175652. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-piroglutamil -L-hisztidin -származékok előállítására
7 r?S652 8 egyensúlyba hoztunk. Asz oszlopot ezután a gradiens-etuálás módszerével 1% ecet savat és 1!% piridint tartalmazó vizes oldattal eluáljuk egy 500 ml-es. gömbalakú, 1% ecetsavat és 0,05% piridint tartalmazó vizes oldattal) töltött k everőedén yen át. A terméket tartaknaaó frakciókat összeöntjük, majd bepároljuk, amikoris 205 mg mennyiségben 156—160 °C olvadáspontú amorf csapadék formájában a cím szerinti vegyületet kapjuk. [Rf f3A) 0,27 és Rf (,3B) 0,50.] Savas hidrolízis, alán végzett aminosav-elemzés az alábbi arányértékeket adja: hisztidin 0,95, glutaminsav 0,99 és-3-etdl-prolin! 1,06.. 3. példa L-Piroglutamil-L-hisztidil-3,3-dimetil-DL-prolinamid A) lépés — DL-3,3-Dimetil-prolin 15 ml vízmentes etanolban feloldunk 3,09- g (dO millimól) benziloxikarbonilaminomalonsav-dietifésztert, majd a kapott oldatot hozzáadjuk 10 mg fémnátriumból készült nátrhim-etnlát 3 ml et-anollal készült oldatához. A reakcióelegyhez ezután 840 mg (10 millimól) 3-metiI-2-butenál 6 mi etanoBal készült oktatáti adjuk, majd a reakcióelegyet 25 °C-on 24 órán át keverjük. Ezután 0,28 m! ecetsarval adunk hozzá, majd: az így kaprait oldatot 500 mg. szénhord’ozÓB paltódram ka taMzátort (10% fémtartalommal) használva atmoszferikus nyomáson 24 órán át hidrogénezzük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a szűrleteti pedig bepároljuk, és a kapott maradékot szilikagéllel töltött oszlopon, eluálószerként diet'Méter és. 40—60 °C forráspontú petroléter 1: 1 arányú elcgyét használva kromatográfiásan tisztítjuk, amikoris az cluátum bepártása után 0,9 g. mennyiségben 2,2-dietoxHcarbeiril-3,3-dimetil-pirrolidint kapunk. Ebből a diészterből azután 850 mg-ot 10 ml 5 molt« vizes sósavoldatban visszafolyató hűtő' alkalmazásával 4 órán át forraljuk, amikoris bepárlás után pwr alakú fehér csapadékot kapunk. Ezt azután metanol és dietäéter elegyéből átkristályosrtjuk, amikoris 451 rngmertynyiségben 110—112 °C olvadáspontú fehér kristályok formájában a ein» szerinti vegyület hidrokloridját kapjuk. B) lépés— DL-terc-Butoxikarbonil-3,3-dimetili-prol;in A cím szerinti vegyületet az előző- lépésben kapott vegyület 1,07 g-jából az 1. példa A) lépésébe« ismertetett módon állítjuk elő, amikoris 1,45 g terméket kapunk 101—108,5 °C olvadásponté Miér kristályos csapadék formájában. C) lépés — DL-terc-Buloxikarborni-3^-d*rnetil-pto>linamid A cím szerinti vegyületet az előző lépésben kapott vegyület 900 mg-jából az 1. példa B) lépésében ismertetett módon állítjuk elő, amikoris 375 mg terméket kapunk 115—117 °C olvadáspontú fehér kristályos csapadék formájában. D) lépés— DL-3,3-Dimetil-prolinamid-hidroklorkI A dm szerinti vegyületet az előző lépésben kapott vegyület 300 mg-jából kiindulva az 1. példa C) lépésében ismertetett módon áMttjuk elő, amikoris. 175 mg terméket kapunk 22£f—223) aC olvadáspontú fehér kristályos-csapadék formájába*)!. E) : lépés: — Dt-3v3uDimetifi-pEoünamid: A di® szerinti vegyületet aa: előző lépésben kapott hidirokloridsó' 170» mg-jából kiindiulva a*. 2. példa E) lépésijén isnswrtetett rnódXMt átütjük elő, amikoris 135 mg termékei kapunk. Rf (3A)Q.t9 ésRf (3B) Q;7*0. F) lépés*— LrPino^utamil-L-hKiztidil-3,3^d imetil -DL-prolinamiti A cím; szerinti vegyütetet az előző lépésbe® kapott vegyület 100 mg-jából kiindulva a 2. példa F): lépésében* ismertetet« módon állítjuk elő. amikoris 195 mg fehér port kapunk termékként, amelynek olvadáspontja 180 C (lágyulás 135 °C-nál>. Rf (38) 0*65. Savas knrirolízis utáni aminogav-eíermés az alábbi arányértékeket adja: hisztidin 1,02, glutaminsav 0,89 és 3,3-dimetil-prolin 1,02. Optikai forgatóképesség [<*]“=+5,9° (c= = 1, dimetil-formamid). 4. példa L-Piroglutamil-Hy-metil-L'hisztKtrt-trajisz-3-inietil-L-prolinamid A) lépés — Beirziloxikarbonil-L-piroghatamil-Ny-»netil-L-hászíidin 5 ml vízben feloldunk 428 rag Ny-rnetii-L-hisztidint és 288 mg nátriwm-ltanrfjoeátot, mgjid az oldat pH-ját 8,5- re beállítjuk. Az oldathoz ezután 933 mg benzitoxikarbonii-L-piroghitanrinsav-N-hidroxisziikeinimidoésztear Síri dioxánnal készült oldatát adjuk, mayd a reakcióelegyet 22 °C-on 15 érán át keverjük. Ezután a reakcióelegyet bepárol juk. majd a maradéka* 15 mm x 330 mm méretű, szilikagétből készült oszlopon, ehiálószerként izopropanol, etil-acetát, ecetsav és, viz 3 ; 1 ; 1:1 arányú elegyét használva kromatografáljuk, amÜKwis a megfelelő eluátumfrakci© bepárlása utáa 615 mg mennyiségben 192— 195 °C olvadáspont» fehér csapadék, formájában a dm szerinti vegyületet kapjuk, amelynek optikai forgatóképessége fa]g— —1,3° (c= 1, ditnetii-fonnainid). Rf (3A)Ö,21 ésRf (3B)0,&9. J*j lépés—L-Páoglutanail-N^-metiá-L-hisTtióá-transz-ő-tnetil-fopcwhnataki A cím szerinti vegyületet az előző lépésben kapott vegyidet 207 mg-jából, valamint 77 rag L-tra»«-3-mctiJ-proWnamidtoál kiindulva a 2. példa F) lépésében ismertetett módon átütjük előv amik őrá 90 mg mennyiségű terméket kapunk 135—140 'C olvadáspontról fehér tágroszkópos csapadék formáiéban, ametynrát optikai főtgateképessége fetjg“*-23l,90 (c«l, dintóil-fonaainidX R,(3B)0,60. Elemzési eredaoények a C,#H23Í4Í04 képlet alapján: számított: C%-55,4, H%=»6,7, N%-»21.5; talált: C%*= 55,0. H%.-7,0, 5 10 13 20 23 30 33 40 43 50 53 60 63 4
