174539. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új BU-2183 antibiotikumok előállítására
3 174539 4 7. ábra: a szabad bázis formájú Bu—2183 D kálium-bromid-pasztillában felvett infravörös abszorpciós spektruma. 8. ábra: a Bu-2183 D sósavas sójának NMR-spektruma, oldószer: deutérium-oxid, belső standard: 2,2-dimetil-2-szüa-pentén-5-szulfonát, a felvétel egy JEOL60 NMR-spektrométeren (típus: TNM—C—60HL) készült. A szakemberek előtt különböző antibiotikumok ismertek, ezek között számos aminoglikozid-antibiotikum van, mint például a kanamicin, gentamicin, streptomicin, neomicin, tobramicin és a paromomicin. Szükség van azonban további, széles spektrumú antibiotikumokra, különösen az aminoglikozid-rezisztens mikroorganizmusokra, mint például a Pseudomonas-ra hatókra. A Bristol—Banyu törzsgyűjteményben Pseudomonas sp. D946—B83 jelzésű törzs, egy új Pseudomonas faj, egy indiai talajmintából izolált, nedvességkedvelő talajbaktérium. A mikroorganizmust az American Type Culture Collection, Washington, D. C, törzsgyűjteményben letétbe helyeztük, ahol az A. T. C. C. 31086 jelzést kapta. A találmány szerinti eljárással előállított új antibiotikum-komplex legalább öt amino-glikozid-komponensből áll, ezek közül három, a Bu-2183 A, Aj és a B jelű biológiailag aktív, és további kettő a Bu—2183 C és D jelű biológiailag nem aktív. A Bu-2183 antibiotikum-komplex és a fent említett három biológiailag aktív antibiotikum-komponens széles spektrumú antibakteriálís aktivitást mutat, és gátolja a legtöbb aminoglikozid-rezisztcns mikroorganizmus, beleértve a Pseudomonas fajokat is, növekedését. A Bu—2183, a BU—2183 A, a Bu—2183 A2 és a Bu—2183 B jelű antibiotikumok értékes baktériumellenes szerek, állati takarmányok adalékanyagai és a baromfi-, állat- és embergyógyászatban alkalmazható terápiás szerek. Jól alkalmazhatók Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok, különösen az amino-glikozid-rezisztens mikroorganizmusok által okozott fertőző betegségek kezelésére. A fermentációs úton nyert komplex egyik új, biológiailag nem aktív komponensét, a Bu-2183 D-t felhasználhatjuk a Bu-2183 A, Á2 és B biológiailag aktív komponensek félszintetikus előállítására (n-acilezés útján). A mikroorganizmus jellemzése A Bu—2183 antibiotikumot termelő mikroorganizmus, a Pseudomonas sp. D946-B83, A. T. C. C. 31086 jelű törzs kizárólagosan aerob, nem-spórázó, Gram-negatív baktérium. Sejtjei pálcika alakúak, és egyik végükön több flagelíával rendelkeznek. A D946-B83 jelű törzs 4 °C-on növekedő, de 41 °C-on nem növekedő, nedvességkedvelő mikroorganizmus. Glutamátos közegben és lefölözött tq oldatában fluoreszkáló színanyagot termel, a King’s B táptalajon viszont nem [H. Iizuka, K. Komagata: An Attempt at Grouping of the Genus Pseudomonas. J. Gen. Appl. Microbiol. 9, 73—82, (1963)]. Nem termel dtokróm-oxidázt. A D946-B83 jelű törzs morfológiai, kulturális és élettani jellemzői a következők: Morfológia : A D946-B83 jelű törzs mozgékony, nem-spórázó, Gram-negatív pálcikákból áll. Sqtjei egyenesek, vagy esetleg a hossztengelyük mentén meggörbültek. Celluláris tartalékként poli-/J-hidroxi-butirátot nem tartalmaznak [R. Y. Stanier, N. J. Pallérom és M. Doudoroff: The Aerobic Pseudomonads: A Taxonomic Study. J. Gen. Microbiol. 43,159-271, (1966)]. Nem képeznek burkot, nyálkát és nyelet. Növekedési jellemzők: Tápagaron és élesztőkivonat-agaron levő telepei: erőteljes növekedés. 1 napi növesztés után a telepek átmérője 0,5-1,5 mm. Diffúz, körkörös és kissé emelkedő, sima, puha telepek. Színük világos krémszín, később világos sárgásbarnás-narancsszínű, nem átlátszóak. Kismértékben viszkózusak. Diffundáló színanyag nincs. Húslevesen és élesztőkivonatos húslevesen: erőteljes növekedés, Zavarosodás, később üledék és esetleg lepedék. Élesztőkivonatos ferdeagar: Növekedés csak a felszínen. Anaerob körülmények között egyáltalán nincs növekedés. Kémiailag meghatározott, szervetlen sókat tartalmazó táptalaj: glükóz és laktóz mint egyedüli szénforrás jelenlétben mérsékelt növekedés. Növekedési faktor iránti követelmény: nincs. Növekedési hőmérséklet: 4°C-on csekély növekedés. 10-32 °C között mérsékelt-erőteljes növekedés. 37 °C-on gyér növekedés. 41 °C-on egyáltalán nincs növekedés. A közeg pH-jának hatása: 4,0-es pH-nál nincs növekedés. 4,5-es és 10,5—11,0-es pH-értéknél csekély növekedés. 5,5—9,5 pH-értéknél mérsékelt-jó növekedés. Nátrium-klorid hatása: 12% nátrium-klorid jelenlétében nincs növekedés. 6—9% nátrium-klorid jelenlétében csekély növekedés. 5% vagy ennél kevesebb nátrium-klorid jelenlétében mérsékelt növekedés. A fent leírt morfológiai és kulturális tulajdonságok a Pseudomonadaceae család megfelelő tulajdonságaihoz hasonlítanak. Élettani tulajdonságok: A D946-B83 jelű törzs egyes táptalajokon diffundáló fluoreszkáló színanyagot termel, másokon viszont nem. A Pseudomonas-ok egyik ismert faja, a Pseudomonas fluorescens nagymennyiségű fluoreszkáló anyagot termel (1. táblázat). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
