175306. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új polipeptidek előállítására
47 175306 48 H—Val—Arg—Gly—Phe—Phe—Tyr—NH2 előállítása 10 ml dimetil-formamidban feloldunk a 26. példa b) lépésében előállított H-Arg-Gly-Phe— -Phe-Tyr—NH2-diacetátból 400 mg-ot, majd a kapott oldathoz 300 mg Z—Val—ONB-t adunk. Az oldatot ezután trietil-aminnal semlegesítjük, majd 10 órán át keveijük. Ezt követően az oldathoz 50 ml dietilétert adunk, majd a kivált csapadékot kiszűrjük, etil-acetáttal mossuk és szárítjuk. A csapadékot ezután ecetsav és víz 1:1 arányú elegyéből 30 ml-ben feloldjuk, majd a kapott oldaton katalizátorként palládiumkormot használva 4 órán át hidrogéngázt vezetünk keresztül. A katalizátort ezután kiszűrjük, majd a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot 10 ml vízben feloldjuk, majd a 26. példa c) részében ismertetett módon kromatográfiásan tisztítjuk. így 360 mg mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]o2 '-13,7° (c = 0,5, vízben). Aminosav-elemzés : Arg: 1,02, Gly: 1,00, Val: 0,97, Phe: 2,04, Tyr: 0,97 (peptidtartalom 86,2%). 29. példa 30. példa H—0—Ala—Arg—Gly-Phe—Phe—NH2 előállítása a) Z—Arg(N02)—Gly—OEt előállítása 200 ml tetrahidrofuránban feloldunk 70,7 g Z—Arg(N02)—OH-t, majd a kapott oldathoz jeges hűtés közben 40,5 g 2,4-dinitro-fenolt és 45,4 g DCC-t adunk. A reakcióelegyet ezután 4 órán át keverjük. Ugyanekkor 200 ml tetrahidrofuránban 30,7 g Gly—OEt-hidrokloridot szuszpendálunk, majd a szuszpenziót jeges hűtés közben 30,8 ml trietil-aminnal semlegesítjük. A kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, majd a szűrlethez hozzáadjuk a reakcióképes észter fentiekben ismertetett módon készített oldatát, ezután pedig a kapott reakcióelegyet egy éjszakán át keveijük. A reakcióelegyet ezután bepároljuk, majd a maradékot 500 ml etil-acetátban feloldjuk. Az oldatot háromszor 200 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karboná*-oldattal, majd háromszor 200 ml 1 normál sósavoldattal, végül pedig háromszor 200 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, ezt követően pedig vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Ezután az oldatot bepároljuk, majd a maradékot etil-acetát és petroléter elegyéből kristályosítjuk. A kivált kristályokat kiszűrjük, majd etil-acetát és petroléter elegyéből átkristályosítjuk. így 70,0 g (79,8%) mennyiségben a 109-110 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [aj^6’5 =-3,4° (c = 1, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a Ci8H26 07N6 képlet alapján: számított: C =49,31%, H =5,98%, N = 19,17%, talált: C =49,26%, H =5,79%, N = 18,55%. b) Z-Arg(N02)-Gly-OH előállítása 100 ml acetonban az a) lépésben kapott vegyületből 20 g-ot szuszpendálunk, majd a szuszpenzióhoz jeges hűtés közben 64 ml 1 normál vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk. A keveréket szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. Miután a fölöslegben levő bázist sósavval semlegesítettük, az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékhoz 100 ml vizet adunk. Az oldhatatlan részt kiszűrjük, majd a szűrletet sósavval megsavanyítjuk és a kivált kristályokat kiszűrjük. így 18,3 g (93,7%) mennyiségben a 103-105 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]^2 = —25,9° (c = 0,9, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C16 H2 2 07 N6 • H2 O képlet alapján: számított: C =44,86%, H =5,65%, N = 19,62%, talált: C =44,48%, H =5,35%, N = 19,53%. c) Z—Aié(N02)—Gly-Phe—Phe—NH2 előállítása 60 ml dimetil-formamid és 40 ml metanol elegyében feloldunk' 8,91 g Z—Phe—Phe—NH2-t, majd a kapott oldaton katalizátorként palládiumkormot használva Mórán át hidrogéngázt vezetünk keresztül. Ezután a katalizátort kiszűrjük, majd a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 30 ml dimetil-formamidban feloldjuk. Ugyanekkor 50 ml tetrahidrofuránhoz a b) lépésben kapott vegyületből 6,80 g-ot adunk, majd ezt követően a keverékhez jeges hűtés közben még 3,23 g HONB-t és 3,71 g DCC-t adunk. Az így kapott keveréket ezután 5 órán át keverjük, majd a kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük és a szűrlethez hozzáadjuk a H—Phe-Phe—NH2 fentiekben ismertetett módon elkészített dimetil-formamidos oldatát. A reakcióelegyet ezután egy éjszakán át keverjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékhoz 100 ml vizet adunk és a képződött port kiszűrjük. Szárítása után a port etil-acetáttal mossuk, majd etanol és etil-acetát elegyéből átkristályosítjuk. így 8,34 g mennyiségben (72,7%) a 112—113 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]o = -21,6° (c = 1, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C34H4t0gN9*H20 képlet alapján: számított: C =56,58%, H =6,01%, N = 17,47%, talált: C =56,75%, H =5,72%, N = 17,40%. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 24
