175033. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és eszköz humán korion gonadotropin fokozott termelésével járó rákos megbetegedések kimutatására, valamint terhesség meghatározására
3 175033 4 dolgoztak ki. Ezek az újabb tesztek érzékeny, azonban bizonyos esetekben nem specifikus radioimmunológiai módszereken alapulnak. Ezen tesztek nem specifikus volta abból a tényből adódik, hogy szintén pozitív eredményeket adnak más gonadotropinokkal, például az emberi hipofízis által kiválasztott luteinizáló hormonnal (röviden: LH), azaz a HCG-antiszérum zavaró reakcióba léphet az LH-val. Nem specifikus radioimmunológiai módszereket használva megállapították, hogy az LH és a HCG együttes mennyisége a terhesség első hónapjának közepén jelentkező LH kiválasztási csúcs után 10-14. nappal kezdődően élesen növekedni kezd [lásd többek között Jaffe, R. B. és munkatársai: J. Clin. Endocrinol. Metaboi., 29, 1281 (1969); Parlow, A. F. és munkatársai: J. Clin. Enocrinol. Metabol., 31, 213 (1970); Goldstein, D. P. és munkatársai: Fertil. Steril., 23, 817 (1972); Wide, L,: Lancet, 2, 863 (1969); továbbá Mishell Jr., D. R. és munkatársai: Am. J. Obstet. Gynocel., 117, 631 (1973)]. Kidolgoztak továbbá a HCG (3-szubegységére specifikus radioimmunológiai módszert is. Ezt az utóbbi tesztet használták a vérszérumban vagy vérplazmában a HCG mérésére LH jelenlétében a terhesség említett korai időszakában [lásd például Wide, L: Lancet, 2, 863 (1969); Kosasa, T. S. és munkatársai: J. Clin., Endocrinol. Metabol., 36, 622 (1973); és Kosasa, T. S. és munkatársai: Obstet. Gynecol., 42, 868 (1973)]. Bár a radioimmunológiai módszerek kétségkívül érzékenyek, szakemberek számára jól ismertek, hogy ugyanakkor ezek a módszerek költségesek és bonyolultak. Ezeket a módszereket csak izotóp anyagok kezelésére betanított személyzet alkalmazhatja rendkívül bonyolult berendezéseket használva. Egy további ismert teszt HCG kimutatására az úgynevezett radioreceptor módszer, amelyet Saxena, B. B. és munkatársai dolgoztak ki [lásd: Science, 184,793 (1974)]. Bár ez a módszer kevésbé időigényes, mint egy radioimmunológiai módszer, végrehajtásához szintén speciális berendezésre és technikailag igen jól képzett személyre van szükség. A terhesség megállapítására szolgáló kísérleti módszerek egy további csoportját alkotják a biológiai tesztek, így többek között a jól ismert „nyúl teszt”. E módszerekről jó áttekintést ad Hobson, B. M. korábban már idézett szakcikkében. Szakemberek előtt azonban jól ismert, hogy ezek a biológiai tesztek fáradságosak és időigényesek. Továbbá ezen tesztek megkövetelik állati törzsek fenntartását, ugyanakkor viszont az állatok érzékenysége a különböző tesztekre időnként változik. Ismeretesek még további terhességmegállapítási módszerek. Ezek a további tesztek szteroidoknak a vérszérumban mérhető koncentrációja meghatározásán vagy pedig csak progesztogénnel vagy progesztogénnel és ösztrogénnel végzett kezelés után a vérzés megszűnésének megfigyelésén alapulnak. Ezek a tesztek azonban kevésbé megbízhatóak, mint a korábban tárgyaltak. Sikerült kidolgoznunk egyszerű és érzékeny eljárást és eszközt terhesség megbízható megállapítására, amely módszer alapja egy testnedv (például vizelet, vérszérum vagy vérplazma) ultraszűrése, majd a HCG immunológiai meghatározása. Ultraszűrést használtak ugyan már vizeletben úgynevezett „trofoblasztikus tumor HCG” kezdeti magas titeijeinek koncentrálására [lásd: Taymor, M. L. és munkatársai: J. Endocrinol., 36, 417 (1966) és Lok, S.: Asian J. Med., 9, 319 (1973)]. A trofoblasztikus tumorok esetében jelentkező „trofoblasztikus HCG” koncentrációja azonban jóval nagyobb, mint a terhességgel kapcsolatba hozható HCG koncentrációja. Taymor és munkatársai igen nagy mennyiségű trofoblasztikus HCG-t tartalmazó vizeletet koncentráltak abból a célból, hogy ezt a gonadotropínt tisztítsák. Megjegyezzük, hogy az ilyen típusú tumorok csak nagyon ritkán fordulnak elő. Megjegyezzük továbbá, hogy a trofoblasztikus tumorok pozitív eredményt fognak adni a találmány értelmében végzett terhességmegállapításnál. így tehát abban az esetben, amikor a találmány értelmében végzett meghatározás eredménye pozitív, de később kiderül, hogy ez az eredmény terhesség vonatkozásában téves, akkor HCG-t termelő tumorokra kell gyanakodni. A találmány tehát egyrészt kényelmes eljárást és eszközt biztosít terhesség megállapítására, különösen a korai időszakban, továbbá a találmány szerinti eljárás megbízható és könnyen végrehajtható. A találmány szerinti eljárás további előnye az, hogy a technika állása szerint ismert, nem radioaktív módszerekhez képest lényegesen csökken a téves pozitív és téves negatív eredmények száma. Közelebbről tehát a találmány egyszerű és érzékeny tesztmódszert biztosít rákos megbetegedések kimutatására és terhesség megállapítására HCG vagy (3-szubegysége egy vizsgálandó alany, különösen nő vizeletében vagy vérszérumában való kimutatása útján. A találmány szerinti eljárás azzal jellemezhető, hogy 1) a vizelet- vagy vérszérummintát ultraszűrés útján egy olyan membránon át koncentráljuk, amelynek olyan a molekulasúly szerinti szelektivitása, hogy a HCG által átjárhatatlan, és 2) a koncentrált mintában a HCG vagy (l-szubegysége jelenlétét megállapítjuk immunológiai vagy fizikai módszerekkel, előnyösen egy agglutinációs vagy agglutinációs-inhibíciós teszttel. A találmány szerinti eljárás egy előnyös foganatosítási módja értelmében a koncentrálást megelőzően a vizeletmintát szűrés vagy centrifugálás útján derítjük. A találmány tárgya továbbá eszköz rákos megbetegedések kimutatására és terhesség, így korai terhesség megállapítására HCG-t és/vagy )3-szubegységét tartalmazó vizelet- vagy vérszérumminta ultraszűrés útján való koncentrálása útján. A találmány szerinti eszköznek a találmány értelmében van egy felül nyitott és alul zárt kamrája, amely kamra felső részének legalább egyik fala olyan ultraszűrő membránból van kialakítva, amely átjárható vizelet vagy vérszérum által és képes ugyanakkor a HCG szelektív visszatartására, míg az összes többi fal merev (rigid) átj árhatatlan anyagból van kialakítva, továbbá a kamrának van egy olyan abszorbensből készült rétege, amely képes a membránon átjutó vizeletet vagy vérszérumot szorbeálni. A kamra továbbá átjárhatatlan falú alsó részből áll, amely alsó rész feladata meghatározott térfogatú HCG-tartalmú vizelet vagy vérszérum tárolása. A kamra el van látva továbbá alsó részénél kifolyó nyílással, a kifolyó nyílás kinyitására alkalmas eszközzel és a kamrával a kifolyó nyíláson át kapcsolódó olyan 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65->
