175601. lajstromszámú szabadalom • Mikrobiológiai eljárás szekunder glikozidok előállítására primer digitálisz glikozodokból
175601 4 acetilezett szekunder-sorbeli vegyületek előállítására használják. A találmány célja lehetővé tenni a szekunder sorbeli vegyületek előállítását lanatozidokból olyan mikroorganizmusok segítségével, amelyek béta-glükozidáz és acetiláz aktivitással egyaránt rendelkeznek, a szubsztrátumot nagy sebességgel, nagy koncentrációban képesek átalakítani, így egy fermentációs lépésben lehasítják a glükózt és az acetil-csoportot is. Követelmény még a mikroorganizmustól, hogy a két enzimaktivitás (acetiláz, béta-glükozidáz) mintegy azonos legyen, hogy az átalakítás közben köztes vegyületek (szekunder-sorbeli vegyületek acetilvegyületei, illetve deacetil-lanatozidok, más nevén purpurea-glükozidok) ne halmozódjanak fel. Az említett mikroorganizmus szekunder glükozidokat legyen képes előállítani a szekunder glükozidok acetil-vegyületeiből is (itt az acetiláz-hatás érvényesül) és a purpurea-glükozidokból is (itt a béta-glükozidáz aktivitás működik). Azt találtuk, hogy a fenti követelményeknek megfelelő eredményeket csak Streptomyces genusba tartozó mikroorganizmus tenyészetével kapunk, amely kiemelkedően nagy enzimaktivitással tűnik ki. Fentiek alapján a találmány eljárás I általános képletű — ahol Rí és R2 jelentése hidrogénatom vagy hidroxil-csoport — digitálisz szekunder glükozidok mikrobiológiai előállítására, amely abban áll, hogy valamely II általános képletű — ahol Rí és R2 jelentése hidrogénatom vagy hidroxilcsoport, R3 jelentése hidrogénatom vagy acetil-csoport és R$ hidrogénatom vagy D- glükóz csoportot jelent, azzal a megkötéssel, hogy ha R3 jelentése hidrogénatom, R4 csak hidrogénatomtól eltérő jelentésű lehet — primer glükozidot Streptomyces griseolus (MNG 168) süllyesztett tenyészetével vagy ebből készített enzim készítménnyel fermentálunk, majd a képződött szekunder glükozidokat a fermentléből ismert módon elkülönítjük. A találmány szerinti eljárás egy előnyös foganatosítási módja szerint az enzimet a sejten rögzítjük, és a hidrolitikus átalakítást az így rögzített enzim készítménnyel végezzük. A találmány szerinti eljárásban felhasznált Streptomyces törzset talajmintából izoláltuk. Morfológia: A spóratartók sympodiális elágazásúak, egyenes végűek, spirál vagy kacs nem fordul elő. A spórák fénymikroszkóposan vizsgálva tojásdadok, 0,7—0,9X0,9—1,1 n méretűek. Szacharóz-nitrát agaron: a növekedés színtelen, majd később szürke, a légmicélium vékony, fehér, később olajzöld. Enyhe barna pigment diffundál az agarba. Tirozin agaron: melanin negatív. A légmicélium és a növekedés egyaránt laza szerkezetű. Világosbarna oldható pigment diffundál az agarba. Tápagaron a növekedés kompakt, erős, kezdetben szürke, később barnás színű. A légmicélium vékony, poros, világosszürke, oldható pigment nem keletkezik. Bennett agaron a növekedés krémszínű, idő3 vel barnássá sötétedik. A légmicélium vékony, de tömött, poros szerkezetű, kékesszürke színű. Oldható pigment nem keletkezik. Glükóz-aszparagin agaron a növekedés szürke, sötétszürke, majd helyenként fekete. Légmicélium csak helyenként keletkezik, egérszürke színű. Kevés barna oldható pigment diffundál az agarba. Bouillon agaron a növekedés vastag, szürke, ráncosodó, légmicélium és oldható pigment nem keletkezik. Ca-malát agaron a növekedés gyors, világosszürke, később sötétszürke színű. A légmicélium kékesszürke, helyenként foltokban olajzöld színű. Igen kevés barnás oldható pigment diffundál az agarba. Burgonya-glükóz agaron a növekedés közepes sebességű, de erősen szétterülő, barna színű. A légmicélium közepén bársonyos, kékeszöld, a telep szélén pókhálószerűen szétkúszik. Kevés világosbarna oldható pigment diffundál az agarba. Kukoricaliszt agaron a növekedés világosbarna, a légmicélium poros, vékony, kezdetben világosszürke, később kékesszürke színű. Oldható pigment nincs. Glicerin-nitrát agaron a növekedés szürke, szürkésbarna, végül szinte fekete színű, erősen redőzött. A légmicélium gipszes, poros, egyenletesen hamuszürke. Kevés, de kifejezett barna oldható pigment diffundál az agarba. Sabouraud glükóz (glükóz-pepton) agaron a növekedő táptalaj micélium világosbarna, a légmicélium vékony, világosszürke, gipszesen száraz, enyhén barna oldható pigment keletkezik. Burgonya szeleten a növekedés erőteljes és gyors, durván ráncolódó felszínű, kezdetben szürke, később fekete. A légmicélium hamuszürke, az oldható pigment barna. Löffler-féle alvasztott savótáptalajon barna növekedés és erős proteolitikus aktivitás észlelhető. Cellulózon mint egyetlen szénforráson jól növekedik. Nitrát redukció : pozitív. Zselatin folyósítás: pozitív. Tej: erős koaguláció és erős peptonizáció észlelhető. Véres agaron ráncos, olajzöld növekedés, világosszürke légmicélium lízis jelentkezik. és gyenge béta-hemo-Szénforrás asszimiláció D-glükóz: + D-szorbit: gyenge D-galaktóz: + + oldható + + szacharóz: + keményítő: maltőz: + D-xilóz: + laktóz: + L-ramnóz : + raf finóz: + galaktit: — L-szorbóz: — D-mannit: + cellobióz: + mozit: + trehalóz: + + D-fruktóz: + glicerin: ++ D-mannóz: + 5 10 15 20 25 30 35 40 45 [50 55 60 65 2
