176133. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és szer az MB-kreotinkináz aktivitásának meghatározására testfolyadék- mintákban
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 176133 ÆgÊL Nemzetközi osztályozás : toy Bejelentés napja: 1976. XI. 3. (ME—2027) G 01 N 33/16 tpgp Elsőbbsége: Német Szövetségi Köztársaság 1975. XI. 3. (P 25 48 963.8) G 01 N 31/14 ORSZÁGOS Közzététel napja: 1980. VI. 28. ÆX TALÁLMÁNYI 1 ^ .1* HIVATAL Megjelent: 1981. VII. 31. íniaiiH* Feltalálók : dr. Würzburg Uwe, immunológus, Darmstadt, dr. Hennrich Norbert, biokémikus, Darmstadt, dr. Orth Hans-Dieter, biokémikus, Darmstadt, dr. Lang Hermann, biokémikus, Darmstadt, Német Szövetségi Köztársaság Szabadalmas: Merck Patent Gesellschaft mit beschränkter Haftung Darmstadt, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás és szer az MB-kreatinkináz aktivitásának meghatározására testfolyadék-mintákban 1 A találmány tárgya eljárás és szer az MB-kreatinkináz aktivitásának emberi testfolyadékban történő meghatározására. A kreatinkináz (ATP-kreatin-foszfotranszferáz, E. C. 2.7.3.2; rövidítve: CK) aktivitásának a szérumban való meghatározását tekintik a legérzékenyebb laboratóriumi módszernek a váz- és szívizomzat megbetegedéseinek, különösen a szívizom-infarktusnak a diagnosztikájában. Nehézséget okoz azonban a váz- és szívizomzat traumatizálódásának megkülönböztetése, különösen a szívizom-infarktus differenciális diagnosztikájában. A kreatinkináz összaktivitásának meghatározásával nem lehet bizonyossággal történő differenciálást biztosítani. Ezért megkísérelték már a kreatinkináz-aktivitás meghatározásának diagnosztikai értékét oly módon növelni, hogy mérték a különféle enzimek aktivitását a szérumban és a kapott mérési eredményeket korrelációba hozták egymással, például a kreatinkináz-aktivitás és a glutamát-oxálacetát-transzamináz-aktivitás hányadosának képzése útján. Az ilyen hányadosok azonban más okokból nem alkalmasak a szív- és tüdő-infarktus diagnosztikai megkülönböztetésére, valamint a szívinfarktus és a sokk-következmények megkülönböztetésére sem. A kreatinkináz a szervezetben három izoenzim alakjában fordul elő, ezek a következők: a főként az izomzatban előforduló és így izom-kreatinkináz-enzimnek is nevezhető MM-kreatinkináz, a például az agyban előforduló BB-kreatinkináz és a hibrid MB-kreatinkináz, amely utóbbi egy M-alegységből és egy B-alegységből áll és például a szívizomban fordul elő. A vérben (szé-2 rumban) fellépő kreatinkináz-aktivitás normális körülmények között az MM-kreatinkináz-izoenzimre vezethető vissza, mert a BB-kreatinkináz-izoenzim nem lép át a likvor-vér-korláton, az MB-kreatinkináz-izoenzim 5 jelenléte pedig bizonyos szervekre, például a szívizomra van korlátozva. A szívizom sérüléseinél, például szívinfarktus esetében azonban a vérben (szérumban) is felszabadul az MB-kreatinkináz-izoenzim és ezen a helyen ki is mutatható. 10 Ennek az MB-kreatinkináz izoenzimnek az MM- kreatinkináz-izoenzim melletti kimutatása a szérumban a legérzékenyebb és differenciális diagnosztikai szempontból leginkább jellemző laboratóriumi módszer a szívinfarktus kimutatására. A szívizom mellett ugyan 15 még néhány további szerv (például a hasnyálmirigy, a rekeszizom, az aorták, a tüdő és a méh) is tartalmaz MB-kreatinkináz-izoenzimet, ennek aktivitása azonban ezekben a szervekben körülbelül százszor kisebb, mint a szívizomban, úgyhogy az említett további szervekből 20 esetleg szabaddá váló MB-kreatinkináz-aktivitás a kimutathatósági határ alatt marad. Az MB-kreatinkináz-izoenzim-aktivitás meghatározásának eddig szokásos módszerei lényegében három eljárásra vezethetők vissza: 25 1. Különféle hordozókon lefolytatott elektroforézis. Ilyen eljárást ismertet például A. F. Smith, Clin. Chim. Acta, 39, 351—359 (1972) továbbá Roberts R. és munkatársai, Am. J. Cardiol., 33, 650—654 (1974). Az így 30 kapott eredmények olykor ellentmondóak; gyakran 176133
