174820. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új policiklusos éter tipusú antibiotikum előállítására
13 174820 14 glükóz 2,0 % kukoricakeményítő 1,0 % szójaliszt 1,0 % gabonamag oldható része 0,5 % vas(III)-szulfát 0,02% mangán-diklorid 0,02% kalcium-karbonát 0,1 % nátrium-klorid 0,5 % metd-oleát 02 % szójaolaj 0,2 % A táptalaj pH-ját 6,6 és 6,7 közötti értékre állítjuk be. A tenyésztési folyamat végén a teljes, nem szűrt tény észle vet nirózva szárítjuk. 5. példa A 38 295 antibiotikum nátriumsó és káliumsó keverékét etil-acetátban oldjuk, az oldat pH-ját híg foszforsav oldattal 4,5-re állítjuk be. Az oldószeres fázist nátriumszulfáttal vízmentesítjük, csökkentett nyomáson desztilláljuk, a desztillációs maradékot kloroform és hexán elegyéből kikristályosítjuk, amikor megkapjuk a 133—135 °C hőmérsékleten olvadó és 1%-os metanolos oldatban [aß5 =+38° optikai forgatóképességű kristályos savat. A terméket egy éjszakán át csökkentett nyomáson, 70 °C hőmérsékleten, foszforpentoxid felett szárítjuk, majd elemanalízist végzünk: C: 61,65%, H: 8,94%, 0:29,41% (különbség alapján). A 38 295 antibiotikum savas alakban nem mutat jellemző elnyelési maximumot az ultraibolya tartományban. A 38 295 antibiotikum szabad savas alakjában infravörös abszorpciós spektrumát a 2. ábrán adjuk meg. A vizsgálatot KBr tablettával végezve az infravörös tartományban a következő hullámhosszakon látszik jellemző elnyelési maximum: 2,92, 3,43, 5,74, 6,85, 7,25, 7,53, 8,28, 8,60, 8,80, 9,00, 9,15, 9,80, 10,10,10,45,10,68, 10,92 és 11,13 ju. A 38 295 antibiotikum ezüstsójának Röntgen-sugár kristályanalízise szerint a vegyület az I képleten bemutatott szerkezettel rendelkezik. 6. példa A 38 295 antibiotikum nátriumsójának előállítására az 5. példában megadott (eljárással előállított szabad) savat etil-acetátban oldjuk, az oldat pH-ját 1,0 n nátriumhidroxid oldattal 8,5-re állítjuk be. Az aceton és víz elegyéből kikristályosított anyag olvadáspontja 197—198 °C, optikai forgatása 1,03%-os metanolos oldatában [aß5 = +38°. A nátriumsó egy éjszakán át csökkentett nyomáson, 70 °C hőmérsékleten foszforpentoxid felett való szárítást követő elemanalízise: C: 60,28%, H: 8,76%. A 38 295 antibiotikum nátriumsójának infravörös abszorpciós spektrumát a 3. ábrán adjuk meg. A KBr tablettával végzett vizsgálat szerint a vegyidet az infravörös tartományban a következő jellemző elnyelési maximumokkal rendelkezik: 2,94, 3,40, 6,25, 6,85, 7.20, 7,45, 8,38 , 9,00, 9,27 , 9,48, 10,00, 10,45, 10,65,10,90,11,13 és 11,47 aí. 7. példa A 38 295 antibiotikum káliumsójának előállítására a 6. példában megadott eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy a nátriumhidroxid helyett káliumhidroxidot használunk. Az aceton és víz elegyéből kikristályosított termék olvadáspontja 196-198 °C, optikai forgatóképessége I, 02%-os metanolos oldatban [aß5 = +38“. Az egy éjszakán át tartó, csökkentett nyomású térben, 70 °C hőmérsékleten, foszforpentoxid felett végzett szárítást követő elemanalízis adatai: C: 60,58%, H: 8,70%. A 38 295 antibiotikum káliumsójának infravörös abszorpciós spektrumát a 4. ábrán adjuk meg. A KBr tablettával végzett mérés szerint a vegyidet az infravörös tarományban a következő hullámhosszakon látszik jellemző elnyelési maximum: 2,94, 3,42, 6,27, 6.84.7.20, 8,75,9,00,9,14,9,30,9,45,10,45,10,92, II, 15 és 11,47 p. 8. példa A 38 295 antibiotikum ezüstsójának előállítására az 1. példában megadott eljárással előállított, nátrium- és káliumsóból álló keverék etanolos oldatához vizes ezüstnitrát oldatot adunk. A kivált szüárd halmazállapotú terméket metanolból kikristályosítjuk. A termék 198—200 °C hőmérsékleten olvad, optikai forgatóképessége 0,982%-os metanolos oldatban [aß5 =+27°. Egy éjszakán át csökkentett nyomású térben, 70 °C hőmérsékleten, foszforpentoxid felett szárított mintából végzett elemanalízis adatai: C: 55,95%, hidrogén: 7,89%. A 38 295 antibiotikum kristályos ezüstsójának molekulasúlya a Röntgen-sugárzásos mérés alapján 1060±4 atom tömegegység. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az I képletű 38 295 jelű antibiotikum előállítására, azzal jellemezve, hogy a Streptomyces hygroscopicus ATCC 31 050 mikroorganizmust 28 °C és 36 *C közötti hőmérsékleten, felhasználható szén és nitrogénforrást, továbbá szervetlen sókat tarto’mazó táptalajon, süllyesztett, levegőztetett fermenta ciós körülmények között tenyésztünk, és kíván* : íben az antibiotikumot elkülönítjük és tisztítjuk 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a 38 295 antibiotikum elkülönítésére a tenyészlevet, annak pH-jának beállítása nélkül egy vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel extraháljuk, a töményített oldószeres extraktumot pedig szüikágéiból készült oszlopon kromatografáljuk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
