176799. lajstromszámú szabadalom • Eljárás inzulin és pankreatin egyidejű kinyerésére sertéspankreászból
, 176799 5 6 csapjuk és az így kapott sólepényt ismert módon inzulinná feldolgozzuk. Az inzulintartalmú extraktum elválasztása után kapott szilárdanyag képezi a pankreatingyártás kiindulóanyagát. A fermentaktivitás kímélése érdekében közvet- 5 lenül egy puffersót vagy egy puffersó keverékét adunk hozzá, ezzel 6 és 7 közötti pH-értékre állítjuk be, majd önmagában ismert módon pankreatinná feldolgozzuk. 1. példa 50 kg mélyfagyasztással konzervált sertés-hasnyálmirigyet húsdarálóval felaprítunk, majd 120 liter aceton és 50 liter víz elegyében 15 °C-on szuszpendáljuk. 100 g 15 kalciumkloridot 150 ml vízben oldunk és az így készült vizes kalciumklorid-oldattal 5,6 pH-értéket állítunk be. Ezután az elegyet 30 percig 15 °C-on keverjük, 45 liter acetont adunk hozzá és a szilárdanyagot centrifugálással leválasztjuk. A tiszta fázisban marad az inzulin, a szilárdanyagot pankreatinná feldolgozzuk. A szilárdanyagot 40 liter vizes dinátrium-hidrogénfoszfát oldattal pépesítjük, amely annyi foszfátot tartalmaz, hogy a szuszpenzió 6,0—6,5 pH-értékre álljon be, majd vákuumdesztillációval 25 °C termékhőmérsékleten 15%-os acetontartalmat állítunk be. A sűrűnfolyós desztillációs maradékot a hasnyálmirigy minőségétől függően legfeljebb 3 óra hosszat 25 °C-on tartjuk, majd 250 liter acetonnal elkeverjük és 30 °C-ra felmelegítjük. A szilárdanyagot és a tiszta fázist centrifugálással elválasztjuk. A szilárdanyagot 25 °C-on ismét 150 liter acetonnal extraháljuk, az acetonhoz előzetesen 10 liter vizet keverünk, a kezelt anyagot centrifugálással elválasztjuk és az enzimaktivitás megőrzése érdekében 25— 30 °C közötti hőmérsékleten vákuumban szárítjuk. 35 Hozam: 9 kg pankreatin. A centrifugálással kapott inzulin-kivonatot vákuumban acetonmentesre bepároljuk. Emellett a kivált zsírt elválasztjuk. A vizes desztillációs maradékból az oldott 40 inzulint önmagában ismert módon elkülönítjük. Hozam: 3 g inzulin 25 N. E./mg=75 000 N. E. inzulin (N. E.=nemzetközi egység). 2. példa Az inzulin extrakciójához 1 kg oldott ammóniumkloridot és 0,5 kg primer nátrium-hidrogénfoszfátot tartalmazó 120 liter acetonból és 50 liter vízből álló elegyet 10 alkalmazunk. Az egyéb feldolgozási körülményeket az 1. példa szerint állítjuk be, hozam is az 1. példa szerintivel azonos. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás inzulin és pankreatin egyidejű kinyerésére friss vagy mélyfagyasztott sertés-hasnyálmirigyből, a hasnyálmirigy aceton jelenlétében történő extrakciója 20 útján, azzal jellemezve, hogy az extrakcióhoz 40—80 térfogat% acetont tartalmazó aceton—víz elegyet alkalmazunk, és az extrakciót 5—7 pH-értéken végezzük, amikoris a pH-értéket az inzulin savas jellegű kísérőanyagaival az adott extrakciós feltételek mellett nem 25 disszociáló vegyületek képzésére alkalmas kationokat tartalmazó vízoldható sók és kívánt esetben e sók kationjaival nem disszociáló sók képzésére alkalmas anionokat tartalmazó vízoldható savanyú sók hozzáadásával állítjuk be, majd az extrakció után a szilárdanyagot, 30 kívánt esetben további aceton hozzáadása után, elkülönítjük az extrakciós elegyből, az extrahált anyagot ismert módon feldolgozzuk inzulinná és a szilárdanyagot az extrakciós közegből történő elkülönítése után haladéktalanul 5,6 és 10 közötti pH-értékre állítva ismert módon pankreatinná dolgozzuk fel. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az inzulin extrakcióját 50—60 térfogat/^ acetont tartalmazó aceton—víz elegygyel, a szilárdanyagok extrakciós közegből történő elválasztását pedig 60—70 térfogat% acetontartalom mellett végezzük. A kiadásért felel: a Közgazdasági éa Jogi Könyvkiadó igazgatója 81.1423.6642 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató 3
