176133. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és szer az MB-kreotinkináz aktivitásának meghatározására testfolyadék- mintákban
176133 20 segédreakciókat követő fotometriás méréssel meghatározzuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kecskéknek az 1. igénypontban megadott módon történő beoltása útján nyert antitesteket alkalmazunk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítást' módja, azzal jellemezve, hogy a mintának az antitestekkel való inkubálása előtt ugyanabban a mintában a kreatinkináz-összaktivitást is meghatározzuk. 4. Szer az MB-kreatinkináz izoenzim-hibrid aktivitásának testfolyadék-mintákban MM-kreatinkináz (izom-kreatinkináz) jelenlétében az 1. igénypont szerint történő meghatározására, azzal jellemezve, hogy oly antitesteket tartalmaz, amelyek az MM-kreatinkináz- és MB-kreatinkináz-izoenzimek M-alegységének enzimaktivitását teljesen gátolják, anélkül, hogy ugyanakkor az adott esetben jelenlevő MB-kreatinkináz B-alegységének enzim-aktivitását inaktiválnák, és amely antitestek kreatinkináz-szubsztrátumok jelenlétében is teljes gátlást tudnak kifejteni, és olyan enzimszubsztrát-puffer keveréket tartalmaz, amely egy segédreakciót követő fotometriás mérés útján lehetővé teszi a kreatinkináz aktivitásának meghatározását. 5. A 4. igénypont szerinti szer kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az kecskékből nyert antitesteket tartalmaz. 6. A 4. vagy 5. igénypont szerinti szer kiviteli alakja, azfeal jellemezve, hogy az olyan antitesteket tartalmaz, amelyek a mintában 2500 egység/liter koncentrációig képesek teljesen gátolni az MM- és MB-kreatinkináz M-alegységének aktivitását. 7. A 4—6. igénypontok bármelyike szerinti szer kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az enzim szubsztrát-puiFer keverékben az enzimszubsztrát-rész kreatin-foszfátból, redukált glutationból, adenozin-difoszfátból (ADP), nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfátból (NADP), adenozin-monofoszfátból (AMP), hexokinázból, glükóz-6-foszfát-dehidrogenázból, glükózból és magnézium-acetátból áll. 8. A 7. igénypont szerinti szer kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az enzimszubsztrát-puffer keverékben a puffer vízben oldott trietanolamin-acetát, és pH-értéke 7 körül Van. 9. A 4—6. igénypontok bármelyike szerinti szer kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az enzimszubsztrát-19-puffer keverékben az enzimszubsztrát-rész kreatin-foszfátból, adenozin-difoszfátból (ADP), nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfátból (NADP), adenozin-monofoszfátból (AMP), hexokinázból, glükóz-6-foszfát-dehidrogenázból, glükózból, magnézium-acetátból, N-acetil-ciszteinből, etiléndiamin-tetraacetátból (EDTA) és adenozin(5')-pentafoszfo-(5')adenozinból áll. 10. A 9. igénypont szerinti szer kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az enzimszubsztrát-puffer keverékben a puffer vízben oldott imidazol-acetát, és pH-értéke 6,7 körül van. 11. A 7. vagy 8. igénypont szerinti szer kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az enzimszubsztrát-puffer keverék komponensei közül a kreatin-foszfát 35 mM, az ADP 1 mM, a NADP 0,6 mM, az AMP 10 mM, a hexokináz 1200 egység/1, a glükóz-6-foszfát-dehidrogenáz 1200 egység/1, a glükóz 20 mM, a magnézium-acetát 10 mM, a redukált glutation 9 mM és a 7 pH-értékű trietanolamin-acetát puffer 100 mM töménységben van jelen a vizsgálati elegyben. 12. A 9. vagy 10. igénypont szerinti szer kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az enzimszubsztrát-puffer keverék komponensei közül a kreatin-foszfát 20 mM, az ADP 2 mM, a NADP 2 mM, az AMP 10 mM, a hexokináz 2500 egység/1 vagy ennél nagyobb, a glükóz-6- -foszfát-dehidrogenáz 1500 egység/1 vagy ennél nagyobb, a glükóz 20 mM, a magnézium-acetát 10 mM, az N-acetil-cisztein 20 mM, az EDTA 2 mM, az adenozin(5')-pentafoszfo-(5')adenozin 10 mM és a 6,7 pH- értékű imidazol-acetát puffer 100 mM töménységben van jelen a vizsgálati elegyben. 13. Az 5—12. igénypontok bármelyike szerinti, kreatinkináz teljes aktivitásának és MB-kreatinkináz aktivitásának egy mintában történő, párhuzamos meghatározására alkalmas szer kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az olyan antitesteket tartalmaz, amelyek az MM-kreatinkináz- és MB-kreatinkináz-izoenzimek M-alegységének enzimaktivitását teljesen gátolják, anélkül, hogy ugyanakkor az adott esetben jelenlevő MB-kreatinkináz B-alegységének enzimaktivitását inaktiválnák, és amely antitestek kreatinkináz-szubsztrátumok jelenlétében is teljes gátlást tudnak kifejteni, és olyan enzimszubsztrát-puffer keveréket is tartalmaz, amely egy segédreakciót követő fotometriás mérés útján lehetővé teszi a kreatinkináz aktivitásának meghatározását. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 81.950.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen •— Felelős vezető: Benkő István igazgató 10
