176294. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antigének és antitestek meghatározására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 176294 Bejelentés napja: 1977. VIII. 16. (MI—622) Japán-beli elsőbbsége: 1976. VIII. 16. (97158-1976) Nemzetközi osztályozás: G 01 N 21/02, 33/16 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1980. VII. 28. Megjelent: 1981. VIII. 31. Feltalálók: Szabadalmas: Sawai Masanobu vegyész, Sudo Tadamitsu vegyész, Kanagawa, Enomoto Mitsubishi Chemical Industries Shogo vegyész, Saitama, Japán Limited, Tokió, Japán Eljárás antigének és antitestek meghatározására 1 A találmány tárgya eljárás antigének és antitestek meghatározására. Közelebbről, a találmány tárgya eljárás antigének és antitestek kvantitatív mérésére. A találmány szerint valamely antitestet vagy antigént kis részecskeátmérőjű, oldhatatlan hor- 5 uozón rögzítünk az oldhatatlan hordozó részecskék érzékenyítése céljából, az érzékenyített hordozót megfelelő antigénnel, antitesttel vagy elegyükkel reagáltatjuk, a reakcióelegyet meghatározott hullámhosszúságú fénnyel sugározzuk be és a reakció- 10 elegy extinkcióját mérjük. Egyre nagyobb szükség van rçpdkivül csekély •koncentrációban jelenlevő, biológiailag aktív anyagok, például antigének, antitestek gyors, pontos, kvalitatív és kvantitatív meghatározására. Jelenleg 15 számos helyen kívánatos a testfolyadékokban jelenlevő gyógyszerek meghatározása. Ezen túlmenően, az orvosi diagnózishoz gyakran igen fontos annak ismerete, hogy jelen vannak-e különféle olyan anyagok, amelyeket a beteg bevesz, vagy pedig a 20 szervezet maga szintetizál. Ismeretes, hogy az antitestek vagy antigének félkvantitatív kimutatása olyan módon hajtható végre, hogy antitestet vagy antigént hordozó latexrészecskéket megfelelő antigénnel vagy antitesttel 25 reagáltatunk üveglemezen, és vizuális úton megfigyeljük az agglutinációt. Az elmúlt évek során eljárást ismertettek antigének és antitestek kvantitatív meghatározására [Croatica Chemica Acta, 42,457—466 (1970) és 30 2 European Journal of Biochemistry, 20(4), 558-560 (1971)]. Az ismert eljáráshoz valamely antitestet vagy antigént hordozó latex-részecskéket alkalmaznak, és a hordozón jelenlevő antitestet vagy antigént megfelelő antigénnel vagy antitesttel reagáltatják a latex-részecskék agglutinálása céljából, majd pedig látható fénysugár segítségével mérik a latex feletti folyadék zavarosságának csökkenési sebességét. Ilyen módon tehát a latex-reagens agglutinációját használják fel az antigén vagy az antitest meghatározására. Mivel az ismert eljárásnál a zavarosság csökkenésének sebességét mérik, szükség van arra, hogy rendkívül kis koncentrációban, például 0,007-0,028% között alkalmazzák az antitesttel vagy antigénnel érzékenyített latexet, stacionárius állapotban végezzék el a latex és az antigén vagy antitest reakcióját, eltávolítsák azokat az esetleges szennyező anyagokat, amelyek befolyásolhatják a minta zavarosságát, stb. Mindezek következtében hátrányos a fenti ismert eljárás, amennyiben elkerülhetetlenül csökken az antigén-antitest reakció sebessége, továbbá, sem a pontosság, sem pedig a reprodukálhatóság nem kielégítő az antigének vagy antitestek meghatározásához, valamint, a szennyező anyagok eltávolítás? egyes esetekben rendkívül bonyolult műveleteket igényel. Ezért az ismert eljárás nehezen alkalmazható olyan antigének meghatározására, mint a fibrinogén (Fg), humán chorion-gon-176294
