174539. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új BU-2183 antibiotikumok előállítására
25 174539 26 9. táblázat folytatása Kódszám Törzs Bu-2183A Nax HIA MHA Bu-2183 B NA HIA MHA Sa—2 Staphylococcus aureus Smith 12,5 50 50 50 100 >100 Sa—10 Staphylococcus aureus A20239 25 100 >100 100 >100 >100-xNa: tápagar HIA: színinfúziós agar MHA: Mueller-Hinton-agar In vivo aktivitás és toxicités: A Bu-2183 A és B in vivo aktivitását kísérletesen megfertőzött egereken határoztuk meg. A patogén baktériumok közül a S. aureus Smith-et, az E. coli NIHJ-t és a Ps. aeruginosa A 9930-at használtuk. A patogén mikroorganizmusok sertés gyomornedvvel készített 5%-os szuszpenziójával, az LD50-érték 100-szorosának megfelelő dózissal provokáltuk az egereket. Közvetlenül a bakteriális fertőzés után (0 óra), egyszeri szubkután kezeléssel, illetve a kétszeri dózissal végzett kísérletben a fertőzés után 0 és 3 óra múlva adtuk az antibiotikumot. Minden dózisszinten 5 egérből álló csoportokat vizsgáltunk, és az átlagos védő dózis (PDS0) meghatározása céljából 5 napon át megfigyeltük az állatokat. Az eredményeket a 10. táblázatban mutatjuk be. A Bu-2183 A és B mindhárom vizsgált fertőzéssel szemben in vivo aktivitást mutatott. 10. táblázat A Bu-2183 A és B in vivo aktivitása PDso mg/kg-ban Fertőző (egyszeri dózis) mikroorganizmus Bu-2183 A Bu-2183 B Staphylococcus aureus Smith 42 100 Escherichia coli NIHJ 92 135 fteudomonas aeruginosa A9930 230 540 PDso mg/kg-ban (kétszeri dózis) Staphylococcus aureus Smith 36x2 Escherichia coli NIHJ 45x2 Reudomonas aeruginosa A9930 80x2 Egereken szubkután és intravénás adagolással határoztuk meg a Bu—2183 A és B akut toxicitását. 15 napon át Egyeltük meg az egereket, és a Bu—2183 A komponens intravénás (i.v.), illetve 20 szubkután (s.c.) LD50 -értékét 2500 mg/kg-nak, illetve 1000 mg/kg-nak találtuk. A Bu-2183 B komponens a Bu—2183 A-nál sokkal kevésbé toxikusnak mutatkozott, és maximálisan 2000 mg/kg-os dózisszintig sem az i.v., sem az s.c. adagolás 25 mellett nem hullott el egyetlen állat sem a 15 napos megfigyelési idő alatt. A Bu—2183 D komponens felhasználása: 30 A Bu-2183 D komponens biológiailag inaktív ugyan, de a biológiailag aktív Bu—2183 A, Aj és B komponensek félszintetikus előállításának értékes 35 köztiterméke. Mégpedig a Bu—2183 D köztitermék szabad aminocsoportját (a többi reakcióképes funkciós csoport megfelelő védése után) önmagában ismert módon N-acilezhetjük, és így (a védőcsoportok eltávolítása után) a Bu—2183 A jelű N-propio- 40 nil-, a Bu-2183 B jelű N-acetil- vagy a Bu-2183 A2 jelű N-butiril-származékhoz juthatunk. A következőkben a találmány szerinti eljárást a találmány oltalmi körének szűkítése nélkül példák- 45 kai szemléltetjük. A szabadalmi leírás eddigi részeiben és a példákban említett Amberlite IRC—50 és CG-50 karboxü-polimetakrilsav típusú, gyengén savas jel- 50 legű kationcserélő gyanták kereskedelmi neve. 55 1. példa (Fermentálás tankfermentorban) 60 83B jelzésű oltóközeg (3% glükóz, 2% halliszt, 0,5% szójaliszt, 0,2% pepton és 0,6% kalcium-karbonát) 100 ml-nyi, 500 ml-es Erlenmeyer-lombikokba bemért mennyiségeit a D946-B83 jelű Pseudomonas sp. törzs ferdeagar-tenyészetével oltjuk be. 65 3 napon át 28 °C-on inkubáljuk a lombikokat egv 13
