176003. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ergokrisztint termelő, rozsra-virulens claviceps-purpurea törzs spóratenyészetének előállítására
176003 MAGYAR népköztársaság SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1977. XII. 30. (RI-654) Nemzetközi osztályozás: C 07 D 519/02, C 12 K 1/00 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1980. IV. 28. Megjelent: 1981. IV. 30. > » Feltalálók: Szabadalmas: Vásárhelyi Gyöngyvér oki. agrármérnök, Szentendre 20%, dr. Tétényi Péter okL Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt., kertészmérnök 10%, Zámbó István okl.vegyész 10%, Kiniczky Márta oki. Budapest gyógyszerész 10%, Balassa Jánosné sz. Bárkányi Ilona biológus-mikrobiológus 15%, Kiss János oki. vegyészmérnök 10%, Pécsné, Rázsó Ágnes oki. vegyészmérnök 15%, Zsóka Istvánné sz. Somkuti Erzsébet mikrobiológus 10%, Budapest Eljárás ergokrisztint termelő, rozsra-virulens Claviceps purpurea törzs spóratenyészetének előállítására 1 2 A találmány tárgya eljárás új, ergokrisztint termelő, rózsa virulens Gaviceps purpurea törzs spóratenyészetének előállítására. Az anyarozs alkaloidok előállításának ma már két eltérő jellegű útja ismeretes, a termesztett, 5 gyűjtött drog extrakcióján alapuló eljárások, illetve arra alkalmas Claviceps törzsekkel a steril fermentációs alkaloidtermelés. Utóbbi iparszerű gyártására ismeretesek már realizált eljárások (15 631, 151 724, 152 238, 164 816 számú magyar szaba- 10 dalmi leírások), ennek ellenére a drogtermesztés nem vesztette el jelentőségét, a világ peptidalkaloid termelésének jelentősebb hányada ma is különböző alkaloidfajtákra dúsított drogot használ fel. Különösen érvényes ez az ergokrisztin és az ergotamin 15 vonatkozásában. A peptidalkaloidok oldallánca prolinból, egy csoport jellemző aminosavból és egy - a csoporton belül - a vegyületre jellemző aminosavból áll. Fenti két alkaloidvegyület (az ergokrisztin és az ergotamin) jellemző aminosava a 20 fenilalanin. A fenilalanin képződését, illetve tulprodukeióját igen nehéz a néhány nap alatt lezajló fermentációs bioszintézis során biztosítani, mert ugyanez idő alatt az aromás aminosavak szintéziséből a lizergsav-rész felépítéséhez nagymennyiségű 25 triptofánra is szükség lenne. A törzsfenntartás és az átd tások során az anyagcsereutak egyensúlyozó regulációja az ergotamin és ergokrisztin termelő törzseket ergokomin, majd vízddékony alkaloidok irányba tolhatja el, s ez a tény is hozzájárul 30 ahhoz, hogy a fermentációs eljárások a későbbiekben nem voltak sikerrel reprodukálhatók (104 613 számú csehszlovák, 1 215 637 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli és az 1 192 912 számú Nagy-Britannia-í szabadalmi leírások). A drog feldolgozásán alapuló technológiák műszaki színvonalának fejlesztése fentiek alapján követelő igény, ennek első és a továbbiakat meghatározó pontja megfelelő alkaloidtermelő törzs előállítása. Az ergdinvázas alkaloidokat termelő C. purpurea törzs előállítási eljárása több korábbi szabadalomnak is tárgya, amelyekben változó úton igyekeznek magasabb hozamú törzshöz jutni. A 321468 számú szovjet szabadalmi leírás eljárást ismertet, melyben az ergotoxin gyártás céljára bizonyos telepmorfológiával és spóramérettel jellemezhető törzset választanak ki. A 232 467 számú szovjet szabadalmi leírás mesterséges táptalajon a fentivel csaknem azonos morfológiát adó, 80%-ban ergokriptint termelő törzset ír le. A 154 035 számú magyar szabadalmi leírás gyors és hatékony módszert ismertet arra vonatkozóan, hogy miképp lehet speciális táptalajon a telep színe alapján az ergotoxin termelésre képes Gaviceps tenyészeteket az eigotamintermelő egyedek rovására feldúsítani. A magas alkaloidhozamú törzs előállításának fontos lépései: 1. a C. purpurea törzs kinemesítése 176003