177141. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-benzoil-oxiránkarboxamid-származékok előállítására
9 177141 10 olvadáspont 188,5—190,5 °C, kitermelés 2,9 g (74%), transz-3-(2,4-diklór-benzoil)-oxiránkarboxamid (16. sz. vegyidet), olvadáspont 121—122 °C, kitermelés 0,4 g (31%), transz-3-[3-(trifluormetü)-benzoil]-oxiránkarboxamid (17. sz. vegyidet), olvadáspont 122—123,5 °C, kitermelés 0,7 g (66%). 18. példa A zsírképzést gátló hatás vizsgálata Az (I) általános képletű vegyületek zsírképzést gátló hatását a következő módszerrel vizsgájuk: állati máj- vagy zsírszövet-mintákat meghatározott ideig radioaktív glükózt és a vizsgálandó vegyületet tartalmazó folyékony közegbe merítünk, a kezelt szövetmintából elkülönítjük a zsiradékot, és szcintdlációs számlálással meghatározzuk a felvett radioaktív szén mennyiségét. A kísérleteket a májszöveteken és zsírszöveteken egyaránt végrehajtottuk, egyes állatoknál ugyanis a zsírképzés elsődleges helye a máj, míg más állatfajoknál zsír elsősorban a zsírszövetekben alakul ki. A kísérleteket sertéseken, csirkéken és juhokon végeztük. A következőképpen jártunk el: 200 mg súlyú májszövet-darabkákat, ületve 150 mg súlyú zsírszövet-darabkákat 3 ml Krebs—Ringer hidrogén-karbonát oldatban rázás közben 2 órán át- 37 °C-on inkubáltunk. Az inkubáló oldat kalciumion-koncentrációja 0,5 n volt, továbbá 60jumól glükózt, 0,5 mikrocurie glükóz—U14 C-t, 300 mikroegység inzulint és 5% dimetil-szulfoxidot tartalmazott. A vizsgálandó vegyületet dimetü-szulfoxidos szuszpenzióban adtuk az inkubáló oldathoz .100 pgl 1 ml inkubáló oldat mennyiségben. Az inkubálást 0,25 ml 1 n vizes kénsavoldat beadagolásával fejeztük be, és a kapott elegyet összesen 25 ml 2 :1 térfogatarányú kloroform : metanol eleggyel extraháltuk. Az extraktumokat egyesítettük, Folch és munkatársai módszerével [J. Bioi. Chem. 226, 497-509 (1957)] mostuk, levegőn szárítottuk, majd folyadékszcintillációs számlálóban, 15 ml számlálófolyadék (2 rész, 0,4 vegyes % New England Nuclear Omnifluor-t tartalmazó toluolos oldat és 1 rész Triton X-100 keveréke) felhasználásával meghatároztuk a megkötött radioaktív szén mennyiségét. Minden egyes kísérletet háromszor ismételtünk meg, és az észlelt eredményeket az egyébként azonos körülmények között, azonban vizsgálandó vegyület felhasználása nélkül végzett kontroli-vizsgálatok adataival hasonlítottuk össze. A kapott értékekből minden egyes kísérletre kiszámítottuk a felhasznált hatóanyag által előidézett százalékos lipoidszintézis-gátlást. Az l.sz. vegyületet mindhárom állatfajon megvizsgáltuk, míg a további vegyületek esetén csak sertéseken végeztünk kísérleteket. E kísérletek és egyéb vizsgálatok alapján megállapítottuk, hogy a sertések májszövetei csak csekély mértékű zsírképző aktivitással rendelkeznek. A kísérletek adataiból azt is megállapítottuk, hogy a sertések zsírszövetei (a zsírsav-szintézis elsődleges helyei) a zsírképzéshez glükózt hasznosítanak. A zsírszövetek és glükóz felhasználásával végzett kísérletek eredményeit (a zsírképződés százalékos gátlásában kifejezve) a 2. táblázatban közöljük. 2. táblázat Vegyület száma Kontrolihoz viszonyított %-os gátlás 1. 94 2. 70 3. 96 4. 96 5. 89 6. 91 7. 90 8. 96 9. 94 10. 77 12. 64 13. 87 14. 90 15. 90 16. 91 17. 94 Csirkék esetén a zsírsav-szintézis elsősorban a májban megy végbe. Az l.sz. vegyület 54%-kal gátolja a glükóz beépülését a májba. Juhok esetén a májszövetek több glükózt alakítanak át lipoidokká, mint a zsírszövetek. Az l.sz. vegyület a májszövetek glükóz-felvételét 15%-kal, a zsírszövetek glükóz-felvételét pedig 65%-kal gátolja. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az (I) általános képletű 3-benzoil-oxiránkarboxamidok — e képletben n jelentése 0,1 vagy 2, R jelentése halogénatom, nitrocsoport, trifluormetil-csoport vagy 1-4 szénatomos alkil-, alkoxi- vagy alifás acilamino-csoport, R1 ésR2 jelentése külön-külön hidrogénatom, 1—5 szénatomos alkil-, alkenil- vagy alkinilcsoport, vagy R1 és R2 együtt egy —C2H4—O—C2H4 — képletű csoportot alkothat —, előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű akrilamid származékot - e képletben R, R1, R2 és n jelentése az ezen igénypont tárgyi körében megadott — bázis jelenlétében hidrogén-peroxiddal reagáltatunk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás továbbfejlesztése melegvérű állatok zsírképzését gátló 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
