176399. lajstromszámú szabadalom • Eljárás baktériumsejtanyag előállítására
3 176399 4 mellett azonban a mikroorganizmus nem tud toxikus metabolitokat, színezékeket felhalmozni, lecsökken a nukleinsavak és zsírok mennyisége és megnövekszik a sejtmassza fehéijetartalma, ami a takarmányként való felhasználás szempontjából igen kedvező. Az eljárást olyan jól levegőztetett fermentorokban hajtjuk végre, amelyek a metanol, mint egyedüli szénforrás mellett sókat, így kálium-nitrátot, ammónium-szulfátot, nitrogénforrásként ammónium-foszfátot vagy ammóniát tartalmazó tápközeggel vannak töltve. A tápközeg ezenkívül foszfátokat, mint a kálium-dihidrogén-foszfát vagy a dinátrium-hidrogénfoszfát, valamint magnézium- és kálium-sókat is tartalmaz, ezenkívül vannak benne olyan nyomelemek, így különösen vas-, réz- és molibdén-sók, melyek például a vezetéki vízben előfordulnak. Az eljárás célszerűen 30 °C és 42 °C között, előnyösen 35 °C és 39 °C között hajtjuk végre. A találmány szerinti eljárást ismert fermentáló edényekben, például átlevegőztetett keverős tartályokban vagy akár modem fermentorokban is, mint a gyűrűs reaktorok, szakaszos vagy folyamatos üzemben hajtjuk végre. A folyékony tápközeget a fermentációs edényben literenként és percenként 0,1—1,5 liter levegővel levegőztetjük. A betartandó metanolkoncentrációt folyamatosan különböző módokon vezérelhetjük, például a nitrogén-felhasználás mérése útján, a szuszpenzióban a baktériumsejtanyag mennyiségének mérése útján, vagy előnyösen a széndioxid-kibocsátás mérésével. Ezáltal lehetséges a pontos metanoladagolás, gyorsan reagálva a szénhiány következtében fellépő széndioxid-kibocsátás csökkenésére. Ez a szabályozás különösen előnyös módon történhet az eltávozó levegőben levő gáz formájú metanol lángionizációs detektorral való mérése útján is. A tápközegből és a növekvő baktériumsejtanyagból álló fermentációs szuszpenzió pH értéke 4,0 és 9,0 között, előnyösen 6,0 és 7,2 között van. Ha a fermentációs szuszpenzió pH értéke az előírt érték alá süllyed, akkor megfelelő mennyiségű alkáliét, például nátrium- vagy kálium-hidroxidot adagolunk be. A túl magas pH értéket pedig sav, például sósav vagy kénsav hozzáadásával csökkentjük. A baktériumsejtanyag leválasztása szokásos módon, például többszöri mosás mellett végrehajtott centrifugálással történik. Ennél a műveletnél , dekantálókat és szeparátorokat alkalmazhatunk. Ily módon pasztaszerű baktériumsejtanyagot kapunk, amely még 75-90 súlyszázalék vizet tartalmaz. A szárítás különböző módon történhet, például hengeres szárítással, örvényágyas szárítással vagy , porlasztásos szárítással. Az így megszárított termék * már csak 1—4 súlyszázalék vizet és 80—90 súlyszázalék nyers proteint tartalmaz. Ebben a nyers proteinben 75-78 súlyszázalék anünosav van. Az esszenciális aminosavak mennyisége mintegy t 50% ezen belül. A termék nukleinsav, zsír és szénhidrát tartalma csekély. A nukleinsav tartalom 10 és 14 súlyszázalék, a zsír tartalom 5 és 10 súlyszázalék, a szénhidrát tartalom pedig 5 és 10 súly százalék között van. É Különösen előnyös, hogy a találmány szerint kapott szárított baktériumsejtanyag nem tartalmaz pigmenteket, toxikus anyagokat, tartalék anyagokat, mint a nyálkák és a polihidroxi-vajsav, zavaró 5 illatanyagokat és szekunder metabolitokat. A találmány szerinti eljárással kapott száraz baktériumsejtanyag ezért különösképpen alkalmas fehérjeforrásként élelmiszer és takarmány célokra. Az új Methylomonas dara spedes FH—B—5460 10 ATCC 31226 a következőképpen jellemezhető: I. Növekedési sajátságok: a) Nem növekszik glukóz agaron vagy glukózos 15 közegben, hús-bouillon agaron vagy hús-bouillon tápközegen, zselatinon, pepton agaron vagy tápközegen, lakmusztejen, burgonyatápközegen, aminosav tápközegen. b) Növekszik metanolt tartalmazó szintetikus 2o tápközegen. II. Morfológia: a) Rövid, 0,5—1,5 fi-os pálcikák, poláris csillók- 25 kai mozognak, nincs spóra- és dsztaképződés. b) A kolónia forma kerek, áttetsző, enyhén fénylő. c) Nincs pigmentképződés. 30 III. Fiziológia: a) Növekedés: 20 °C-nál ± 25 °C-nál * 30 °C-nál « 35 35 °C-nál +++ 37 °C-nál ♦+++ 39 °C-nál +++ 41 °C-nál ♦. Optimális növekedési hőmérséklet: 37 °C. w Optimális pH érték: 6,8—7,0 Gram-negatív. b) Növekedési faktorok: nem szükségesek. c) Növekedési feltételek: polihidroxivajsav-képződés > kataláz +, indol-képződés 9 izodtrát- +, dehidrogenáz aceton-képződés 9 malatde- +, hidrogenáz nitrát redukálás ♦ > oxidáz +, dtokromoxidáz +, kénhidrogén- -, képződés zselatinelfolyósítás-1 trimetilaminon -, keményítőhidrolízis ~~9 monometilaminon dtfomsav-képződés 9 formiáton -, tej koagulálás » formaldehiden -, cukron, poli- -, szacharidokon növekedés: alkoholokon -, (metanolon kívül) ammónium-sókon +, karbamidon 9 nitrogén +, megkötés dimetilaminon széndioxid +. megkötés 2
