174276. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oldhatatlan biológiailag aktív fehétjék előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY 174276 JÉÊÊl Nemzetközi osztályozás: fgi Bejelentés napja: 1976. V. 24. (Cl—1667) C 07 G 7/02 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1979. V. 28. Megjelent: 1980. V. 30. Feltalálók: Szabadalmas: Bátkai László vegyész, 30%, Kovács Anna vegyészmérnök, 25%, Chinoin Gyógyszer és Vegyészeti Li Valentina vegyészmérnök, 25%, Dr. Horváth István vegyész, 10%, Termékek Gyára Rt. Budapest Inczefi István biológus, 5%, Budapest, Mármarosi Tamásné vegyészmérnök, 5%, Biatorbágy Eljárás oldhatatlan biológiailag aktív fehéijék előállítására 1 A találmány tárgya eljárás primer aminocsoportot tartalmazó, biológiailag aktív molekulák megkötésére poliolefm alapú ojtott hordozón. E. Katchalski és munkatársai maleinsavanhidrid: etilén (1:1) kopolimert [(Biochemistry 3, 905 5 (1964), 5, 792 (1966), W. Brümmer és munkatársai (Eur. J. Biochem. 25, 129 (1972)], valamint a 20 62 818 6 sz. Német Szövetségi Köztársaság-beli szabadalmi leírásban és a 763 382 sz. belga szabadalmi leírásban ismertetett eljárás szerint ma- 10 leinsav anhidridet és vinilcsoportokat 1 :1 arányban tartalmazó kopolimert használnak enzim antigének és enzim inhibitorok vízoldhatatlan preparátumainak készítéséhez. A biológiailag aktív anyagok megkötése a polimerben a fenti módszer bárme- 15 lyikével képzett maleinsavanhidridhez történhet. Katchalski és munkatársai módszerével oly módon, hogy a maleinsavanhidrid tartalmú kopolimerhez a térhálósítás folyamatával egyidőben kötik a biológiailag aktív anyagot. Mivel ennél a folyamatnál a 20 bekötés szerves oldószeres közegben indikátor jelenlétében történik a biológiailag aktív, érzékeny molekulán olyan változások jöhetnek létre, amelyek a biológiai aktivitás legalább részleges elvesztését eredményezhetik és így az aktív bekötés 25 hatásfoka romlik. Az előállított oldhatatlan enzim gél konzisztenciájú. W. Brümmer és mtsai (Eur.J.Bio-chem.25 129/1972) eljárása szerint a kopolimeren a kovalens megkötődés ugyan enyhe körülmények 30 2 között történik, azonban a kopolimer mechanikai tulajdonságai nem elégítik ki a szilárd enzimekkel szemben támasztott mechanikai követelményt. A fenti módszerekkel előállított szilárd enzimek gélszerű tulajdonsága technológiai szempontból nem teszi lehetővé a gyors fáziselválasztást. D. Dinelli és munkatársai (Process Biochemistry, 1972. aug. 9—12. oldal) cellulóz acetát vagy poli-7- -metil-1-glutamát szálba zártak enzimet, ezzel a módszerrel a szilárd enzimmel szemben támasztott mechanikai követelményt, a gyors fáziselválasztást biztosították. Eljárásuk hátránya azonban, hogy csupán a fehérjénél jóvál kisebb molekulák bontására alkalmas a szilárd enzim, mivel csak e molekulák diffúziója biztosított a szálba. Az eljárás másik nagy hátránya, hogy a cellulózacetát szál enyhén lúgos pH-n könnyen degradálódik, — így a nagyobb számú felhasználás fokozatos enzimveszteséggel jár. A 3 809 605 1. sz. Amerikai Egyesült Államokbeli szabadalmi leírás szerint térhálósított poliakroleint 123°C-on propilén és síiről szállal valamint nátriumkloriddal préselnek és olvasztanak össze, majd a nátriumkloridot kioldják és a kapott porózus szilárd hordozóhoz invertáz enzimet kötnek. A hordozó előállítása nem polimerkémiai reakció során történik. Ismeretes továbbá a polipropilén szál ojtásos kopolimerizációja a 881 374 (1961) sz. brit szabadalmi leírásból, mely szerint a szál textilipari színe
