176551. lajstromszámú szabadalom • Eljárás takarmánynövények irányított silózására új baktérium törzs alkalmazásával
5 176551 6 sejtek, amelyek mérete a megadott határokon belül a tenyészet korától és a táptalaj típusától függően változik. Egyedülállóan, párokban vagy rövid láncokban fordul elő. 11—30 °C közötti hőmérsékleten jól növekszik, illetve szaporodik. Erősen erjeszti a következő cukrokat: arabinóz, glükóz, fruktóz, szacharóz, laktóz, maltóz, raffinóz, galaktóz és mannóz. Közepes sebességgel erjeszti a xilózt, nem erjeszti a keményítőt. A fehérjéket nem bontja. Lucerna szaponinok keverékét, mint egyedüli szénforrást tartalmazó folyékony táptalajon savtermelés közben szaporodik. Agar-agaros táptalaj felületén gyengén növekszik, miközben apró, pontszerű, világos telepeket képez. A törzs előnyösen a következő táptalajon tartható fenn: aprított, zöld lucernát vagy más pillangósvirágú növényt kipréselünk, a levét 75— 80 °C-ra melegítjük, és a kicsapódott fehérjéket és egyéb anyagokat centrifugálással eltávolítjuk. A kapott lében annyi glükózt és káliumhidrogénfoszfátot oldunk, hogy a glükóz koncentrációja 5 g/1, a foszfáté pedig 2 g/1 legyen. A táptalaj savasságát pH = 6 értékre állítjuk be, 121 °C-on 30 percig sterilizáljuk, és lehűlés után a Lactobacillus plantarum L—18 törzzsel beoltjuk. A Lactobacillus plantarum L—18 törzs szaporítását a silózásos tartósítás kivitelezésére a találmány szerint úgy végezzük, hogy asszimilálható szén- és nitrogénforrásokból, továbbá ásványi sókból álló táptalajt a törzzsel beoltunk, és a tenyésztést 11—30 °C-on célszerűen 16—32 órán át végezzük. A törzs szaporítását előnyösen 20—25 °C-on végezzük. Táptalajként előnyösen 5—30 % szénhidrátot tartalmazó oldatot, például hidrolizált takarmánylisztet, így kukorica-, búza-, árpa-, ciroklisztet, stb., vagy például glükóz oldásával kapott glükóz-oldatot alkalmazunk. Célszerűen pH = 6 értékű táptalajt oltunk be a törzzsel, és a szaporítás során tejsav termelése következtében a pH értéke 3,5—3,7-re csökken. A szaporítással kapott Lactobacillus plantarum L—18 törzset kívánt esetben liofilizálhatjuk, és liofilizált állapotban tárolhatjuk. A találmány szerinti új Lactobacillus plantarum L—18 törzs takarmánynövények silózásánál hasznosítható előnye, hogy a hemolitikus szaponinokat dekarboxilezi és ilyen módon azok elveszítik hemolitikus jellegüket. Ezért a találmány szerint az új Lactobacillus plantarum L—18 törzs szaponintartalmú növények szaponinmentesítésére is felhasználható. Az új törzs alacsony hőmérsékleten is jól szaporodik, és szaporodásának a körülményei olyanok, hogy azok más baktériumok fennmaradásának nem kedveznek. Az alacsony hőmérsékleten is lejátszódó szaporodás következtében késői (októberi) kaszálású takarmánynövények (késői lucerna, vöröshere), továbbá az ebben az időszakban begyűjthető kukoricaszár is silózható. A silózási idő ebben az esetben természetesen kissé meghosszabbodik, a szokásos 8—20 nap helyett 20—40 nap lesz. A találmány szerinti új törzs alkalmazásával tehát nemcsak a korai érésű takarmánynövények silózása végezhető el a fehérjetartalom károsodása nélkül, gyakorlatilag közvetlenül a betakarítás után, és nemcsak a hemolitikus szaponintartalmú növény alakítható át takarmányozási szempontból értékesebb, szaponinmentes táppá, hanem a korábban nagyobbrészt veszendőbe ment elöregedett növények vagy növényi részek is értékesíthetők takarmányként. A találmány szerinti eljárást az alábbi példák segítségével részletesen ismertetjük: 1. példa Lactobacillus plantarum L—18 törzs szaporítása Kukorica-, búza- vagy árpalisztet 50—350 g/1 koncentrációban 2%-os vizes sósav-oldattal 1 órán át hidrolizálunk 100 °C-on, majd a hidrolizátum savasságát vizes nátriumhidroxid-oldattal 6-os pH-értékre állítjuk be. Az így kapott szénhidrát-oldatot beoltjuk a steril körülmények között fenntartott Lactobacillus plantarum L— 18 törzzsel, és a táptalajt 20—22 °C-on tartjuk 20 órán át. 3,5—3,7 közötti pH-értékű tenyészetet kapunk. 2. példa Lucerna silózása Célszerűen a zöldbimbós virágzás kezdetekor (a lucerna fehérjehozama ekkor a legnagyobb) takarítjuk be a lucernát, két menetben. Az első menetben rendre vágjuk, és 24 órás fonnyasztás után, amikor a lucerna víztartalma 70—80 ,%-os lesz, például E 280 típusú önjáró szálastakarmány-betakarító géppel a rendről felszedve 0,5—5 cm méretre szecskázzuk és a gépre szerelt kompresszoros permetezőfej segítségével vagy más módon 5—30%-os glükózt tartalmazó 1—10 liter 1. példa szerinti Lactobacillus plantarum L—18 tenyészettel (1 q zöld lucernára számítva) bepermetezzük. Az ilyen módon beoltott anyagot gépesített toronysilóban, panelsilóban, átjáró földsilóban vagy kazalban silózzuk. Célszerűen úgy járunk el, hogy a növényt még a betakarítás napján silózzuk, anaerob körülmények között. A fermentálás 8—20 nap alatt befejeződik, és a termelt tej sav hatására a pH-érték 3,4—4 között lesz. A silózás 2—8 hónapra biztosít tartósítást. A lucerna haemolitikus indexe a silózás következtében 125-ről 8-ra vagy az alá csökken. Ez a takarmány már haemolitikus szaponintól mentesnek tekinthető takarmányozási szempontból. 3. példa Vöröshere silózása A vöröshere (Trifolium pratense L.) is a nehezen silózható takarmánynövények közé tartozik: egyrészt hiányzik belőle a vízben oldódó szén-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3