175295. lajstromszámú szabadalom • Elkárás enzimek, enzim inhibotorok és antitestek immobilizálására vagy stabilizálására
MAGTAB SZABADALMI 175295 népköztársaság LEÍRÁS Nemzetközi osztályozás: mm Bejelentés napja: 1976. IV. 08. (SA-2913) Olaszország Uniós elsőbbsége: C 07 G 7/02 1975. IV. 09. (22.140 A/75) ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI Közzététel napja: 1979. XI. 28. HIVATAL Megjelent: 1981.1.31. Feltalók: Szabadalmas: Di Gregorio Francesco vegyész, Milánó és Snamprogetti S.p.A., Milánó Morisi Franco vegyész, S.Giovanni in Persiceto, Olaszország Olaszország Eljárás enzimek, enzim inhibitorok és antitestek immobilizálására vagy stabilizálására 1 A találmány tárgya eljárás enzimek, enzim inhibitorok és antitestek immobilizálására vagy stabilizálására. A C. A. 81, 147 151 f és C. A. 68, 59 512 a referátumok aminosavak kinonnal történő kezelését ismertetik. A találmány szerinti eljárás esetében a reakciót valamely nagy molekulasúlyú anyaghoz kapcsolt kinonnal folytatjuk le, így olyan enzimet, enzim inhibitort, illetve antitestet kapunk, amely vízben oldható, vagy vízben nem oldható nagy molekulájú polimerhez kötődik. Az ilyen módon immobilizált, illetve stabilizált enzim, enzim inhibitor vagy antitest funkciójától függően, számos alkalmazási területen rendkívül hasznos lehet. Nevezetesen, amennyiben vízben oldhatatlan anyaghoz enzimeket kötünk, ezek a termékek biológiai katalizátorok, amelyek preparatív, analitikai és biológiai-gyógyászati területen mint heterogén katalizátorok alkalmazhatók. A fenti anyagok mint heterogén katalizátorok a reakcióhoz használt elegyből könnyen elválaszthatók, és minthogy stabilitásukat meglepő módon megtartják, ismételten felhasználhatók. Míg a többi enzim elkülönítésére és tisztítására igen nehézkes és költséges eljárásokat kell alkalmazni, addig a találmány szerinti eljárás termékei sokkal gazdaságosabbak és többször is felhasználhatók. 2 A találmány szerinti eljárással az enzimek vízoldható polimerekhez is kapcsolhatók. Ebben az esetben az enzimek stabilitása denaturáló szerekkel szemben jelentősen javul, ennek következtében 5 olyan körülmények között is alkalmazhatók, amelyek a szokásos módszereknél sokkal erőteljesebbek. A találmány szerinti, oldható polimerekhez kötött enzimek molekulasúlya a megfelelő natív enzi- 10 mekhez képest növekszik, így lehetővé válik az alkalmazott rendszerből ezek ultraszűrő membránnal történő elválasztása. Amennyiben a fehérjetartalmú anyagok antigének, ezeket vízben oldhatatlan anyagokhoz kell 15 kötni, ekkor a komplex elegyben levő megfelelő antitesttől szelektív módon elválaszthatók. Ha az enziminhibitorokat oldhatatlan anyagokhoz kötjük, akkor felhasználhatók az ezekkel gátolt enzimek szelektív kipreparálására. 20 A találmány szerinti eljárás értelmében az enzim, enzim inhibitor vagy antitest és a kinonvegyület - ez 1,4-benzokinon, vagy 1,2-naftolkinon lehet, mely valamely nagy molekulájú vegyülethez van kapcsolva - közötti reakciót olyan hőmérsék- 25 létén folytatjuk le, melyet a fehérje stabilitása megenged. Az eljárást ezért előnyösen a reakció megfelelő sebességgel és igen jó kitermeléssel történő levezetéséhez szükséges alacsony hőfoktartományban (0 °C és 25 °C között) végezzük. Ezen- 30 kívül a célszerűen vizes közegben lefolytatott reak-175295
