175673. lajstromszámú szabadalom • Eljárás baktériumellenes diamino-ciklitol-származékok előállítására
3 175673 4 no-2-hidroxi-propionil)-gentamicin B és gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóik. A találmány szerint előállított vegyületeket az I, II és III általános képletek szemléltetik. Az I általános képletben X az 1-N-szubsztituens és Y a következő aminoglikozil-csoportok egyike: az a) képletű csoport 1-N-X-gentamicin B, a b) képletű csoport 1-N-X-gentamicin Bj, a c! képletű csoport 1-N-X-gentamicin C1( a d) képletű csoport 1-N-X-gentamicin Cla, ah) képletű csoport 1-N-X-verdamicin, az i) képletű csoport 1-N-X-sziszomicin, a j) képletű csoport 1-N-X-JI-20A antibiotikum, a k) képletű csoport 1-N-X-JI-20B antibiotikum, az I) képletű csoport l-N-X-G-52 antibiotikum, az m) képletű csoport 1-N-X-G-418 antibiotikum aminoglikozil-részét ábrázolja. A II általános képlet az I-N-X-66-40D antibiotikumot, a III általános képlet Y' jelű aminoglikozilcsoportként i) képletű csoportot tartalmazó 1-N-X-66-40B antibiotikumot szemléltet. Az eredeti antibiotikumok (ahol az I, II és III általános képletekben X jelentése hidrogénatom) ismert vegy ületek. A 66—40B és 66—40D antibiotikumok együtt képződnek a sziszomicinnel, a Micromonospora inyoensis fermentálásánál kapott főtermékkel (1 274 518 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás). A 66—40B és 66— 40D antibiotikumok a fermentációs közegből a 811 370 számú belga szabadalmi leírásban ismertetett speciális kromatográfiás szétválasztási technika alkalmazásával különíthetők el. A találmány szerint a gentamicin B, gentamicin Bj, gentamicin gentamicin Cla, sziszomicin, verdamicin, 66—40B antibiotikum, 66—40D antibiotikum, JI—20A antibiotikum, JI—20B antibiotikum és G—52 antibiotikum 4,6-di(amino-glikozil)-l,3-diamino-ciklitolok 1-N-szubsztituált származékait és gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóikat, ahol az 1-N-szubsztituenst X-szel jelöljük, és X jelentése S-3-amino-2-hidroxi-propionil- vagy S-4-amino-2-hidroxi-butiril-csoport, azzal a korlátozással, hogy gentamicin Cj és gentamicin Cla esetében X S-3-amino-2-hidroxi-butiril-csoport, úgy állítjuk elő, hogy a) egy fenti 4,6-di(amino-glikozil)-l,3-diamino~ciklitolt, amely az 1-helyzet kivételével bármely helyzetben amino-védőcsoportot tartalmazhat, egy HO—X' általános képletű savval —» ebben a képletben X'jelentése azonos X fenti jelentésével és az aminocsoport és/vagy a hidroxilcsoport védett lehet — karbodiimid jelenlétében vagy a sav reakcióképes származékával reagáltatunk vagy b) egy fenti 4,6-di(amino-glikozil)-l,3-diamino-ciklitolt, amely savaddíciós só képzésével részlegesen semlegesített, egy HO—X' általános képletű savval — ebben a képletben X' jelentése azonos X fenti jelentésével, és az aminocsoport és/vagy a hidroxilcsoport védett lehet — karbodiimid jelenlétében vagy a sav reakcióképes származékával reagáltatunk, majd az a) vagy b) eljárásváltozattal kapott vegyületről a jelenlevő védőcsoportokat lehasítjuk és a terméket szabad alakban vagy savaddíciós sója alakjában elkülönítjük. Az a) eljárásváltozatban kiindulási vegyületekként általában előnyösen azokat a vegyületeket alkalmazzuk, amelyek 6'—CH2—NH2 csoportja 6'-N-védett származék alakjában van jelen. Előnyös védőcsoportok például a trifluoracetil- és terc-butoxikarbonil-csoportok. A