175645. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4,5,6,7-tetrahidro-tieno(2,3-c) és(3,2-c) piridinek előállítására
9 175645 10 2-klór-5-metoxikarbonil-4,5,6,7-tetrahidro-tieno [3,2-c]piridin (He képlet R' = C1; R2=H; R4=metil) 4,5 g 2-klór-6-karboxi-4,5,6,7-tetrahidro-tieno [3,2-c] piridint 50 ml metanolban szuszpendálunk és lassú áramban sósavgázt buborékoltatunk rajta keresztül, miközben visszafolyató hűtő alkalmazása mellett melegítjük. Egy órai. melegítés után a kis mennyiségű oldhatatlan anyagot leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. Izopropanolból való átkristályosítás után- fehéres kristályokat kapunk. Op. (paszta) 190—200 °C. Kitermelés 52%. 29. példa 30. példa 2-klór-5-(o-klórbenzil)-6-metoxikarbonil-4,5,6,7- -tetrahidro-tieno[3,2-c]piridin (II képlet R*=C1; R2= =H; R3=o-kIórbenzil; R4=metil) 2,1 g (7,86 mól) 2-klór-6-metoxikarbonil-4,5,6,7- -tetrahidro-tieno[3,2-c]piridin-hidroklorid (29. példa), 1,27 g (7,86 mól) o-klórbenzil-klorid és 1,1 g (7*86 mól) kálium-karbonát és 20 ml dimetilformamid elegyét 21 óráig 100 °C-on tartjuk. Lehűlés után a szervetlen sókat leszűrjük, a szűrletet pedig, miután etanollal mostuk, szárazra pároljuk és a maradékot éterben feloldjuk. A szerves-fázist éterrel mossuk* nátriumszulfáttal szárítjuk és szárazra pároljuk. A kapott, olajat hidrokloriddá alakítjuk, izopropanol-diizopropil-éter-elegyből átkristályosítjuk, fehér kristályokat kapunk. Op. : 125—130 °C. Kitermelés 30%. Az alábbiakban közölt, farmakológiai és toxikológiai vizsgálatok eredményei demonstrálják az (I) és (II) általános képletű vegyületek tulajdonságait, különösképpen azok alacsony toxicitását, kitűnő elviselhetőségüket, valamint vérlemezke csomósodást gátló és anti-trombotikus hatását. I. Toxikológiai vizsgálatok Az (I) és (Il)általános képletű vegyületek kismértékű toxicitásuk és kitűnő elviselhetőségük miatt figyelemreméltók. így az LDJ0/24 óra/testsúly kg értékük, amelyet egereknél orális adagolás útján állapítottunk meg a> Miller és Tainter féle módszer segítségével, mindén származék esetében 350 mg volt, amely igen jó érték. Ugyanezen módszer szerint, de intravénás úton adagolva az LD50/24>óra/testsúly kg érték 118 mg az 1, példában leírt származék esetében, 235 mg a 2. példában és 180 mg a 23. példában, illetőleg 325 mg a 25. példában leírt származékoknál. Továbbá az akut, krónikus, szubkrónikus és-késleltetett mérgezési vizsgálatok, melyeket különböző állatfajtákon végeztünk, nem mutattak ki semmilyen'helyi vagy általános reakciót, sem bármily«! változást ■ a> szabályszerűen befolyásolt biológiai kontroll teszteknél; sem> pedig- rendellenességet a mikroszkópos és makroszkópos vizsgálatok során, melyeket a felboncolt' állatokon, végeztek, a kísértetek' teljessététele érdekében. 1. Vérlemezke-csomósodást gátló hatás A vérmintát Wistar patkányok juguláris vénájából vettük. Ebből a citrátos vérből, centrifugálás után olyan plazmát készítettünk, amely 600 000 ± 20 000 vérlemezkét tartalmazott ml-enként, és ezt a.plazmát használtuk fel .az> összes aggregációs vizsgálathoz. a) Az A.D.P. indukált vérlemezke-csomósodás meghatározása 0,4 ml plazmát szilikonnal bevont csőbe helyeztünk, ami ugyancsak szilikonnal bevont mágnes-rudat tartalmazott; A csövet aggregométerbe helyeztük, ami egy olyan készülékre csatlakozott, amely az optikai sűrűségváltozásokat regisztrálta. Mikor a fényáteresztőképessóg stabilizálódott 0,5 ml 10 p.M A'.D.P.-t (adenozin-difoszfát) tartalmazó oldatot juttattunk, a csőbe. A vérlemezke-csomósodás megnövelte a fényáteresztő-képességet, amit a csomósodás- megszűnésekor csökkenés követett. Az így meghatározott optikai sűrűség maximumajellemzi a csomósodás mértékét. b) Kollagén-indukált vérlemezke-csomósodás meghatározása Az A.D,P. oldatot kollagén, oldattal (bovin tendon extraktum) helyettesítettük. c) Eredmények 20 patkányból álló csoportokat képeztünk, amelyek mindegyike 100 mg/kg vizsgált származékot kapott orálisan. A fenti vizsgálatok so/;\n kapott jelentősebb eredményeket az I. táblázat tartaífnazza, ahol százalékosan megadjuk a referencia esopórthoz viszonyított vérlemezke-csomósodás gátlást, az említett kezelés után három órával. II. Farmakológiai vizsgálatok I. táblázat Kezelés Vegyület (példa) száma Százalékos gátlás A.D.P. Kollagén í. 63,8 95,8 4. 63,1 91,3 5. 62,3 90,5 8, 61,8 90,4 10. 62,2 92,1. 11. 60,5 91,6 12. 61,6 90,8 13. 64,4 96,1 17. 61,2 92,0 20, 60,4 91.5 23; 63,9 95,2 25. 61,6 92,4 28. 60,8 90,2 29. 62,7 92,7 30. 62,4 93,0 2. összetapadást-gátló hatás Ezt a hatást, in vitro, és patkányokon, in- vivo is vizsgáltuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
