176399. lajstromszámú szabadalom • Eljárás baktériumsejtanyag előállítására
9 176399 10 hőmérséklet levegőztetés nyomás fordulatszám pH 37 °C, 80 Nm3/óra, 0,67 wm, 0,1 bar, 390 fordidat/perc, 6,8. s A fő-fermentort az elő-fermentor 200 liter fermentációs elegyével oltjuk be. A fő-fermentor 2000 liter táptalajt tartalmaz (összetétele megegyezik az 1. példa elején megadottal, de nem 10 tartalmaz agart). A metanol koncentrációt az 1. példában leírt módon mérjük, és 40 : 60 térfogatarányú metanol-víz elegy hozzáadásával úgy szabályozzuk, hogy a fermentorban 10 és 50 ppm közötti közepes szabad metanol koncentrációt tart- 15 sunk fenn a táptalajban. A folyamatos üzemet 7-10 kg sejtanyag/liter termelése után indítjuk be. A tápközeget 0,25/óra átfolyási aránnyal (D) adjuk hozzá, ezt az értéket mintegy 12 óra után 20 D = 0,33/órára emeljük, ami mintegy 650 liier/órát jelent. Ezen idő után beáll a folyási egyensúly. A közepes szabad metanol koncentrációt ekkor 10 és 20 ppm között tartjuk. Az elszaporodott mikroorganizmusokat tartalmazó tápközeg megfelelő meny- 25 nyiségét leszívatjuk, egy közti tartályban metanol hozzáadása nélkül 1-2 órán át állni hagyjuk, majd végrehajtjuk az 1. példában leírt módon a sejt leválasztást és a szárítást. Az így kapott sejtanyag 2—4% maradék nedvességet és (a nitrogén tartalom x 6,25 képlettel számolva) 81% nyers proteint, 70% aminosavat, ahol az esszenciális aminosavak mennyisége az ossz amino sav mennyiség 50%-a, 8-10% nuklein savat, 5-10% nyers zsírt és 5—10% nyers hamut tartalmaz. Az eljárás hozama nem folyamatos megoldás esetén 25—30 g/liter. Folyamatos eljárásnál a hozam: 5-6 g/liter óra. Az ismert eljárásoknál a kapott biomassza nem kívánatos nukleinsavtartalma legalább 15%, ezzel szemben a találmány szerinti eljárással kapott biomasszánál a nuklein savtart alom előnyösen 12% alatt van. Az ismert megoldásoknál a kapott biomassza aminosavtartalma mindössze 64%, ezzel szemben a találmány szerinti megoldással előállított biomasszában az aminosavtartalom 70-78% között van. A találmány szerinti eljárással előállított sejtmassza (bioprotein) tulajdonságait az egyéb ismert fehéijeforrásokkal összehasonlítva az alábbi eredményeket kapjuk: II. táblázat %-ban Fehéijehordozó Aminosavak Nem fehéije eredetű N Nyers zsír Hamu Szénhidrát bioprotein 70 8-10 5-10 5-10 — halliszt 56 10 5 15 4 szójadara 41 5 1 6 36 sovány tejpor 35-1 8 50 A bioprotein további előnye, hogy az aminosavak között nagy mennyiségben található lizin és triptofan, viszont a metionin- és cisztin-tartalom viszonylag csekély. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás baktériumsejtanyagnak a Methylomonas családba tartozó baktériumok aerob körülmények között, szénforrásként metanolt, nitrogénforrásokat és esszenciális ásványi sókat tartalmazó tápközegben végzett tenyésztésével történő előállítására, azzal jellemezve, hogy a Methylomonas dara ATCC 31226 jelű törzset a táptalaj 45 súlyára vonatkoztatva 5 és 150 ppm közötti menynyiségű metanolt tartalmazó táptalajon tenyésztjük 30-42 °C hőmérsékleten, 4,0-9,0 pH értéken percenként 0,1-1,5 liter levegő átfujása mellett, majd a kapott sejtanyagot ismert módon elkülönít- 50 jük, vízzel mossuk és szárítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a tenyésztést folyamatos üzemben, a tápközeg súlyára vonatkoztatva 5 és 30 ppm közötti metanol-koncentrádó fenntar- 55 tása mellett hajtjuk végre. A fatel: . Köaazdsiigi és Jód K6ny*»d6 jgaagrtój.-----------------814156 - Zrínyi Nyomda, Budapest 5