175158. lajstromszámú szabadalom • Eljárás naftacénszármazékok előállítására
43 175158 44 A babot 500 ml vízben 45 perc alatt 122°-on autoklávban péppé főzzük. Ezután hozzáadjuk a szeszlepárlók oldható maradékát, a szójaolajat, a kobaltkloridot, és desztillált vízzel 900 ml-re egészítjük ki. A folyékony táptalaj pH-ját 5 n nátriumkarbonát-oldattal 7,2-re állítjuk be, majd 45-45 ml-enként 300—300 ml-es lombikokba osztjuk szét, és a lombikokat 20 percig 122°-on sterilizáljuk. Lehűlés után mindegyik lombikba 5—5 ml steril 15%-os glükózoldatot töltünk. A beoltásra kész folyékony táptalaj pH-ja ekkor 6,70. A 15. példa szerint szulfatiazol-oldatot állítunk elő. A steril folyékony C táptalajt párosával 2 csoportba, C[ és C2 csoportra osztjuk. A C) csoportba tartozó lombikokhoz nem adunk további adalékot. A C2 csoportbeli lombikok mindegyikébe 0,5 ml szulfatiazol-oldatot adunk (koncentráció 0,1 g/liter). A hozzáadás után az összes Ci és C2 lombikot beoltjuk 2,5—2,5 ml Streptomyces bifurcus DS 21 219 (NRRL 3539) törzs 72 órás tenyészetével. A lombikokat forgóasztalon percenként 220 fordulattal keverve, 26°-on inkubáljuk. A 10 napig inkubált tenyészetekben a 11. példa szerint határozzuk meg a 32 999 RP mennyiségét. A következő eredményeket kapjuk: Csoport Szulfatiazol 32 999 RP c, 0 g/liter 0 mg/liter, c2 0,1 g/liter 16 mg/liter. 19. példa A 11. példa szerint előállított folyékony A táptalajt 50-50 ml-enként 300-300 ml-es lombikokba osztjuk szét. Ettől függetlenül szulfapiridazint desztillált víz és 5 n sósav eiegyében feloldva, 10mg/ml koncentrációjú oldatot készítünk. A 2,0 pH-jú oldatot 0,45 mikron pórusméretű „Millipore” membránon átszűrve sterilizáljuk. A steril folyékony A táptalajt tartalmazó lombikokat párosával 3 csoportba osztjuk, és mindegyik lombikba sterilen a következő adalékanyagokat helyezzük: az Ai 3 lombikokba 0,5 ml szulfapiridazin-oldatot (0,1 g/líter), és az Ai4 lombikokba 1 ml szulfapiridazin-oldatot (0,2 g/liter). Az Ai lombikokba nem teszünk szulfapiridazin-oldatot. Ezután az A1; A, 3 és A14 csoportok mindegyik lombikját 2,5-2,5 ml Streptomyces coeruleorubidus DS7 126 (NRRL 8098) törzs 72 órás tenyészetével oltjuk be. A lombikokat a 11. példában leírt keverés és hőmérsékleten 7 napig inkubáljuk. A 11. példában ieírt módon végzett meghatározás eredményei a következők: Csoport Szulfapiridazin 32 999 RP Aj 0 g/liter 0 mg/liter, Ai 3 0,1 g/liter 38 mg/liter, Ai 4 0,2 g/liter 32 mg/liter 20. példa A 11. példa szerint előállított folyékony A táptalajt 50—50 ml-enként 300—300 ml-es lombikokba osztjuk szét. Ettől függetlenül ametopterint desztillált víz és 5 n nátriumkarbonát-oldat eiegyében oldva, 20 mg/ml koncentrációjú oldatot készítünk. Ezt a 10 pH-jú oldatot 0,45 mikron pórusméretű „Millipore” membránon átszűrve sterilizáljuk. A steril folyékony A táptalajt tartalmazó lombikokat párosával 4 csoportba, az A!, A15, A1S és A, 7 csoportba osztjuk. Az Aj csoportba tartozó lombikokba nem adunk adalékanyagot. A többi 3 csoport lombikjaiba a következő anyagokat tesszük: az Ai s lombikokba 0,25 ml ametopterin-oldatot (0,1 g/liter), az A] 4 lombikokba 0,6 ml ametopterin-oldatot (0,24 g/liter) és az Aj 7 lombikokba 1 ml ametopterin-oldatot (0,4 g/liter). A hozzáadás után az A1; A1S, Alé és A17 csoport mindegyik lombikját 2,5-2,5 ml Streptomyces coeruleorubidus DS 7 126 (NRRL 8098) törzs 72 órás tenyészetével oltjuk be, és a lombikokat a 11. példában leírt körülmények között keverve 7 napig inkubáljuk. A 32 999 RP szokásos módon végrehajtott meghatározásával a következő eredményeket kapjuk: Csoport Ametopterin 32 999 RP Ai 0 g/liter 0 mg/liter, Ai 5 0,1 g/liter 7,0 mg/liter, Al 6 0,24 g/liter 11 mg/liter, Al 7 0,4 g/liter 1 mg/liter. 21. példa A 11. példa szerint előállított folyékony A táptalajt 50—50 ml-enként 300—300 ml-es lombikokba osztjuk szét. Ettől függetlenül desztillált víz és 5 n nátriumkarbonát-oldat eiegyében barbitalt oldva, 50 mg/ml koncentrációjú oldatot készítünk. Ezt a 11,0 pH-jú oldatot 0,45 mikron pórusméretű „Millipore” membránon átszűrve sterilizáljuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 22
