174967. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ribo- és 2'-dezoxiribo-nukleozid-5'-polifoszfátok előállítására
11 174967 12 melegítjük és a keverést megindítva 7—8 óra alatt hozzácsepegtetünk 72,5 g (0,1 M) guanozin-5’-foszformorfolidát, 100 nú acetonitril és 100 ml formamiddal készült oldatát. A becsepegtetés után még további 5 órán át utókevertetjük 40 °C hőmérsékle- 5 ten. Ezután a reakcióelegyet vákuumban 40 °C-on eredeti térfogatának 45%-ára bepároljuk. Az így nyert maradékot feloldjuk 500 ml desztillált vízben és az oldatot —2 “C-ra hütjük, majd addig adunk hozzá 8,5 n nátriumhidroxid oldatot, míg az oldat pH-ja 9 lesz. 10 A közben kivált nátriumfoszfátot kiszűrjük . A szűrletet elválasztjuk a tributilamintól és a vizes fázist lehűtjük —8 °C-ra, ahol is addig adagolunk hozzá további 8,5 n nátriumhidroxidot, míg a pH=ll lesz. Ekkor a 4-morfolino-N ,N’-dicMohexílkarboxamidin bázis 15 (B) kiválik. Ezt kiszűrve a szűrlet pH-ját tömény sósavoldattal pH 4,5—S-re savanyítjuk. Ezt az oldatot ötszörös mennyiségű metancioa csurgatjuk. Ekkor kiválik a guanozin-5'-difoszfona''-dinátriumsó, melyet kiszűrünk és 5:1 arányú metanol-víz eleggyel klorid- 20 mentesre mossuk, tzt követően háromszoros csapadéktérfogatú metanollal és eterrel mossuk. Foszfor-pentoxid felett szobahőmérsékleten vákuumban megszánt] uk. A termék súlva 17-21 a >5,4—71,8%), minősége 25 megfelel a 3. példában leírt Követelményeknek. AzE 250/260 és E 280/260 értékek 0,96 és 0,66 (irodalmi adatok 0,95 és 0,67) pH=i esetén. Szabadalmi igénypontok 30 1. Eljárás az (I) általános képletű ribo- és 2’-dezoxiribo-nukleozid-5 ’-polifoszfátok, amelyekben R’ az adenin, guanin, hipoxantin és xantin purinbázi- 35 sok vagy a citozin, uradl és timin pirimidinbázisok egyikét, továbbá a pirimidinbázisok 5-helyzetben halogénatomot tartalmazó származékát, R hidrogénatomot vagy hidroxil-csoportot, A hidroxil- vagy H2P04 -csoportot jelent és 40 n értéke 0,1 vagy 2, ha A hidroxil-csoport és 0 vagy 1, ha A H2P04 -csoport, valamint e vegyületek sóinak előállítására valamely (II) általános képletű ribo- vagy 2’-dezoxiribo-nukleozid-5’-foszfátnak, ahol R’, R és n a fenti jelentésű, 45 morfolinnal és N^í’-diciklohexilkarbodiimiddel reagál tatása és a kapott (III) általános képletű nukleozid-5’-foszformorfblidátnak, ahol X 4-morfolino-csoportot, B+ 4-morfolino-N,N’-diciklohexilkarboxamidinium kationt jelent, R’, R és n pedig a fenti jelentésű, 5 0 valamely (IV) általános képletű foszforsav, ahol A a fenti jelentésű, tributilammóniumsójával történő reagáltatása útján, azzal jellemezve, hogy a (II) általános képletű ribo- vagy 2’-dezoxiribo-nuldeozid-5’-foszfát reakcióját vízmentes 1-4 szénatomos alkanolban vé- 55 gezzük, az N^í’-diciklohexilkarbamid önmagában ismert módon való eltávolítása után a reakcióelegyet betöményítjük, és a kapott (III) általános képletű nukleozid-5’-foszformorfolidátot, ahol X, B+, R’, R és n a fenti jelentésű, éterrel kicsapjuk és közvetlenül vagy kívánt esetben elkülönítés után vízmentes tetrahidrofurán, ortohangyasavas-etilészter vagy acetonitril oldószerek egyikéből és dimetilformamid, metilcelloszolv, formamid, dimetilszulfoxid vagy metanol oldószerek egyikéből álló oldószerpárban oldva 20—60 8C-on 5—10 óra, előnyösen 7—8 óra alatt keverés közben részletekben valamely (IV) általános képletű foszforsav, ahol A a fenti jelentésű, tributilammóniumsójának az előbbi oldószerpárban készült oldatához adagoljuk, és az adagolás után 10:1 és 4:1 közötti térfogatarányú oldószerben oldott reakcióelegyet 20—40 *C-on további 5—10 óra, előnyösen 7—8 óra hosszat keverjük, a reakcióelegyet betöményítjük, majd a kapott (I) átalános képletű nukleozid-5’-polifoszfátot, ahol R’ R, A és n a fenti jelentésű, vízben oldjuk, a szennyező anyagokat 0 és —10 °C közötti hőmérsékleten 8—10,5 normál nátrium-hidroxid oldattal szükség esetén több lépésben kicsapjuk és elválasztjuk, végül a vizes oldatból az (I) általános képletű ribo- vagy 2’-dezoxiribo-nukleozid-5’-polifoszfát, ahol R’, R, A és n a fenti jelentésű, nátriumsóját ismert módon kristályos állapotban kinyerjük, és kívánt esetben önmagában ismert módon e sóból a szabad savat felszabadítjuk vagy e sót más sóvá alakítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a (II) általános képletű vegyület reakcióját morfolinnal és N,N’-diciklohexilkarbodiimiddel vízmentes metanolban a reakcióelegy forráshőmérsékletén végezzük. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a (III) általános képletű vegyület oldatát a (IV) általános képletű vegyület tributilammóniumsójának olyan oldatához csepegtetjük, amely a (IV) általános képletű vegyületet a (III) általános képletű vegyületre számítva legalább ötszörös mólarányban tartalmazza. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a vízben oldott (I) általános képletű vegyülethez 0 és —5 °C közötti hőmérsékleten 8—10,5 normál nátrium-hidroxid oldatot adagolunk, az így kicsapott szervetlen foszfátokat és az egyidejűleg felszabaduló tributilamint a vizes fázistól elválasztjuk, majd —5 és —10 °C közötti hőmérsékleten további 8—10,5 normál nátrium-hidroxid oldatot adagolunk és a kicsapott 4-morfolino-N ,N’-diciklohexilkarboxamidin bázist szűréssel elválasztjuk, végül a vizes oldat pH-ját tömény sósavval 2—6 közötti értékre beállítva önmagában ismert módon kicsapjuk az (I) általános képletű vegyületek nátriumsóit és azokat kívánt esetben ciklohexilamin vagy diciklohexilamin sóvá alakítjuk. 5. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a (III) és (IV) általános képletű vegyületek reagáltatása után a reakcióelegyet térfogatának 40—50%-ára töményítjük be. 1 rajz A kiadásé« felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 80.402.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen - FeteKs vezető: Benkő István igazgató 6
