175306. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új polipeptidek előállítására
17 175306 18 700 ml 0,005 mólos vizes ammónium-acetát-oldattal és 700 ml 0,2 mólos vizes ammónium-acetát-oldattal gradiens-eluálásnak vetjük alá. A 840 ml és 970 ml közötti frakciókat összeöntjük, majd liofilizáljuk. így 270 mg (63,6%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [ajp2 = - 62,0° (c = 0,46, vízben). Elemzési eredmények a f-4oHs21^7N] o '2C2H402 ‘ 2H20 képlet alapján: számított: C =56,15%, H =6,86%, N = 14,89%, talált: C =55,99%, H =6,92%, N = 14,77%. Aminosav-elemzés : Arg: 0,94, Pro: 1,06, Gly: 1,00, Tyr: 0,94, Phe: 2,03 (peptidtartalom 83,2%). 2. példa H-7-Abu—Arg-Pro—Phe—Phe—Tyr-NH2 előállítása Az 1. példában ismertetett módon járunk el azzal a különbséggel, hogy Z-Gly-ONB helyett Z-7—Abu—ONB-t használunk. így 324 mg mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a)*2 = -58,7° (c = 0,45% vízben). Elemzési eredmények a C42H5 607Ni 0 -2C2 EU- 02 -3H20 képlet alapján: számított: C =55,97%, H =7,15%, N = 14,19%, talált: C =56,14%, H = 7,36%, N = 13,92%. Aminosav-elemzés : Arg: 1,00, Pro: 1,08, Tyr: 0,97, Phe: 2,13 (peptidtartalom 80,8%). 3. példa H-e-Acap—Arg—Pro—Phe—Phe—Tyr—NH2 előállítása a) Z—e—Acap—Arg—Pro—Phe—Phe—Tyr—NH2 előállítása 10 * * * * * * * * * * * * 10 ml dimetil-formamidban feloldunk 250 mg Z-e-Acap-OH-t, majd a kapott oldathoz jeges hűtés közben 186 mg HONB-t és 214 mg DCC-t adunk. A reakcióelegyet azután 16 órán át keverjük, majd a kicsapódott diciklohexil-karbamidot kiszűrjük. A szűrletet hozzáadjuk az 1. példa a) lépésében ismertetett módszerrel egyező módon előállított H-Arg-Pro—Phe—Phe—Tyr-NH2 -p-toluol-szulfonát dimetil-formamiddal készült oldatához. A reakcióelegyet ezután 12 órán át keverjük, majd csökkentett nyomáson a dimetil-formamidot ledeszt*Héljuk. A maradékhoz ezután 30 ml etil-acetátot a<hink, majd a kicsapódott port kiszűrjük. így 810 mg mennyiségben (79,1%-os hozam) a cím szerinti vegyület 90—92 °C olvadáspontú védett származékát kapjuk. Fajlagos forgatóképessége [a]p3 = -30,3° (c= 1,07, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C52H66O,N10-C7H8O3S-2H2O leplet alapján: számított: C = 59,88%, H=6,65%, N= 11,84%, S =2,80%, talált: C =59,81%, H =6,75%, N = 11,80%, S =3,00%. b) H—e—Acap—Arg—Pro—Phe—Phe—Tyr—NH2 előállítása Az a) lépésben kapott védett származékból 500 mg-ot a 2. példa b) lépésében ismertetett módon kezelünk, amikor is 316 mg mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Fajlagos forgatóképessége [a]p3 = -58,9° (c = 0,55, vízben). Aminosav-elemzés: Arg: 1,02, Pro: 1,03, Tyr: 0,92, Phe: 2,13, e-Acap: nem meghatározott (peptidtartalom 81,5%). 4. példa H-Lys-Arg-Pro-Phe-Phe-Tyr-NH2 előállítása a) Di-Z-Lys-Arg-Pro -Phe-Phe-Tyr—NH- előállítása A 3. példa a) lépésében ismertetett módon járunk el azzal a különbséggel, hogy Z—e—Acap—OH helyett 390 mg di—Z—Lys—OH-t használunk, így 932 mg mennyiségben a 103-105 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk. Fajlagos forgatóképessége [a]p3 = — 28,5° (c=l,04, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C60H730iiNu • C7H803S • 2HjO képlet alapján: számított: C =60,39%, H =6,43%, N =11,56, S =2,41%, talált: C =60,64%, H =6,21%, N =11,79%, S =2,82%. b) H-Lys-Arg—Pro-Phe-Phe—Tyr-NH2 előállítása Az a) lépésben ismertetett módon előállított védett származékból 500 mg-ot az 1. példa b) lépésében ismertetett módon kezelünk, amikor is 336 mg mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]” =-52,6° (c = 0,57, vízben). Aminosav-elemzés : Lys: 1,02, Arg: 0,98, Pro: 1,00, Tyr: 0,94, Phe: 2,04 (peptidtartalom 91%). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
