174941. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 17Ó-hidroxi-gesztogén-észterek előállítására
17 174941 2. táblázat folytatása Vegyület LDso ed50 TI. 4 : 1 > 250 125 > 2 5 :1 > 250 30 > 8 7:4 > 250 16 > 15 A fenti kísérletben az alábbi további vegyületek mutatnak daganatellenes hatást: 3:6, 3:8, 3:9, 3:10, 3:13, 3:15, 3:17, 3:19, 3:20, 3:22, 3 : 23, 3 : 24, 3 : 25, 3 : 26, 4 : 2, 5 : 2, 5 : 3, 5 :4, 6 : 2, 6 : 3, 6 :4 és 7 :1. 3. táblázat Ehrlich ascites, ELD hiperdipoid (46 kromoszóma) Kísérleti állatok: SPF NMRI egerek. Daganatbeültetés: 2x 106 daganatsejt, i.p. Terápia: egy injekció i.p., a beültetést követő napon. Befejezés: az állatokat a 8. napon leöljük. Kiértékelés: a kísérleti állatok daganatainak a súlyát összehasonlítjuk a kontrollállatokéval. Eredmények: Vegyület Dózis (mg/kg) Halálozás Daganat súlya kezelt/kontroll (%) 3 : 1 50 1/12 3 3:2 50 0/12 1 3:7 100 0/12 2 5 : 1 1000 0/12 1 7 : 1 1000 0/12 5 7 : 2 1000 0/12 3 7:3 1000 0/12 5 A fenti kísérletben daganatellenes hatást mutattak még a következő vegyületek: 3:3, 3:4, 3:5, 3 :6, 3 :8, 3 :9, 3 :11, 3 :12, 3 :14, 3 :16, 4 : 1, 5 :1, 5 :4, 6 :1, 6 :4, 7 :4, 7 : 5. 4. táblázat Lymphoid leukaemia L 1210 Kísérleti állatok: CDFi (C3HxDBA/2)Fi egerek. Daganatbeültetés: 10s daganatsejt, i.p. Terápia: egy injekció i.p. a beültetést követő napon. Kiértékelés: a) a kísérleti állatok túlélési ideje (t) a kontrollállatok túlélési idejének (c) százalékában kifejezve. t • 100 Hatás(%) =---------c b) a kísérleti állatok súlyváltozása (T) a kontrollállatokéval (C) összehasonlítva az 5. napig. Ay = T —C c) A terápia 5. napján a kísérleti állatok halálozási aránya nem haladhatja meg a 35%-ot. Eredmények: 18 Vegyület Dózis (mg/kg) Halálozás Súlyváltozás Mg) Hatás % 3 :7 500 0/19-5,2 172 3:7 250 0/20-4,0 130 10. példa A példa szemlélteti a vegyületek relatív affinitását nyuluterusz-citoszol-progeszteron-receptorra, progeszteronnal összehasonlítva. Az erre a célra használt eljárás módosítása azoknak az eljárásoknak, amelyeket Kontula, K. és tsai [Acta Endocrinol. 78, 574 (1975)], Terenius, L. [Steroids 23, 909 (1974)] és mások már ismertettek. A citoszol elkészítése 1,35-1,8 kg súlyú nősténynyulaknak (Knut Larsen, Uddevalla, Svédország) 1 mg Estradurin-t (poliösztradiol-foszfát, 1 mg/ml sóoldat, AB Leo, Svédország) i.m. injekcióban beadunk. Egy hét elteltével az állatokat leöljük, uteruszukat azonnal eltávolítjuk, lehűtjük, és a kötőszövettől megszabadítjuk. A következő műveleteket 0—4 °C-on végezzük. Az uteruszokat kis darabokra vágjuk, és néhányszor átmossuk 3 térfogat 7,4 pH-értékű pufferral, amely 50 mmól trisz-HCl-t, 1,5 mmól etüéndiamintetraecetsavat, 3 mmól nátriumazidot, 2 mmól ditiotreitolt és 25 térfogat% glicerint tartalmaz. A szövetet ugyanebben a pufferban (3 térfogat) Ultra Turrax homogenizátoron (Janke und Kunkel KG, Staufen, NSZK) 4xl5mp-ig, 36-37 ellenállás-beállításnál homogenizáljuk. A homogenizátumot Sorwall GLC-2 centrifugában 600g-nél 15 percig centrifugáljuk. A felülúszó részt Beckman ultracentrifugában (LB—65-B modell, SW 56 rotor), 105 000g-nél 60 percig centrifugáljuk. A felülúszó rész (nyuluterusz-citoszol) 1 ml mennyiségét üvegből készült kis centrifugacsövekbe pipettázzuk, és felhasználásig -70°C-on tartjuk. A proteintartalmat Lowry módszerével [J. Bioi. Chem. 193, 265 (1951)] határoztuk meg. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
