin-diklór-platina (DDP) referencia standard a következő : Sarzs szám: 78F7 (Matthey Bishop sarzs szám: AM 7702). Tisztaság: 99,8%. Oldószerek: Burdick és Jackson (üvegben desztillált) spektrokvalitású. Standard: 25 ml térfogatú bemérőlombikba pontosan 25 mg cisz-diamin-diklór-platinát mérünk. A terméket dimetilformamidban oldjuk és hígítjuk. Fagyasztva szárított injekció: 10 ml dimetilformamiddal feltöltjük az ampullát, és 5 percen át mechanikusan rázzuk (az oldást végezhetjük 2 perces ultrahangos kezeléssel is). 5 ml ilyen mintát Miilipore Filter szűrőberendezéssel, vagy ehhez hasonlóval szűrünk, szűréskor az első milliliter szűrletet kiöntjük. . Az ampullák tartalmának homogenitása: a fentiekben megadottak szerint 10 ampullát oldunk és mérünk. Számítások: mg standard/ml STANDARD FAKTOR (SF):----------------------------— a standard átlagos csúcsmagassága „ SF x a minta átlagos csúcsmagassága x 25 mg DDP g:--------------------------------------------------a minta súlya g-ban mg DDP/ampulla: SFxa minta átlagos csúcsmagassága x 10 Az ampullák tartalmi homogenitásának meghatározásakor 10 ampulla mérésekor kapott eredmény átlagát számítjuk. Módszer: A ciszplatin mérésére vonatkozóan a fentiekben megadott módszert vizes, nátriumkloridot és mannitot tartalmazó oldatok mérésére az alábbi módosításokkal használjuk : Nagyfelbontású folyadékkromatográfiás körülmények : mobil fázis: acetonitril : desztillált víz 75:25 térfogatarányú elegye. Reagensként üvegben desztillált Burdick és Jackson oldatokat használunk. A vizet a használat előtt és az oldatokat keverés után gázmentesítjük. Injektor: A100 pl-es injektor. Az injektálás térfogata: 100 pl. Retenciós idő: 2,0 perc (közelítőleg). A nagyfelbontású folyadékkromatográfiás analízis: standard: 25 ml-es térfogatú bemérőedényben 25 mg cisz-diamin-diklór-platinát. 225 mg nátriumkloridot és 250 mg mannitot mérünk. Desztillált vízzel oldjuk és hígítjuk azelegyet. A kapott oldatból 5.0 níl-t 25 ml-es bemérőedénybe pipettázunk, 2,0 ml desztillált vizet adunk az elegyhez. és acetonitrillel 25 ml-re töltjük fel. A minta (1 mg/ml):5.0 ml mintát 25 ml térfogatú bemérőedénybe pipettázunk, 2,0 ml desztillált vizet adunk az oldathoz, és acetonitrillel 25 ml térfogatúra töltjük fel. Számítások : mg standard/ml standard faktor SF: -—--------------------------------------a standard átlagos csúcsmagassága mg DDP/ml = SF x a minta átlagos csúcsmagassága x 25. A találmány szerintf készítmény és módszer iparilag alkalmazható. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás állandó, steril vizes cisz-platina(II)-diamin-diklorid oldat előállítására, azzal jellemezve, hogy egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható sav 2,0 és 3.0 közötti pH-jú és adott esetben egy nem toxikus, gyógyszerészeti szempontból elfogadható, kloridionokra disszociáló szervetlen sót és/vagy egy szokásosan használt, ártalmatlan, élettani szempontból elfogadható hígítóanyagot tartalmazó vizes oldalhoz milliliterenként 0,1 mg és 1.0 mg közötti mennyiségi cisz-platina(JI)-diamin-dik!oridot adunk, majd az oldódást követően szükség esetén a savval 2,0és 3,0 közé állítjuk be a pH-t, majd az így kapott oldatot sterilizáljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja embernek adagolható állandó, steril vizes cisz-platina(II)-diamin-diklorid oldat előállítására, azzal jellemezve, hogy az oldathoz milliliterenként 0,1 mg és 1,0 mg közötti mennyiségű cisz-platina(II)-diamin-dikloridot adunk, és az oldat pH-ját 2,0 és 3,0 közé állítjuk be. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja embernek intravénásán adagolható, leforrasztott ampullában lévő állandó, steril vizes cisz-platina(II)-diamin-diklorid oldat előállítására, azzal jellemezve, hogy az oldathoz milliliterenként 0,1 és 1,0 mg közötti mennyiségű cisz-pla-5 10 15 20 25 30 .35 40 45 50 55 60 65 5
