176294. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antigének és antitestek meghatározására
21 176294 22 részecskék szuszpendálása céljából. Ezután az 1. példa (1) pontjában leírt módon reagenst készítünk, amely antifibrinogén-antitestekkel érzékenyített szilíciumdioxid szuszpenziójából áll. Az 1. példa (1) pontja szerint alkalmazott 0,481 mikrométer részecskeméretű polisztirol-latex helyett az ilyen módon előállított szilícium-dioxid-szuszpenziót használjuk, és másmilyen koncentrációjú (0,05 súly%) marhaszérum-albumin-oldatot alkalmazunk. Ezután meghatározzuk az antifibrinogénnel érzékenyített szilícium-dioxid reagens alkalmazásával a standard fibrinogén-oldatok extinkcióját az 1. példa (2) pontjában ismertetett módon. A kapott eredményeket a IV. táblázatban mutatjuk be. IV. Táblázat 5 Standard fibrinogén-oldat koncentrációja, (mikrogramm/ml) Extinkció 1,2 mikrométernél 0,2 0,028 10 0,4 0,126 0,6 0,287 0,8 0,460 15 1,0 0,631 V. Táblázat Ismeretlen minta hígítási száma anyag faktor 1. Vizelet X 1 2. Vizelet x 10 3. Vizelet x 1 4. Szérum x 1 5. Szérum X 1 6. Rákos mellhártyatéri folyadék X 400 Az 1. példa (2) pontjában leírtak szerint eljárva, a IV. táblázatban szereplő értékek grafikus ábrázolásával kalibrációs görbét állítunk fel, amely a 8. 45 ábrán látható. A 8. ábráról leolvasható, hogy a fibrinogén-koncentráció és az extinkció között lineáris összefüggés áll fenn, ha a standard fibrinogén-oldat koncentrációja 0,4 mikrogramm/ml vagy ennél nagyobb. 50 Ezután elvégezzük betegektől nyert ismeretlen minták (vizelet, szérum és mellhártyatéri folyadék) vizsgálatát az 1. példa (3) pontja szerinti módszer alkalmazásával az ismeretlen minták fibrinogén-tartalmának meghatározása céljából. A kapott ered- 55 ményeket az V. táblázatban foglaljuk össze. 4. példa Az 1. példa (1) és (2) pontjában leírtak szerint 60 járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a 0,481 mikrométer átlagos részecskeátmérőjű polisztirol-latex helyett 0,804 mikrométer átlagos részecskeátmérőjű polisztirol-latexet (gyártó Dow Chemical Co., szilárdanyag-tartalma 0,1 súly%) és 0,1 súly% marha- 65 Fibrinogén-koncentráció ismeretlen mintában Mért extink(mikrogramm/ml) ció-érték találmány szerinti módszer radioimmun módszer 0,125 0,400 0,359 0,210 5,000 5,117 0,110 0,380 0,368 0,440 0,770 0,800 0,490 0,830 0,892 0,211 200 197,4 szérum-albumin koncentrációt használunk, továbbá az extinkció mérését 1,2 és 1,7 mikrométer hullámhosszúságú fénnyel végezzük. A kapott eredményeket a VI. táblázat tartalmazza. VI. Táblázat Standard fibrinogén-oldat koncentrációja, mikrogramm/ml Extinkció 1,2 mikro- 1,7 mikrométernél méternél 0,2 0,127 0,083 0,4 0,258 0,198 0,6 0,418 0,452 0,8 0,388 0,592 1,0 0,258 0,622 11
