175511. lajstromszámú szabadalom • Eljárás immunglobulin kinyerésére
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 175511 # Bejelentés napja: 1977. IV. 01. (NO-212) Dániai elsőbbsége: 1976. IV. 06. (1628/76) Nemzetközi osztályozás: C 07 G 7/00 ■ :.r\ A\ , ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1980. II. 28. Megjelent: 1981. III. 31. V* j Feltaláló: Szabadalmas: Hansen Jprgen Frederik kandidátus, R^dovre, Dánia Nordisk Insulinlaboratorium, Gentofte, Dánia Eljárás immunglobulin kinyerésére 1 A találmány tárgya új eljárás intravénás beadásra alkalmas nagytisztaságú immunglobulin előállítására, vérplazma, szérum vagy ezek valamely frakciója polietilénglikollal történő frakcionált lecsapása útján oly módon, hogy a Iecsapási lépések legalább 5 egyikét 4,5—5,5 pH-értéken, valamely 6—9 szénatomos alkánsav, előnyösen kaprilsav jelenlétében hajtják végre. A gamma-globulinokat tartalmazó immunglobulinok gyógyászatilag értékes anyagok, mert alkal- 10 masak immunizáló készítmények előállítására. Az immunglobulin az állati eredetű vérplazmában található és ebből különféle Iecsapási és tisztítási eljárásokkal nyerhető ki. így például a gamma-globulin tömény oldat alakjában nyerhető 15 ki Cohn és munkatársai [J. Clin. Invest. Chem. Soc., 68, 479—75 (1946)] eljárása szerint. Cohn szerint egy 16,5%-os koncentrátumot képező II frakció nyerhető ilyen módszerrel, amely intramuszkuláris injekció útján történő beadásra alkal- 20 más. Az említett ismert módszer során azonban olyan molekula-aggregátumok képződnek a gamma-globulinból, amelyek alkalmatlanná teszik ezt a terméket intravénás injekció útján történő beadásra. Cohn 25 módszere szerint alkoholos lecsapást végeznek, amelynek víz-kiűző hatása van és amely ezáltal irreverzibilis denaturálódást okozhat, ami által a globulin anti-komplementerré válik. Megkísérelték ennek a hátránynak a kiküszöbölését különleges 30 2 elkülönítési módszerek alkalmazásával, vagy pedig a gamma-globulin kémiai módosítása útján. így például ismeretes egy olyan tökéletesített frakcionálási eljárás, amelyben a gamma-globulint polietílén-glikol segítségével csapják le a friss vérplazmából (3 415 804 sz. Amerikai Egyesült Allamok-beli szabadalmi leírás). Ezzel a módszerrel elkerülhető a nem kívánatos denaturálódás, a lecsapott termék tisztasága azonban nem kielégítő. Ugyancsak polietilénglikollal végzett lecsapásra vonatkozik a következő két cikk: Biochem- Biophys. Acta (1970) 222 (2) és (1971) 229 (3). Itt azonban valamely előzőleg izolált, meghatározott protein kezeléséről van szó oldott állapotban- A cikkekből nem lehet következtetéseket levonni proteinek elegyből történő elkülönítésére. A 6355/73 sz. közzétett dán szabadalmi bejelentés leírása szerint a 3 415 804 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerint lecsapási eljárás tovább javítható azáltal, hogy a polietilénglikol helyett egy etilénoxidból és egy meghatározott tulajdonságú polioxi-propilén-polimerből készített blokk-kopolimert alkalmaznak és bizonyos különleges Iecsapási feltételeket tartanak be. Ilyen módon javítható a kinyert gamma-globulin hozama, azonban a lecsapott termék tisztasága nem minden esetben kielégítő és nem eléggé alacsony a termék antikomplementer-aktivitása. A jelen találmány azon a megfigyelésen alapul, hogy a gamma-globulin néven is ismert immunglobulinok 175511
