177117. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-karboxi-alkoholok rezorválására
7 1771 m 8 Az első extrakció folyamán nyert éteres oldatot vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk. így 0,45 g (90%) ß-fenil-propionil-D-tejsavat kapunk, 2v%-os etanolban mérve: [a]D = -43°. Ebből az anyagból a 0-fenil-propionil-D-madula- 5 savhoz hasonló módszerrel felszabadíthatjuk a tiszta D-tejsavat. A savas reakcióelegyből ebben az esetben is csak több órás folyamatos éteres extrakcióval tudjuk elkülöníteni a D-tejsavat. Az így nyert D-tejsav hozama 0,15 g (74%), vízben mérve: [a]D = -3,7°. 10 Az enzimatikus hidrolízist hordozómátrixhoz kötött a-kimotripszinnel is végrehajthatjuk. Hordozómátrixként a Koch-Light cég ital „Enzacryl-AA” kereskedelmi néven forgalomba: hozott 15 akrilamid alapú, aromás gyűrűhöz kapcsolódó aminocsoportokat tartalmazó polimert alkalmazunk. Az enzimet a következő módon köthetjük a gyantához: 10 g „Enzacryl-AA”-t 500 ml 2n sósavban szusz- B0 pendálunk, majd 0 °C-ra hűtve állandó erőteljes keverés mellett 1,5 óra alatt hozzácsepegtetünk 400 ml 2 súly%-os vizes nátrium-nitrit-oldatot. A reakcióelegyet egy órán át hidegen kevertetjük, majd a diazotált hordozót szűréssel eltávolítjuk, 5 x 100 ml 25 foszfátpufferrel (pH = 7,0) mossuk, centrifugáljuk. 500 ml foszfátpufferben (pH = 7,0) feloldunk 0,5 g a-kimotripszint, majd a diazotált hordozót hozzáadva az elegyet 48 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Ezután a hordozót leszűrjük, 5 x 100 ml 30 pufferral, 0,01 süly% fenolt tartalmazó 10súly%-os nátrium-acetát-oldattal, pH = 8,0 pufferral, majd 0,5 mólos nátrium-klorid-oldattal mossuk. Ezután pH = 8,0 foszfátpufferban szuszpendáljuk és 1 cm átmérőjű 20 cm hosszú oszlopot készítünk belőle. 35 Az így elkészített oszlopra 1 g 0-fenil-propionil-DL-mandulasav 100 ml 1:9 térfogatarányú acetonitril-foszfátpuffer (pH = 8,0) eleggyel készített oldatát visszük fel. Az oszlopról lecsepegő oldatot a korábban ismertetett módon dolgozzuk fel. így 0,24,g (90%) L-mandulasavat és 0,45 g (90%) /3-fenil-propionil-D-mandulasavat kapunk, melyek fizikai állandói megegyeznek a fent közöltekkel. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás (I) általános képletű 1-karboxi-alkoholok rezolválására — az (I) általános képletben R! és R2 jelentése C!_6alkil-, fenil-, fenil-Cj_4 alkil, hidroxi-Ci_4 alkil- vagy halogén—C]_6 alkil-csoport, Rj pedig még hidrogénatomot is jelenthet, azzal a megkötéssel, hogy az R2 csoport térkitöltése legalább kétszerese az Rí csoporténak -, azzal jellemezve, hogy valamilyen (I) általános képletű alkohol DL-izomer-elegyét egy optikailag inaktív (II) általános képletű karbonsavval vagy annak halogenid-származékával vagy anhidridjével észterezzük — a (II) általános képletben Ar jelentése fenil- vagy indolilcsoport, Q jelentése metilén-, etilén- vagy metilidéncsoport, és X jelentése hidrogén- vagy halogénatom, hidroxil-, amino- vagy acil-amino-csoport —, és a kapott észtert 6,5 és 8,5 pH-értékek között, 15—40°C-on, a hidrolizálandó észterhez viszonyítva 0,1-20 súly% - adott esetben hordozóhoz kötött - a-kimotripszinnel hidrolizáljuk, majd a hidrolizátumból önmagában ismert módon elkülönítjük az (I) általános képletű alkohol egyik optikailag aktív izomerjét, és kívánt esetben a visszamaradt észterből önmagában ismert módon hidrolizálással felszabadítjuk az (I) általános képletű alkohol másik optikailag aktív izomerjét. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy hordozómátrixként akril-amid alapú, aromás aminokból származó aminocsoportokat tartalmazó polimert alkalmazunk. 40 1 rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 824394 - Zrínyi Nyomda, Budapest 4
