175013. lajstromszámú szabadalom • Eljárás takarmánykeverék előállítására
3 175013 4 szerének fejlődéséhez sókat, mint dikalcium-foszfátot, kalcium-karbonátot, konyhasót is hozzájuk tesznek. Adott esetben a takarmánykeverékeket nyomelemek, vitaminok, ballasztanyagok és hasonlók hozzáadásával egészítik ki. Fermentációval előállított anyagok, mint egysejtűek fehérjéi, amelyek ásványolaj-frakciókból vagy alkoholokból, különböző élesztőkből, algafehérjékből vagy egyebekből nyerhetők, esetleg hulladékokból származó anyagok is jelentős alkotórészét képezhetik a takarmánykészítménynek. A találmány szerint előállított takarmánykeverékek a szóban forgó állatfajta számára szokásosan használatos alkotórészeken kívül még 5— 20 ppm, előnyösen 10—15 ppm mennyiségű, fent leírt antibiotikumot is tartalmaznak és 0,05—2,5 mTE 'g enzimaktivitásnak megfelelő mennyiségű proteolitikus enzimet. Főleg cink-Bacitracinból és egy savas gomba-proteázból, illetve proteázkeverékből álló kombinációt alkalmazunk. A készítmény segítségével elérhető súlygyarapodás, illetve takarmányhasznosítás megj avulása mintegy 4%-ot tesz ki, összehasonlítva a megfelelő, csak antibiotikumot tartalmazó kontrollkeverékkel. A cink-Bacitracin és az enzimek hatásos kombinációja mindenekelőtt hústermelő típusú kis kakasok takarmányában bizonyult hasznosnak. Alkalmas lehet azonban minden olyan állatfajta számára, amelynél a cink-Bacitracin már magában is előnyös hatású, például sertéshizlalásnál és tojótyúkok takarmányában alkalmazva. Az antibiotikumot célszerűen premix formájában adjuk a takarmányhoz, például szójadarához kötve. Lisztformájú takarmánykészítményeket használva az enzimkomponenst is premixként alkalmazzuk. Hordozóanyagként tetszőleges takarmánykomponens, például ugyancsak szójadara szolgálhat. Gőzzel pelletizált takarmányokat használva az enzimet megfelelően stabilizált formában kell bekeverni, nehogy a pelletizálás folyamán a nedvesség és a hő hatására az enzim dezaktiválódjék. Ilyen eljárás tárgya például a 2 .602 .260 számú német szövetségi köztársaságbeli nyilvánosságrahozatali iratnak. Az enzimegység (TE) meghatározása céljából a proteáz fehérjebontó aktivitását Anson ismert elve alapján határozzuk meg: megfelelő mennyiségű hígított enzimoldatot 40 °C-on 20 percig azonos térfogatú 1,2%-os kazeinoldattal inkubálunk; a kazeinoldat 0,6% tejsavat, 6 mól karbamidot és 0,1 mól citrom- vagy ecetsavat tartalmaz. A kazeinoldat pH-ját 2n nátrium-hidroxid-oldattal 4,5-ra állítjuk be. Inkubálás után 1 :1 térfogatarányban 0,4n triklór-ecetsavat adunk az elegyhez, a meg nem emésztett kazeinből álló csapadékot leszűrjük és a szűrletben valamely tetszőleges fehérjemeghatározó eljárással meghatározzuk a lebontásnál képződött fehérjehasítási termékeket. Alkalmas erre a célra például a Layne által leírt eljárás [Methods of Enzymology 3, 448 (1957)]. Minden mérési próbánál vakpróbát is készítünk, amelyhez előbb triklór-ecetsavat, majd kazeinoldatot adunk. E vakpróba a reagensek vakértéke mellett megadja azoknak a kismolekulájú peptideknek a mennyiségét is, amelyek már az emésztés előtt jelen vannak az enzimoldatban. A fő- és a vakérték különbségét azután a megadott módszernél összehasonlítjuk azzal az extinkcióval, amelyet egy meghatározott mennyiségű tirozin ennél a meghatározásnál ad. Ez a mennyiségű tirozin a kérdéses enzim fehérjebontó aktivitásának a mértéke: egy enzimegység (TE, tirozinegység) az az enzimmennyiség, amely egy kazeinoldatból egy perc alatt egy mólos tirozinoldattal azonos extinkciót adó hasítási terméket szabadít fel. A szokásosan megadott enzimegység mTE = 10~3 TE. 1. példa 160 darab Lohmann-fajtájú hím, egynapos hízócsibét battériásán (ketrecekben) tenyésztve 6 hétig mindig azonos összetételű takarmánykeveréken tartunk, de a) antibiotikum vagy enzim hozzáadása nélkül, b) 10 ppm zink-Bacitracin hozzáadásával, c) 10 ppm cink-Bacitracin és Aspergillus nigerből származó 0,3 mTE/g savi proteáz hozzáadásával, majd a kísérletet befejezve megállapítjuk a végső testsúlyt és a takarmányhasznosítást. Takarmányhasznosítás alatt a takarmányfogyasztás/ gyarapodás arányt értjük. Takarmány-összetétel (%) : Kukorica, őrölt 50,0 Szójadara-kivonat 18,5 Búza-utóőrlemény 15,0 Takarmányzsír (szójaolaj/sertészsír 1 :1 térfogatarány) 6,0 Takarmány-vérliszt 3,5 Csontliszt, húsliszt 3,0 Halliszt 1,0 Ásványanyag-keverék 1,0 Vitamin-premix 1,0 Takarmánymész 0,89 Nyomelem-premix 0,1 Antibiotikum-premix 0,01 100,00 Eredmény: a) b) c) adalék nélkül Zn-Bac- Zn-Bac + nal E-vel Végső testsúly (g) 1518 1515 1557 Takarmányhasznosítás_______1,86________1,86_______1,80 Zn-Bac = Zn-Bacitradn E = az említett mikroorganizmusokból nyert proteolitikus enzimek 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
