174127. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alkálifém- vagy ammónium-inzulin tisztítására gélszűréssel
174127 12 Az összes eluált szilárd Csoport Térfogat ml Frakciók anyaghoz viszonyított szilárd anyag% A 1410 10-69 1,3 B—1 1200 70-119 2,7 B—2 820 120-154 6,0 C 1920 155-235 90,0 A C-csoportból 26,5 g cink-inzulint állítunk elő, melynek hatóképessége 25,3 egység/mg és proinzulin tartalma 0,57%. így a cink-inzulin kitermelés a súlyra számítva 98,1%-nak az egységre számítva 95,9%-nak felel meg. Ha ugyanabból a pankreász adagból úgy készítünk cink-inzulint, hogy az alkálifém-kristályosítási és a gél-szűrési eljárásokat a hagyományos, vizes és vizes alkoholos oldószerekből történő izoelektro- 25 mos kicsapással helyettesítjük, a pankreászra számítva ugyanazt a kitermelést érjük el, azonban a hatóképesség 24,3 egység/mg és a proinzulin tartalom 3,18%. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás alkálifém- vagy ammónium-inzulin tisztítására gél-szűréssel, azzal jellemezve, hogy egy 35 száraz állapotban legalább 4 súlyszázalék, előnyösen 4—98 súlyszázalék vízfelvevőképességgel és 100 mikronnál kisebb részecskeátmérővel, előnyösen 20—80 mikron részecskeátmérővel rendelkező gélt duzzasztunk, a duzzasztott géllel egy oszlopot 40 megtöltünk, a megtöltött oszlophoz legalább 80 százalék tisztaságú alkálifém- vagy ammónium-inzulin vizes oldatát adjuk - melyben az inzulin koncentrációja 1 és 8 súlyszázalék közötti érték, mimellett az inzulin teljes mennyiségéhez 0,8 és 45 6,7 gramm/liter közötti ágytérfogatú töltött oszlop szükséges, és az oldat pH-ja 2,0 és 3,5 közötti érték - és az inzulint az oszlopról 5 °C és 30 °C közötti hőmérsékleten valamely fenti pH-tartományba eső, kívánt esetben szervetlen sót is 50 tartalmazó, vizes eluálószerrel eluáljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 5 és 20 súlyszázalék közötti tartományba eső vízfelvevőképességgel rendelkező gélt használunk. 55 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy térhálós dextrán gélt használunk. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 5 súlyszázalék víz- 60 felvevőképességgel rendelkező térhálós dextrán gélt használunk. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 3,5 és 5,0 gramm/liter közötti ágytérfogatú töltött oszlopot használunk. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 4,5 gramm/liter ágytérfogatú töltött oszlopot használunk. 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az inzulin 1,0 n ecetsavval készített vizes oldatát használjuk. 8. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az inzulin 0,5 n ecetsavval készített és a pH-értéket híg sósav-oldattal beállított vizes oldatát használjuk. 9 Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy eluálószerként 0,5 n ecetsavat használunk. 10. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy valamely legfeljebb 0,02 mól mennyiségű szervetlen sót is tartalmazó eluálószert használunk. 11. A 10. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy valamely 0,01 mól mennyiségű szervetlen sót tartalmazó eluálószert használunk. 12. A 11. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy szervetlen sóként nátriumkloridot használunk. 13. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az eluálást a környezet hőmérsékletén végezzük. 14. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az eluálást 5 °C-on végezzük. 15. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja marha nátrium-inzulin tisztítására azzal jellemezve, hogy egy 5 súlyszázalék vízfelvevőképességgel és 20—80 mikron közötti részecskeátmérővel rendelkező térhálós dextrán gélt duzzasztunk, a duzzasztott géllel egy 7 liter ágytérfogatú 10 cm átmérőjű, 100 cm magasságú oszlopot megtöltünk, a megtöltött oszlophoz marha nátrium-inzulin 0,5 n ecetsavval készített, 4,4 súlyszázalék inzulin koncentrációjú oldatát adjuk, és az inzulint az oszlopról a környezeti hőmérséklettel megegyező hőmérsékleten 0,5 n ecetsavoldattal eluáljuk. 16. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja sertés nátrium-inzulin tisztítására, azzal jellemezve, hogy egy 5 súlyszázalék vízfelvevőképességgel és 20-80 mikron közötti részecskeátmérővel rendelkező térhálós dextrán gélt duzzasztunk, a duzzasztott géllel egy 7 liter ágytérfogatú 10 cm átmérőjű, 100 cm magasságú oszlopot megtöltünk, a megtöltött oszlophoz sertés nátrium-inzulin 0,5 n ecetsavval készített, 5 súlyszázalék inzulin koncentrációjú oldatát adjuk, és az inzulint az oszlopról a környezeti hőmérséklettel megegyező hőmérsékleten 0,5 n ecetsavoldattal eluáljuk. 1 rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 804456 - Zrínyi Nyomda, Budapest 6
