175049. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új BU-2231 jelű glikopeptid-antibiotikum-komplex, az egyes komponensek és származékok előállítására
15 175049 16 VII 3-aminopropil-dimetilszulfónium-só Vili 4-amino-3-hidroxi-n-valeriánsav, IX ismeretlen szerkezetű anyag (^ax3°H = 283 !W) X spermidin, XI (3-lizin. Ugyancsak a bleomicinével hasonlítottuk össze a Bu-2231 A és B cukorrészét is. Egy erősen savas jellegű ioncserélő gyantával (Amberlyt 35) metanol- 10 ban 20 órán át forraltuk az A és B komponens keverékét. A hidrolízis során keletkezett bázikus jellegű anyagokat az ioncserélő gyanta megkötötte, és az oldatban maradt felszabadult semleges termékekről csökkentett nyomáson ledesztilláltuk az ol- ,5 dószert, ily módon sűrű szirupszerű anyagot nyertünk. Trimetil-szililezés után gázkromatográfiásán vizsgáltuk ezt az anyagot. A bleomicinből gulózként és mannózként azonosítható csúcsokat nyertünk, és a Bu-2231 komponensek közel ugyan- 20 olyan elúciós képet adtak, mint a bleomicin, és így arra következtethetünk, hogy ezen antibiotikumok szénhidrát-része azonos. 8. táblázat folytatása Arnmosavak A ninhidriddel festődő sáv helye (távolsága az origotól)xx és aminokx Bleomicin a2 Bu-2231 Bu A-2231 B VIII-14,8 14.8 IV 16,0 16,0 16,0 V 18,5 18,5 18,5 XI-23,0-VH (X) 31,5 31,5 31,5 x Az aminosavak és az amin-komponensek szerkezetét lásd a szövegben. xx 51. számú Toyo-szűrőipar, pufferoldat : hangyasav-ecetsav-víz 25 : 75 : 900. Antimikrobiális aktivitás 8. táblázat A savas hidrolízis termékeinek elektroforetikus adatai Aminosavak és aminokx A ninhidriddel festődő sáv helye (távolsága az origotól)xx Bleomicin Bu—2231 Bu—2231 A2 A B VI 8.5 cmI 9.7 9,7 9.7 11 12,0 12,0 12,0 III 13.5 _ _ 25 Kétszeres agarhígításos módszerrel számos baktériummal és gombával szemben megvizsgáltuk a Bu-2231 A és B minimális gátló koncentrációját (MIC). A baktériumellenes hatást (Gram-pozitív és 30 Gram-negatív baktériumokkal szemben) Müller-Hinton-féle agaros táptalajon, a savtürő baktériumokkal szemben megnyilvánuló hatást a =//= 1001 jelzésű táptalajon (3% glicerin, 0,3% nátrium-glutamát, 0,2% pepton, 0,31% dinátrium-hidrogén-fosz- 35 fát, 0,1% kálium-dihidrogén-foszfát, 0,005% ammónium-citrát, 0,001% magnézium-szulfát-heptahidrát és 1,5% agar), és a gombaellenes hatást Sabouraud-agaron vizsgáltuk. A bleomycin és a fleomicin aktivitásával összehasonlított eredményeket a 9. és 40 10. táblázatban adjuk meg. A Bu-2231 A és B antibakteriális és antifungális aktivitása sokkal nagyobb, mint az összehasonlításhoz használt antibiotikumoké. A Bu—2231 A antibakteriális aktivitása, valamivel nagyobb, mint a Bu-2231 B-é, anti- 45 fungális hatása azonban gyengébb. 9. táblázat A Bu-2231 A és B jelű antibiotikumok baktériumellenes hatásspektruma Teszt mikroorganizmus Burézmentes-2231 A rézkomplex Bu-2231 B réz- rézmentes komplex Bleomicin NIHJ Fleomicin Gram-negatív E. coli NIHJ 0,025 0,025 0,2 0,1 0,8 0,8 E. coli Juhi A 15119 0,1 0,1 0,2 0,2 1,6 1,6 E. coli K-12 A9632 0,05 0,05 0,1 0,2 0,8 1,6 E. coli A20665 0,05 0,05 0,05 0,25 0,2 0,4 8
