174139. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 1-hidroxi-9-keto-vagy 1,9-dihidroxi-3-alkil-dibenzo [b,dú]piránok előállítására
9 174139 10 IR: (CHCI3) 3,04 (OH) és 5,88/1 (CO), ‘H NMR (CDCI3): 5 6,77 (egyszeres, 1H, D20 csere), 6,34, 6,30 (2 kettős, 1H mindegyik, J=2Hz, H2 és H,), 4,8 (széles kettős, 1H, J=14Hz, Hj oa), 3,03-1,02 (30H) különösen 2,35 (hármas, 2H, J=6Hz, Hs'), 2,07 (egyszeres, 3H, CH3C=0), 1,47 (egyszeres, 3H, 60-CH3), 1,20 (egyszeres, 6H, M gém. di-CH3) és 1,11 ppm (egyszeres, 3H, 6a-CH3), pontos tömegmeghatározás szerint m/e 386,2461 (számított: C24H34C)4, 386,2457). B vegyület (+)-transz-3-(1 ’,1 ,-dimetil-heptil)-6,6a,7,8, 10,10a-hexahidro-l ,6’-dihidroxi-6,6-dimetil-9H-dibenzo[b,d]pirán-9-on UV (EtOH) Xmax 207, 225 (váll) és 280 nm (e = 16800, 4200 és 80), IR: (CHC13) 3,03 (OH és 5,90/i (CO), *H NMR (CDC13: S 6,34 (egyszeres, 2H, H2 és H4), 4,08 (széles kettős, 1H, J=14Hz, H10a)> 3,74 (sokszoros, 1H, H6’)> 3,02—1,02 (32H) különösen 1,47 (egyszeres, 3H, 6/3— CH3), 1,20 (egyszeres, 6H, gém. di-CH3), 1,15 (kettős, 3H, J=6Hz, CH3C—OH) és 1,11 ppm (egyszeres, 3H, 6a—CH3), [a]r>5 = +46,3° (C3, CHC13), pontos tömegmeghatározás szerint: m/e 388,2614 (számított: C24H3604, 388,2613). C vegyület transz-3-(r,l ’-dimetil-heptil)-6,6a, 7,8,10,1 Oa-hexahidro-1,9- -dihidroxi-6,6-dimetil-9H-dibenzo[b,d]pirán-6’-on UV (EtOH) Xmax 208, 227 (váll) és 280 nm (e = 19000, 4600 és 80), IR: (CHCI3) 2,98 (OH) és 5,88/r (C=0), *H NMR (CDC13): ő 6,34, 6,28 (2 kettős, 1H mindegyik, J=2Hz, H2 és H4), 4,29 (széles egyszeres, 1H, H9 ekvatoriális), 3,27 (széles kettős, 1H, J=15Hz, H10 ekvatoriális), 3,0-1,02 (32H) különösen 2,96 (széles egyszeres, 1H, Hjoa); 2,37 (háromszoros, 3H, CH2-C=0), 2,08 (egyszeres, 3H, CH3C=0), 1,39 (egyszeres, 3H, 6/3-CH3), 1,19 (egyszeres, 6H, gém. di-CH3) és 1,06 ppm (egyszeres, 3H, 6a-CH3), pontos tömegmeghatározás szerint: m/e 388,2614 (számított: C24H3604, 388,2613). D vegyület transz-3-(l ’,1 ’-dimetil-heptil)-6,6a,7,8,10,10a-hexahidro-l ,6’,9- -trihidroxi-6,6-dimetil-9H-dibenzo[b,d]pirán UV (EtOH) Xmax 208, 225 (váll) és 275 nm (e =32000, 7300 és 130), IR: (CHC13) 2,98/i (OH), *H NMR (CDC13): 6,34, 6,31 (2 kettős, mindegyik, J=2Hz, H2 és H4), 4,28 (széles egyszeres, 1H, H9 ekvatoriális), 3,74 sokszoros, 1H, HóO, 3,25 (széles kettős, 1H, J=15Hz, Hj 0 ekvatoriális), 3,02—1,02 (33H) különösen 2,96 (széles egyszeres, 1H, Hioa)> 1,37 (egyszeres, 3H, 60-CH3), 1,19 (egyszeres, 6H, gém. di-CH3), 1,15 (kettős, 3H, J=6Hz, CH3CH-OH) és 1,06 ppm (egyszeres, 3H, 6a-CH3), pontos tömegmeghatározás szerint: m/e 390,2769 (számított: C24H3804, 390, 2770). A Bacillus cereus NRRL B—8172 törzs jellemzése. A baktériumot a Bacillus cereus Frankland és Frankland egy törzsének határoztuk meg. A sejtek nagyok, spóraképző pálcikák, átlagos nagyságuk 4,7/i x 1,6/1, rövid láncokban állnak. Gram-pozitív és Gram-változó festésűek, nem mozognak. Endospóráik ellipszoid alakúak, elhelyezkedésük központi-paracentrális. Táp-agaron a spórák 18-24 óra múlva kifejlődnek. A spórák mérete: 0,95/i x l,7/i. A spórangiák nem duzzadtak. A törzs telepei enyhén durva felszínűek, szabálytalan alakúak, fehéres-zavaros színűek, a széleik hullámosak. A telepek felszíne nem fényes, hanem matt. A mikroorganizmus 8° C és 37° C közötti hőmérsékleten nő, az optimális növekedési hőmérséklet: 30°C. 43°C hőmérsékleten mikroorganizmus nem nő. Ammóniumsót tartalmazó táptalajon savat termel, de gázképződés D-glükóz és D-maltóz jelenlétében nem figyelhető meg. L-arabinóz, D-mannit és D-xilóz mellett sem savat, sem gázt a mikroorganizmus nem termel. Sem indolt, sem hidrogénszulfidot nem mutattunk ki. A zselatint a mikroorganizmus 24 órán belül gyorsan hidrolizálja, keményítő hidrolízise szintén bekövetkezik, a tej peptonizációja és savtermelés lassú (6. napon). A tenyészet kataláz-pozitív és acetil-metil-karbinolt termel. A találmány szerinti eljárás során használt mikroorganizmus abban különbözik a Bacillus megaterium-tól, hogy acetil-metil-karbinolt szintetizál, ugyanakkor mannitolból nem termel savat. Ahogy azt az előzőekben megadtuk, ha a II általános képletű vegyületek helyett (±)-transz-l-hidroxi-3-(l ’,1 ’-dimetil-heptil)-6,6-dimetil-6,6a,7,8,10,- 10a-hexahidro-9H-dibenzo[b,d]pirán-9-on-t, mint például (±)-transz-3f(r,r-dimetil-heptil)-6,6-dimetil-6,6a, 7,8,10,10a-hexahidro-9H-dibenzo[b,d]pirán-1,9-diol-t használunk a fentiekben ismertetett fermentáció során, úgy az analóg négy vegyületet kapjuk, amelyekben az oldallánc utolsó előtti szénatomjához vagy keton- vagy hidroxilcsoport van, továbbá a dibenzo[b,d]pirán-gyűrű 9-es helyzetében pedig vagy egy keton- vagy egy hidroxilcsoport van. A találmány szerinti eljárás során a BaciÜus cereus NRRL B—8172 mikroorganizmus helyett használhatunk más mikroorganizmusokat, például Cunninghamella blakeselleeana, Cunninghamella elegáns, Streptomyces cinnamonous, Mucor parasiticus-t is. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket analgetikumként használjuk. A vegyületek analgetikus hatását azzal bizonyítjuk, hogy gátolják az egerek intraperitoneális injekcióval adagolt ecet5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
