175158. lajstromszámú szabadalom • Eljárás naftacénszármazékok előállítására
39 175158 40 Az A,’ és A5’ lombikok tartalmát lombikonként 2,5-2,5 ml Streptomyces coeruleorubidus DS31 723 (NRRL 3045) törzs 72 órás tenyészetével oltjuk be. A beoltott folyékony táptalajokat forgóasztalon percenként 220 fordulattal keverve, 26°-on tenyésztjük. A 7 napig ilyen körülmények között inkubált tenyészetekben a 32 999 RP-t all. példa szerint határozzuk meg. A következő eredményeket kapjuk: 32 999 RP Csoport Szulfanilamid termelés Streptomyces DS 8899 Streptomyces DS 31 723 V, Aj' 0 g/liter 0 mg/liter 0 mg/liter, As, A5 ’ 0,8 g/liter 17 mg/liter 25 mg/liter. 13. példa A 11. példa szerint előállított folyékony A táptalajt 50—50 ml-enként 300—300 ml-es lombikokba osztjuk szét. Ugyancsak a 11. példa szerint állítunk elő 10 mg/ml koncentrációjú szulfanilamid-oldatot. A steril folyékony A táptalajt tartalmazó lombikokat párosával 4 csoportba, az Ah A2, A3 és A4 csoportokba osztjuk, és a következő módon készítjük elő ezeket: az A2 lombikok mindegyikébe 1 ml szulfonamid-oldatot (0,2 g/liter), az A3 lombikokba 2 ml szulfonamid-oldatot (0,4 g/liter), az A4 lombikokba 3 ml szulfonamid-oldatot (0,6 g/liter) adunk, és az A! lombikokba nem adunk adalékanyagot. Ezután az összes A,, A2, A3 és A4 lombikok tartalmát 2,5—2,5 ml Streptomyces bifurcus DS 23 219 (NRRL 3539) törzs 72 órás tenyészetéve1 oltjuk be. rt oeoltott folyékony táptalajokat forgóasztalon percenként 220 fordulattal keverve, 26°-on tenyésztjük. A 7 napig ilyen körülmények között inkubált lombikokban a 32 999 RP mennyiségét a 11. példa szerint határozzuk meg. A következő eredményeket kapjuk: Csoport Szulfanilamid 32 999 RP Ai 0 g/liter 0 mg/liter, a2 0,2 g/liter 36 mg/liter, A3 0,4 g/liter 28 mg/liter, A4 0,6 g/liter 13 mg/liter. A következő összetételű folyékony B táptalajt 14. példa állítjuk elő: szójaliszt 30 g, szeszlepárlók oldható maradéka 5 g, részlegesen hidrolizált „Fox head” keményítő 5 g, szójaolaj (0,92 fajsúlyú) 27,5 g, nátriumklorid 10 g, desztillált vízzel 1000 ml-re kiegészítve. A folyékony táptalaj pH-ját n nátriumkarbonát-oldattal 7,20-ra állítjuk be, majd 50—50 ml-enként 300—300 ml-es lombikokba osztjuk szét, és a lombikokat 122°-on 20 percig sterilizáljuk. Lehűlés után a folyékony táptalaj pH-ja 6,60. A 11. példa szerinti módon szulfanilamid vizes oldatát állítjuk elő. A steril folyékony B táptalajt tartalmazó lombikokat párosával 2 csoportba, a 6, és B2 csoportba osztjuk. A B] csoportba tartozó lombikokba adalékanyagot nem adunk. A B2 csoportbeli lombikokba 2-2 ml szulfanilamid oldatot adunk (koncentráció , 0,4 g/liter). Ezután a B3 és Bj csoportbeli összes lombik tartalmát 2,5-2,5 ml Streptomyces coeruleorubidus DS31 723 (NRRL 3045) törzs 72 órás tenyészetével beoltjuk. A beoltott folyékony táptalajokat forgóasztalon, percenként 220 fordulattal keverve, 26°-on tenyésztjük. A 7 napig ilyen körülmények között inkubált lombikokban a 32 999 RP mennyiségét all. példa szerinti határozzuk meg. A következő eredményeket kapjuk: Csoport Szulfanilamid 32 999 RP B, 0 g/liter 0 mg/liter, B2 0,4 g/liter 7 mg/liter. 15. példa All. példa szerint előállított folyékony A táptalajt 50—50 ml-enként 300—300 ml-es lombikokba osztjuk szét. Ugyancsak a 11. példában a szulfanilamid-oldat készítésével azonos módon, 10 mg/ml koncentrációjú szulfatiazol-oldatot állítunk elő. A steril folyékony A táptalajt tartalmazó lombikokat párosával 4 csoportba osztjuk, és mindegyik lombikot a következő módon készítjük elő: az A7 lombikokba 0,25 ml szulfatiazol-oldatot (0,05 g/liter), az Ag lombikok mindegyikébe 1 ml szulfatiazol-oldatot (0,2 g/liter), 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 20