176580. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enzimek és enzimkeverékek rögzítésére kopolimer réteg(ek)ben
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 176580 Nemzetközi osztályozás : llsP Bejelentés napja: 1978. IX. 28. (NA—1111) C 07 G 7/02 Közzététel napja; 1980. IX. 27. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Megjelent: 1981. IX. 30. Szabadalmas : Dr. Nagy Miklós, dr. Horkay Ferenc, oki. vegyészek, Budapest Eljárás enzimek és enzim keverékek rögzítésére kompolimer réteg(ek)ben i délen találmány tárgya eljárás enzimek vinilalkohol-viniléter, vmjlalkohol-vimlészter, illetve vinilalkobol-vinildiacetál típusú kopolimçrekbôl készített réteg(ek)ben történő rögzítésére. Kolloid méretű, biológiailag aktív részecskék 5 (enzimek, kpenzimek, bormonok, antitestek stb.), valamint egyéb nagy diszperzitásfokú (pl. finom eloszlású fémkatalizátorok) immobilizálásával kapcsolatban elméleti és gyakorlati,szempontból egyaránt fokozódó érdeklődés nyilvánul 10 meg. A biológiai aktivitással rendelkező részecskék immobiUzálása ezeknek széleskörű farmakológiái és élelmiszeripari felhasználása miatt alapvető jelentőségű. Wykes (Wykes et. al. Nature, New 15 BjpL (230, 137, 1071.) immobilizált tirozináz enzimet alkalmazott az L-tirozin 3,4-dihidroxifenil-alanismé való átalakításához, amely a Parkinson kór gyógyszerének szintézise szempontjából jeientőa. 20 &8ÄWS vizsgálatot végezték a glükóz izomeráz enzimmel (Barker et. al. Process, Biochem. 5, 11, 1971., Strandbarg and Smiley, Appl. Microbiol. 21, 588, 1971.). Ez az enzim a glükóz fruktózzá történő izomerációját katalizálja, amelynek gaz- 25 daságos kivitelezése élelmiszeripari vonatkozása miatt lényeges. Az aktív enzimek rögzítése gyakran a sok komponensű, bonyolult rendszerek esetében felmerülő analitikai problémák megoldásával kap- 30 2 csolatos. Ennek különösen a gyógyászatban, a klinikai laboratóriumi vizsgálatoknál, a biológiai, biokémiai és biofizikai kutatásoknál van szerepe. Immobilizált enzimet tartalmazó rendszerek (pl. az ún. enzimelektródok) előnyösen használhatók aminosavak, peptidek és nukleinsavak analízisére, továbbá az enzimek szubsztrátokkal szembeni viselkedésének, illetve az inhibitorok hatásának vizsgálatára. Az ilyen rendszerek az élő szervezet modelljeinek tekinthetők, mivel az enzimek természetes környezetükhöz hasonló környezetben — az enzimek a sejtekben a sejt membránjához kötődnek, illetve a sejt membránba vannak bezárva — fejtik ki hatásukat. Ismeretes az immobilizált ureáz enzim felhasználása a vérszérum, illetve a vizelet karbamidtartalmának meghatározására (Riesel and Katchalsky, J. Biol. Chem. 239, 1521, 1964., Guibault and Das, Anal. Biochem. 33, 341, 1970.). Weetall a szterinszulfatáz enzim (a szteroid származékok hidrolízisét katalizálja) immobihzálását ismerteti, amelynek a testfolyadék ösztrogén tartalmának analízise szempontjából van jelentősége (Weetall, Nature, 232, 473, 1971.). Hicks és Updike a glükóz, illetve a tejsav meghatározására glükózoxidáz, illetve tejsavhidrogenáz enzimeket használtak (Hicks and Updike, Anal. Chem. 38, 720,1966.). A gyakorlatban az aktív részecskék rögzítésének két alapvető típusa — a kémiai, illetve a fi-176580