gentamicin Cj előnyösen használható 2',3-di(N-védett)származéka alakjában. A gentamicin B,, verdamicin, G—418 antibiotikum, JI—20B antibiotikum és G—52 antibiotikum alkalmazható védett, de előnyösen szabad alakjában is. A találmány szerinti b) eljárásváltozat során inkább az 1-helyzetű aminocsoport specifikus acilezése következik be, mint más acileződések, ha savaddíciós só képzésével részben semlegesített 4,6-di(amino-glikozil)-l,3- -diamino-ciklitolt alkalmazunk. Egy aminocsoport protonálása ugyanazt a hatást biztosítja, mint a szokásos kémiai blokkoló csoport jelenléte. Meglepő módon azt találtuk, hogy egy 4,6-di(amino-glikozil)-l,3-diamino-ciklitol 1-helyzetű aminocsoportja az utolsó, amely sav hozzáadására protonálódik, és az első, amely deprotonálódik, ha egy persavaddíciós sót bázissal kezelünk. így blokkoló csoportok (protonok alakjában) könnyen bevezethetők a molekulába csupán azzal, hogy az aminoglikozidhoz a szükséges mennyiségű savat hozzáadjuk, vagy az aminoglikozid persavaddíciós sójához a szükséges mennyiségű bázist adjuk. Ez a módszer a találmány szerinti eljárásnak egy előnyös kiviteli módja, és kényelmes eljárást biztosít a 4,6-di(amino-glikozil)-l,3-diamino-ciklitolok 1-N-acilszármazékainak előállítására, részben semlegesített és így részben blokkolt kiindulási vegyületeket alkalmazva. A találmány szerinti eljárásban a „savaddíciós só képzésével részben semlegesített” kifejezés azt jelenti, hogy egy mól 4,6-dí(amino-glikozil)-l,3-diamino-ciklitol a persavaddíciós só képzéséhez szükséges sztöchiometriai mólszámú savnál kevesebbel kapcsolódik. A kifejezés azt is jelenti továbbá, hogy 1 mól 4,6-di(amino-glikozil)-1,3-diamino-ciklitol legalább 1 mól savval kapcsolódik. így például az 5 aminocsoportot tartalmazó gentamicin Cj 1 ekvivalens mennyiségéhez 5 ekvivalens sav szükséges, hogy persavaddíciós só képződjék. A találmány szerinti eljárást úgy végezzük, hogy a gentamicin C] savaddíciós sója kevesebb, mint 5, de legalább 1 ekvivalens savat tartalmazzon (például 4,5, 4,0, 3,5, 3,0, 2,5,2,0,1,5 vagy 1,0 ekvivalens savat). A találmány szerinti eljárás előnyös kiviteli módja szerint a kiindulási vegyületet (n—1) ekvivalens savval semlegesítjük, ahol n a molekulában levő aminocsoportok számát jelenti. így (n—1) aminocsoportot semlegesítünk savaddíciós só képzésével. Az eljárást azonban előnyösen elvégezhetjük részben semlegesített kiindulási vegyületekkel is, ahol a fenti határokon belül (n—1) ekvivalensnél több vagy kevesebb savval képezzük a savaddíciós sót. A találmány szerinti eljárást 5,0—9,0, előnyösen 5,0—8,0 pH-értéken végezzük. A reakcióközeg pH-értéke legelőnyösebben 6,5—7,5, kiváltképpen 6,8—7,2. A „savaddíciós só” kifejezés magába foglalja mindazon sókat, amelyek a bázisos 4,6-di(amino-glikozil)-l ,3- -diamino-ciklitolból és egy savból képezhetők, tekintet nélkül arra, hogy a sav szervetlen vagy szerves. Ilyen savak lehetnek például a kénsav, sósav, foszforsav, salétromsav, ecetsav, propionsav, borostyánkősav, oxálsav, ciklopropilkarbonsav, trimetílecetsav, maleinsav, benzoesav, fenilecetsav, trifluorecetsav stb. Ha kiindulási anyagként olyan savaddíciós sót alkalmazunk, amelyben (n—1) aminocsoport protonéivá van, akkor ezt a vegyületet előnyösen in situ képezzük úgy, hogy egy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
