176482. lajstromszámú szabadalom • Eljárás proteinek rögzítésére hordozóanyagokon
11 176482 12 foszfát-pufferral mossuk. A nylonon kötött antitestet a fentiekben említett foszfát-pufferben tároljuk, 0,05% nátriumazid hozzáadásával. A T4-származékok tesztjénél a hordozó jó kötési aktivitást mutatott. 17. példa 100 mg GOD-t 50 ml 0,01 mólos foszfát-pufferben (pH=6,8) 0,5 ml glutárdialdehiddel (25%-os) keverés közben 4 °C-on 3 órán át térhálósítunk. A kapott terméket liofilizáljuk, 10 ml 0,01 mólos foszfát-pufferben (pH=7,0) oldjuk és a 4. példa szerint aktivált nylon 2 g mennyiségével reagál tatjuk. A reakciókörülmények a következők : szobahőmérséklet, 3 órán keresztül. 0,1 mólos foszfát-pufferrel, — amely NaCl-ra nézve 1 mólos és pH értéke 7,8-mosva a granulátum aktivitása 115 U/g. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás biológiailag aktív proteinek rögzítésére, azzal jellemezve, hogy 7000—120 000 molekulasúlyú poliamid-hordozót — vagy az említett poliamiddal bevont egyéb hordozót — —80 és 50 C közötti hőmérsékleten szervetlen klórozó-szerrel klórozzuk, és az így kapott terméket a) vizes oldatban közvetlenül reagáltatjuk valamely 5 biológiailag aktív proteinnel, vagy b) valamely, legalább egy primer aminocsoportot vagy hidrazidcsoportot tartalmazó ismert bifunkciós vegyület egy mólos feleslegével reagáltatjuk, adott esetben vizes közegben vagy szerves oldószerben, majd az 10 így kapott terméket vagy közvetlenül a proteinnel vagy először legalább egy ismert bifunkciós vagy polifunkciós protein-reagenssel — előnyösen dialdehiddel—, majd ezután a proteinnel vagy a proteinnek a protein-reagenssel képezett reakciótermékével reagáltatjuk. 15 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy egyéb hordozóanyagként szilárd polimert használunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási mód-20 ja, azzal jellemezve, hogy klórozó-szerként PClj-ot, SOCl2-t, COCl2-t vagy S02Cl2-t használunk. 4. Az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy olyan hordozóanyagot használunk, amely poliamidrostokkal, 25 vagy -pelyhekkel bevont felülettel rendelkezik. 1 db rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 81.1227.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató 6