174186. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L 13365 antibiotikum előállítására
13 174186 14 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az L 13 365 polipeptid-típusú antibiotikum előállítására, amely antibiotikum az alábbi tulajdonságokkal rendelkezik: I. olvadáspont: 210 °C, II. elemmösszetétel: szén: 51,35, hidrogén: 5,05, nitrogén: 10,50, kén: 11,05 és oxigén: 22,05%, III. ultraibolya spektrum: a következő oldószerekben a következő hullámhosszakon figyelünk meg jellemző ultraibolya elnyelési maximumokat: Oldószer Xmax W p}% Elcn Hidrogénklorid, 0,1 n 360 290 (váll) 103 237 326 0,15 M puffer 4Ö8 (váll) pH 7,5 378 290 (váll) 67 237 326 0,15 M puffer 408 99 pH 8,8 290 (váll) 238 336 IV. infravörös abszorpciós spektrum: az infravörös tartományban a következő hullámhosszakon találunk jellemző elnyelési maximumokat (nujol, cm-1): 3400 (váll), 3350, 3200 (váll), 3100, 2930 és 2870 (nujol), 2800-2400, 2380 (atmoszférikus széndioxid), 1750, 1670, 1620, 1540, 1480, 1460 és 1380 (nujol), 1420,1340,1320,1280,1240, 1195, 1170, 1145, 1120, 1075 (széles), 1015, 990, 935, 920 (széles), 900, 865, 840, 800, 770,155, 740, 720 (nujol), V. fajlagos forgatás: [«fiié 1+125° (0,8%, metanol és kloroform 1 :1 arányú elegyében), VI. oldhatóság: oldható dimetil-szulfoxidban, dimetil-formamidban és kloroform és metanol elegyeiben, gyengén oldódik kloroformban, metanolban, metanol és etilacetát elegyeiben, nátriumhidrogénkarbonát oldatban és jégecetben, oldhatatlan vízben és más közönséges szerves oldószerekben, VII. jellemző reakciók: Fehling Tollens Káliumpermanganát Koncentrált kénsav Ninhidrin pozitív pozitív pozitív sötétbarna szín negatív Ferriklorid pozitív Miliőn negatív 5 Schiff negatív An thron pozitív Folin Ciocalteau 10 negatív Elson-Morgan negatív VIII. ionizálhatóság: a potenciometrikus titrálás szerint egy, pKa: 7,8 15 értékkel jellemezhető ionizálható csoport van jelen (metilcelloszolv és víz 4:1 arányú elegyében vizsgálva), IX. Rf-értékek: (a kromatográfiás vizsgálatot Whatman No. 1. papíron 20 végeztük, az aktív anyag helyét bioautográfiával határoztuk meg, tesztorganizmusként Staphylococcus aureus-t használtunk) Oldószerelegy Rf 25 n-butanollal telített pH 6,0 puffer 0,75 Vízzel telített n-butanol + 2% 30 p-toluolszulfonsav 0,80 Vízzel telített n-butanol + 2% tömény ammónia 0,70 35 Butanollal telített pH 6,0 puffer 0,0 Ammóniumklorid (20 súlyszázalékos vizes oldat) 0,0 40 n-butanol : metanol : víz 40 :10 : 20 arányú, 0,75 g metil-narancsot tartalmazó elegye 0,90 n-butanol : metanol : víz 40 :10 : 30 0,90 45 Víz és aceton 1 :1 arányú elegye 0,35 Vízzel telített etilacetát 0,0-0,31 a HF/UV254 szilikagél lemezeken kivitelezett vékony- 50 rétegkromaxográfiás vizsgálatok eredményei (a iluoreszkáló területeket ultraibolya fényben vizsgáltuk): eluáló elegy: kloroform és metanol 85 : 15 arányú elegye: Rf-érték: 0,51, azzal jellemezve, hogy az Actinoplanes sarveparensis C.B.S. No. 305,76 törzset 55 felhasználható szén- és felhasználható nitrogénforrást, valamint szervetlen sókat tartalmazó táptalajon, süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények között tenyésztjük, és kívánt esetben a képződött L 13 365 antibiotikumot előnyösen szerves oldósze*0 rés extrakcióval a fermentléből kinyerjük. 2 ábra A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 794491 - Zrínyi Nyomda, Budapest 7
