174887. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gonococcus szálak előállítására
39 174887 40 organizmus, míg az immunizált személyeknél 2,0 xlO4 organizmus. A további kísérletek azt mutatták, hogy annak a valószínűsége, hogy egy férfi fertőzést kap egy megfertőzött nőtől, körülbelül 30%, és ezt mintegy 250 organizmus okozza, amely a közösülés folyamán bekerül a férfi húgycsövébe. A találmány szerinti tesztek eredményei azt mutatják, hogy annak a valószínűsége, hogy egy megfertőzött nő a közösülés folyamán fertőzést vált ki a férfiban, 30%-ról 0,86%-ra csökken, ha 100—200 közötti agglutinációs titerű immunizálást érünk el. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás új Neisseria gonorrhoeae szál kristályok vagy Neisseria gonorrhoeae szálak előállítására Neisseria gonorrhoeae CDC M—2 (ATCC 31148), Pittsburgh 3-2 (ATCC 31149), CDC T-2 (ATCC 31150), Pittsburgh 4-2 (ATCC 31151), CDC 005 (ATCC 31152), CDC 339-2 (ATCC 31206), CDC C—2 (ATCC 31207) vagy CDC-NOR 2-2 (ATCC 31208) törzsek in vitro tenyészetéből, azzal jellemezve, hogy a) a szál kristályok előállítására a szálas tenyészetet 5,5-9,2 közötti pH-értékű vizes közegben szuszpendáljuk, a kapott szuszpenzió oldható és oldhatatlan részét szűréssel vagy centrifugálással szétválasztjuk, az oldhatatlan részt 7,7-11,0 közötti pH-értékű vizes közegben szuszpendáljuk, a kapott szuszpenzió oldható és oldhatatlan részét egymástól szűréssel vagy centrifugálással elválasztjuk, adott esetben az oldhatatlan részt ismételten szuszpendáljuk és szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, az oldható rész oldatának pH-ját savval 4—9,2 közötti értékre csökkentjük, és a kivált szál kristályokat a vizes közegből szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, végül, kívánt esetben a kapott kristályelegyet 10 feletti pH-értékű pufferoldatban oldjuk, a lúgosságot savval 8,5-9,2 közötti pH-értékre csökkentjük, a kivált T2 típusú szál kristályokat szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, a pufferoldat pH-ját savval 5,5-7,7 közötti értékre csökkentjük, és a kivált Ti típusú szál kristályokat adott esetben szüljük vagy centrifugáljuk, vagy ugyancsak kívánt esetben a kristályelegyet 8,5-9,2 közötti pH-értékű pufferoldattal kezeljük, a visszamaradó T2 típusú szál kristályokat az oldattól szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, adott esetben az oldat pH-ját savval 5,5—7,7 közötti értékre csökkentjük, és a kivált Ti típusú szál kristályokat szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, vagy b) a szál kristályok előállítására a szálas tenyészetet 10 feletti pH-értékű vizes pufferoldatban szuszpendáljuk, a sejteket a szuszpenzióból szűréssel vagy centrifugálással eltávolítjuk, ammóniumioíok hozzáadásával a szál kristályokat leválasztjuk, is kívánt esetben szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, vagy c) a szálak előállítására a szálakat tartalmazó heterogén vizes elegy ionerősségét vizes hígítással 0,002 alatti értékre csökkentjük, vagy valamely sav alkálifém- vagy alkáli foldfémsójának hozzáadásával az ionerősséget 4,4 feletti értékre növeljük, vagy a vizes elegy savasságát savval 2,5—4,5 közötti pH-értékre állítjuk be, vagy szacharóz hozzáadásával annak koncentrációját 50 súly% feletti értékre állítjuk be, és a kapott szálakat tartalmazó oldathoz, elkülönítés után, valamely ásványi sav alkálifémvagy alkáli földfémsóját adjuk 0,05 feletti ionerősség eléréséig, vagy az ionerősséget víz hozzáadásával 0,5 alatti értékre csökkentjük, vagy trisz(hidroxi-metil)-amino-metán puffert tartalmazó fiziológiás sóoldat hozzáadásával 0,05-0,5 közötti ionerősséget és 4,5-9,2 közötti pH-értéket állítunk be, vagy víz hozzáadásával a szacharóz-koncentrációt 40 súly% alá csökkentjük, vagy d) a szálak előállítására a szálakat tartalmazó heterogén vagy homogén vizes elegy pH-ját savval vagy bázissal 10-11 közötti értékre állítjuk be, az elegyhez 0,2-0,5 g/ml sókoncentráció eléréséig céziumkloridot adunk, 100—300 KG intenzitással 30—60 órán át centrifugáljuk, az 1,350—1,330 g/ml közötti sűrűségű frakciót elválasztjuk, és a céziumkloridot az oldatból dialízissel eltávolítjuk. (Elsőbbsége: 1976. április 23.) 2. Eljárás új Neisseria gonorrhoeae szál kristályok vagy Neisseriae gonorrhoeae szálak előállítására Neisseria gonorrhoeae CDC M—2 (ATCC 31148), Pittsburgh 3-2 (ATCC 31149), CDC T-2 (ATCC 31150), Pittsburgh 4-2 (ATCC 31151) vagy CDC 005 (ATCC 31152) törzsek in vitro tenyészetéből, azzal jellemezve, hogy a) a szál kristályok előállítására a szálas tenyészetet 5,5-9,2 közötti pH-értékű vizes közegben szuszpendáljuk, a kapott szuszpenzió oldható és oldhatatlan részét szűréssel vagy centrifugálással szétválasztjuk, az oldhatatlan részt 7,7—11,0 közötti pH-értékű vizes közegben szuszpendáljuk, a kapott szuszpenzió oldható és oldhatatlan részét egymástól szűréssel vagy centrifugálással elválasztjuk, adott esetben az oldhatatlan részt ismételten szuszpendáljuk és szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, az oldható rész oldatának pH-ját savval 4-9,2 közötti értékre csökkentjük, és a kivált szál kristályokat a vizes közegből szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, végül, kívánt esetben a kapott kristályelegyet 10 feletti pH-értékű pufferoldatban oldjuk, a lúgosságot savval 8,5—9,2 közötti pH-értékre csökkentjük, a kivált T2 típusú szál kristályokat szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, a pufferoldat pH-ját savval 5,5-7,7 közötti értékre csökkentjük, és a kivált Tj típusú szál kristályokat adott esetben szűrjük vagy centrifugáljuk, vagy ugyancsak kívánt esetben a kristályelegyet 8,5—9,2 közötti pH-értékű pufferoldattal kezeljük, a visszamaradó T2 típusú szál kristályokat az oldattól szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, adott esetben az oldat pH-ját savval 5,5-7,7 közötti értékre csökkentjük, és a kivált Ti típusú szál kristályokat szűréssel vagy centrifugálással elkülönítjük, vagy b) a szál kristályok előállítására a szálas tenyészetet 10 feletti pH-értékű vizes pufferoldatban szuszpendáljuk, a sejteket a szuszpenzióból szűréssel vagy centrifugálással eltávolítjuk, ammmóniumionok hozzáadásával a szál kristályokat leválasztjuk, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 20
