175374. lajstromszámú szabadalom • Eljárás takarmány-keverékek előállítására
3 175374 4 előállított anyagok, mint egysejtűek fehéijéi, amelyek ásványolaj-frakciókból vagy alkoholokból, különböző élesztőkből, algafehérjékből vagy egyebekből állíthatók elő, továbbá esetleg hulladékokból származó anyagok is jelentős alkotórészét képezhetik a takarmány-készítménynek. A találmány szerint előállított takarmány-keverékek a szóban forgó állatfajta számára szokásosan használatos alkotórészeken kívül még 5-20 ppm, előnyösen 10—15 ppm mennyiségű, fent leírt antibiotikumot is tartalmaznak és 0,05-2,5 mTE/g, előnyösen 0,2—0,5 mTE/g enzimaktivitásnak megfelelő mennyiségű proteolitikus enzimet. Főleg Virginiamycin és egy savas gomba-proteáz, illetve proteázkeverék kombinációját alkalmazzuk. A készítmény segítségével elérhető gyarapodás, illetve a táplálékhasznosítás megjavulása mintegy 4%-ot tesz ki, ha összehasonlítjuk a megfelelő, csak antibiotikumot tartalmazó kontrollkeverékekkel. A Virginiamycin és az enzimek hatásos kombinációja mindenekelőtt hústermelő típusú kis kakasok eledelében bizonyult előnyösnek. Hasznos lehet azonban minden olyan állatfajta számára, amelyeknél a Virginiamycin már magában is előnyös hatású, például sertéshizlalásnál és tojótyúkok takarmányában alkalmazva. Az antibiotikumot célszerűen premix formájában adjuk az eledelhez, például szójadarához kötve. Lisztformájú takarmány-készítményeket használva az enzimkomponenst is premixként alkalmazzuk. Hordozóanyagként tetszőleges takarmánykomponens, például ugyancsak szójadara szolgálhat. Gőzzel pelletizált takarmányokat használva az enzimet megfelelően stabilizált formában kell bekeverni, nehogy a pelletizálás folyamán a nedvesség és a hő hatására az enzim dezaktiválódjék. Ilyen eljárás a tárgya például a 2 602 260 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli nyilvánosságra hozatali iratnak. Az enzimegység (TE) meghatározása céljából a proteáz proteolitikus aktivitását Anson ismert elve alapján határozzuk mej>: megfelelő mennyiségű hígított enzimoldatot 40 C-on 20 percig azonos térfogatú 1.2' -os kazeinoldattal inkubálunk, a kazeinoldat 0,6 tejsavat, 6 mól karbamidot és 0,1 mól citrom- vagy ecetsavat tartalmaz. A kazeinoldat pH-ját 7 n nátrium-hidroxid-oldattal 4,5-re állítjuk be. Inkubálás után 1 : 1 térfogatarányban 0,4 n triklór-eeetsavat adunk az elegyhez, a meg nem emésztett kazeinből álló csapadékot leszűrjük és a szűrletben valamely tetszőleges fehérjemeghatározó eljárással meghatározzuk a lebontásnál képződött fehérjehasítási termékeket. Alkalmas erre a célra például a Layne által leírt eljárás [Methods of Enzymology 3, 448 (1957)]. Minden mérési próbánál vakpróbát is készítünk, amelyhez előbb triklór-eeetsavat, majd kazeinoldatot adunk. E vakpróba a reagensek vakértéke mellett megadja azoknak a' kismolekulájú peptideknek a mennyiségét is, amelyek már az emésztés előtt az enzimoldatban jelen vannak. A fő- és a vakérték különbségét azután a megadott módszernél összehasonlítjuk azzal az extinkcióval, amelyet egy meghatározott mennyiségű tirozin ennél a meghatározásnál ad. Ez a mennyiségű tirozin a kérdéses enzim fehérjebontó aktivitásának a mértéke: egy enzimegység (TE = tirozinegység) az az enzimmennyiség, amely egy kazeinoldatból egy perc alatt egy 1 mólos tirozinoldattal azonos extinkciót adó hasítási terméket szabadít fel. A szokásosan megadott enzimegység mTE= 10"3 TE. 1. példa 270 darab Lohmann-fajtájú hím, egynapos hízócsibét battériásán (ketrecekben) tartva 6 hétig mindig azonos összetételű takarmánykeverékkel táplálunk, de a) antibiotikum vagy enzim hozzáadása nélkül, b) 15 ppm Virginiamycin hozzáadásával, c) 15 ppm Virginiamycin és Rhizopus rhizopodiformisból származó 0,45 mTE/g savi proteáz hozzáadásával, majd a kísérletet befejezve megállapítjuk a végső testsúlyt és a táplálék-hasznosítást. Táplálék-hasznosítás alatt a táplálékfogyasztás/gyarapodás arányt értjük. Takarmány-összetétel (%): Szójakivonat-dara 31,00 Kukorica 55,31 Állati liszt 5,00 Marhafaggyú 5,80 Szójaolaj 0,20 Dikalcium-foszfát 1,34 Kalcium-karbonát 0,37 Konyhasó 0,25 DL-Metionin 0,17 Nyomelem-premix 0,20 Vitamin-premix 0,20 Kokcidiózis-eUeni premix 0,16 100,00 Eredmény: a) b) c) adalék nélkül VGN-nel VGN + E-vel Végső testsúly (g) 1459 1504 1524 Takarmányhasznosítás 1,82 1,80 1,72 VGN = Virginiamycin E = az említett mikroorganizmusokból származó proteolitikus enzimek 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
