177009. lajstromszámú szabadalom • Készítmény mikroorganizmus okozta növényi károsodások megelőzéséhez és kezeléséhez
3 177009 4 Agar táptalajon aerob körülmények között 25-28 °C-on tenyészthető. A találmány szerinti szerhez szükséges fermentlevet úgy állítjuk elő, hogy az Agrobacterium radiobacter MNG 00161 jelzésű törzset 1 liter csapvízben oldott, 10 g bouillont, 5 g glükózt és 10 g élesztőkivonatot tartalmazó, 100 ml táptalajon 500ml-es Erlenmeyer-lombikban rázogépen 24—48 óra hosszat előtenyésztjük, majd az előtenyészettel 8 literes üvegfermentorban levő táptalajt oltunk be és 72 óra hosszat keverés közben tenyésztjük. Az így kapott fermentlevet a szer előállításához steril körülmények között összekeverjük a por alakú, hidrofil hordozóanyaggal. Hordozóanyagként különösen előnyös steril tőzegpor használata. A kapott szer por alakú. A találmány szerinti növényvédőszerrel a növények kezelését úgy végezzük, hogy elültetés előtt a tapadás javítása céljából vízzel megnedvesített gyökereket a por alakú szerbe forgatjuk és így az egyenletesen a gyökerekre tapad. A kezelt növények ezután elültethetők. Az új növényvédőszer eltarthatóságát a fermentlével összehasonlítva kitűnik, hogy a szer lényegesen hosszabb ideig eltartható anélkül, hogy hatékonysága jelentősen csökkenne. Ennek szemléltetését szolgálja a következő táblázat, amelyben a baktérium sejtszám változását — csökkenését — tüntetjük fel az idő függvényében. Idő (nap) 0 15 30 45 60 90 Fermentlé 100% 50% \% — — — Szer 100% 100% 80% 75% 60% 50% Látható, hogy a találmány szerinti szer felhasználhatósága legalább hatszorosan meghaladja a fermentlé felhasználhatóságát. Ez a felhasználási, illetve tárolási idő a gyakorlati követelményeket teljesen kielégíti, mivel a növények elültetésére alkalmas, viszonylag rövid, tavaszi és őszi időszakban a szer biztonságosan felhasználható. A találmány szerinti szer hatékonyságának meghatározására különböző időszakokban összehasonlító vizsgálatokat végeztünk természetesen és mesterségesen fertőzött növényekkel. A kísérletekhez málna külsőleg egészségesnek látszó, golyvamentes szaporítóanyagát használtuk. A) vizsgálat Az Agrobacterium radiobacter mikroorganizmust 0,1% élesztőkivonatot tartalmazó agaros táptalajon tenyésztettük. A tenyésztés 4. napján a táptalaj felületéről a baktériumokat steril desztillált vízzel lemossuk és így 109 sejt/ml-es szuszpenziót kapunk. Ezt a szuszpenziót 48 órán belül a kezelés helyén csapvízzel 107 sejt/ml-re hígítottuk. Az elültetendő növények gyökereit közvetlenül ültetés előtt 5 percre a sejtszuszpenzióba merítettük. Az ültetés ősszel történt. Az eredmények kiértékelését következő év őszén végeztük. Mesterséges fertőzést nem alkalmaztunk. Kiásás után számoltuk a fertőzött és egészséges tövek számát, megmértük a tumorok súlyát és megszámoltuk a növényenkénti tumorokat. Az eredményeket a következő táblázat szemlélteti: összes növény db Beteg növény db Növényenkénti tumorsúly, g Fertőzés %-a Kezeletlen kontroll 31 29 10,8 93 Kezelt 41 23 2,6 56 B) vizsgálat Az A) vizsgálatnál ismertetett módon járunk el, de az értékelhetőség biztonságáért mesterséges fertőzést alkalmaztunk. A mesterséges fertőzést Agrobacterium tumefaciens mikroorganizmus 107 sejt/ml koncentrációjú szuszpenziójával végeztük, és ebbe a gyökereket 5 percre bemártottuk. A növények ültetése tavasszal történt, és a kiértékelést ősszel végeztük. Az eredményeket a következő táblázat szemlélteti: JO 1 növény növény Fertőzés ,§ ,c m db db %-a Z S S Kontroll + mesterséges fertőzés 88 70 79,5 3,1 Kontroll + mesterséges fertőzés + kezelés 76 11 14,4 1,0 SzDs% 13,3 1,2 ei) vizsgálat A vizsgálatot a találmány szerinti növényvédőszerrel végeztük. A mesterséges fertőzés a B) vizsgálatnál leírt módon történt. Az ültetés tavasszal, a kiértékelés ősszel történt. A szer 100 sr. tőzegporral összekevert 25 sr. fermentlé volt. A növények gyökereit először vízzel megnedvesítettük, majd a por alakú szerben alaposan megforgattuk, hogy a szer a gyökerekre lehetőleg egyenletesen tapadjon. Az eredményeket a következő táblázat szemlélteti. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2