175049. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új BU-2231 jelű glikopeptid-antibiotikum-komplex, az egyes komponensek és származékok előállítására
31 175049 32 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás a Bu— 2231 jelzésű, a Bu-2231 A és a Bu—2231 B fő komponensekből álló glikopeptid antibiotikum-komplex, az egyes komponensek, és a komplex vagy komponensek rézmentes vagy rézkomplex formájának és ezek savaddíciós sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy a Streptoalloteichus hindustanus ATCC 31 158 Bu-2231 antibiotikumot termelő törzsét valamely, felhasználható nitrogén- és szénforrásokat tartalmazó vizes táptalajon, süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények között tenyésztjük, majd a fermentléből kinyerjük az antibiotikum-komplexet, elválasztjuk az adott esetben jelenlevő szennyezésektől, és kívánt esetben komponenseire választjuk szét, és/vagy kívánt esetben a komplexet vagy a komponenseket rézkomplexszé és/vagy savaddíciós sóvá alakítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jeÚemezve, hogy a Bu-2231 komplexnek a tény észléből történő kinyerésére elválasztjuk a micéliumtól a vízben oldható antibiotikum-komplexet tartalmazó fermentlevet, kationos ioncserélő gyantán megkötjük a komplexet, a glikopeptid típusú Bu-2231 komplex-szel együtt termelt aminoglikozid komplex eltávolítása céljából híg bázisoldattal mossuk a gyantát, majd valamely ásványi sav oldatával leoldjuk az adszorbensről s Bu—2231 komplexet. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja a Bu—2231 B jelzésű glikopeptid antibiotikum, valamint annak gyógyászatilag elfogadható, savaddíciós sói előállítására, amely antibiotikum rézkomplexként vagy rézmentes formában állítható elő, és amely savas hidrolízise során L-treonint, 0-amino-/3-(4’-amino-6’- karboxi-5’-metil-pirimidin-2’-il)-propionsavat, p-hidroxi-hisztidint-, L-0-amino-alanint, 4-amino-3-hidroxi-n-valeriánsavat és egy 283 mp hullámhossznál (Ej^m = 280) ultraibolya abszorpciós maximumot adó további aminosavat ad, terminális aminkomponense spermidin, cukorrészét mannóz és glukóz képezi, és amely rézkomplex formájában 1) kékes színű, amorf, szilárd halmazállapotú, vízben és metanolban oldható, etanolban kismértékben oldható, a többi szerves oldószerben gyakorlatilag oldhatatlan anyag, 2) ninhidrinnel pozitív reakciót ad, 3) elemi analízise a következő (százalékban kifejezve): C 40,96, H5,61, N 14,78, és S 3,39, 4) = 243 és 291 nui hullámhossznál ultraibolya abszorpciós maximumot ad (E'^m = 134 és 109), 5) fajlagos forgató képessége: [a]” = +76° (c = 0,5, H20) és 6) vékonyrétegkromatográfiás Rf-értéke szilikagél lemezen metanol 10%-os ammónium-acetát-oldat 1 :1 arányit elegyében futtatva 0,41, és metanol 10%-os ammónium-hidroxid-oldat 10:9:1 arányú elegyében futtatva 0,11, és amely rézmentes formájában 1) fehér színű, amorf, szilárd halmazállapotú anyag, 2) fajlagos forgatóképessége: [a]“ =-19° (c = 0,5, H20), 3) elemi analízise a.következő (százalékban kifejezve): C43,01, H6,22, N 14,18, és S3,61, 4) ^max = 235 és 289,5 mp hullámhossznál ultraibolya abszorpciós maximumot (E{^m = váll és 77) ad, és 5) vékonyrétegkromatográfiás Rf-értéke szilikagél lemezen metanol 10%-os ammónium-formiát-oldat 1 :1 arányú elegyében futtatva 0,31, és metanol 10%-os ammónium-acetát-oldat 10%-os ammónium-hidroxid-oldat 10:9:1 arányú élegyében futtatva pedig 0,09, és amelynek rézmentes hangyasavas sójának kálium-bromid pasztillában felvett infravörös spektruma a 3. ábrán látható, és 10%-os koncentrációban nehézvízben feloldva felvett magmágneses rezonanciaspektruma a 4. ábrán látható, és amely mind rézmentes, mind rézkomplex formájában hatásosan gátolja a baktériumok és gombák növekedését, azzal jellemezve, hogy a Bu-2231 komplexnek réz(II)-klorid oldattal készült oldatát valamely, karboximetil-csoportokat tartalmazó, módosított dextrán-származék alapú kationcserélő gyantán, eluensként 1%-tól 7%-ig terjedő koncentrációjú vizes ammónium-formiát-oldatot használva kromatografáljuk, majd az először eluálódó frakciókból elválasztjuk a terméket, és kívánt esetben a szabad vegyületté, vagy formiáttól eltérő savaddíciós sójává alakítjuk. 4. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja a Bu—2231 A jelzésű glikopeptid antibiotikum, valamint annak gyógyászatilag elfogadható, savaddíciós sói előállítására, amely antibiotikum rézkomplex vagy rézmentes formában lehet, és amely savas hidrolízise során L-treonint, 0-amino-0-(4’-amino- 6’-karboxi-5’-metil-pirimidin-2’-il)-propionsavat, /3-hidroxi-hisztidint, L-0-amino-alanint, 4-amino-3-hidroxi-n-valeriánsavat, ß-lizint és egy 283 mja hullámhossznál ultraibolya abszorpciós maximumot (E}%m = 280) adó további aminosavat ad, terminális aminkomponense spermidin, cukorrészét mannóz és gulóz képezi, és amely rézkomplex formájában 1) kékes színű, amorf, szilárd halmazállapotú, vízben és metanolban oldható, etanolban kismértékben oldható, a többi szerves oldószerben gyakorlatilag oldhatatlan anyag, 2) ninhidrinnel pozitív reakciót ad, 3) elemi analízise a következő (százalékban kifejezve): C 42,66, H6,16, N 15,31, és S3,14, 4) A"2® = 243 és 291 mp hullámhossznál (E}%m = 125 és 98) ultraibolya abszorpciós maximumot ad, 5) fajlagos forgató képessége [a]p3 =+50° (c = 0,5, HjO) és 6) vékonyrétegkromatográfiás Rf-értéke szilikagél lemezen metanol 10%-os ammónium-acetát-oldat 1 :1 arányú elegyében futtatva 0,22, és metanol 10%-os ammónium-acetát-oldat 10%-os ammónium-hidroxi-oldat 10 :9 : 1 arányú elegyében futtatva pedig 0,05, és amely rézmentes formájában 1) fehér színű, amorf, szilárd halmazállapotú anyag, 2) fajlagos forgatóképessége: [aß3 = -21° (c = 0,5 H20), 3) elemi analízise a következő (százalékban kifejezve): C 45,10, H 6,51, N 16,05 és S 3,55, 4) X**af=235 és 290 mp hullámhossznál (E}^m=váll és 67) ultraibolya abszorpciós maximumot ad, és 5) vékonyrétegkromatográfiás Rf-értéke szilikagél lemezen metanol 10%-os ammónium-formiát-oldat 1 : 1 arányú elegyében futtatva 0,16, és metanol 10%-os ammónium-formiát-oldat 10%-os ammónium-hidroxid-oldat 10:9:1 arányú elegyében futtatva pedig 0,04, és amelynek rézmentes sósavas sójának kálium-bromid pasztillában felvett infravörös spekt5 10 IS 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 16
