173988. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az 5(6)-helyzetben helyettesített 1-szulfonil-benzimidazolok előállítására
35 173988 36 (B) 1 -Dimetilaminoszulfonil-2-[etoximetilénamino]-5(6)-( 1,3,4-o xadiazol-2-il)-benzimidazol 3 g (0,01 mól) l-dimetilaminoszulfonil-2-amino-5(6)-benzimidazolkarbonsavhidrazidot és 100 ml etilortoformiâtot 24 órán át forralunk visszafolyató hűtő és Dean-Stark feltét alkalmazásával. Ezután a reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot etilacetátban feloldjuk, és a terméket betöményítéssel és lehűtéssel kristályosítjuk. így 580 mg 1 -dimetilaminoszulfonil-2-(etoximetilénamino)-5(6)-( 1,3.4-oxadiazol-2-il)-benzimidazolt kapunk. Elemzési eredmények Ci4H16N604S összegképletre (molekulasúly: 364) számitott: C =46,15%. H =4.40%. N = 23,08%, talált: C =46.19%. H =4,38%. N =22,64%. (C) 1 -Dimetilaminoszulfonil-2-amino-5(6)-( 1,3,4-oxadiazol-2-il)-benzimidazol 580 mg l-dimetilaminoszulfonil-2-(etox:metilénamino)-5(6)-(l ,3,4-oxadiazol-2-il)-benzimidazolt egy órán át keverünk szobahőmérsékleten. 10 ml n sósavban. A reakcióelegyet leszűrve 230 mg 1-diniét ilaminoszulfonil-2-amino-5(6)-( 1.3.4-0 xadiazol-2- -il)-benzimidazol-hidrokloridot kapunk, amelynek olvadáspontja 200 °C. (bomlás). Elemzési eredmények Ci i H) ■ HC1 összegképletre (molekulasúly: 344.5) számított: C = 38,32%. H =3.80%. N = 24,38%. talált: C = 38,54%. H =4.07%. N =24.61%. A (C) lépésben kapott savas szűrletet nátriumkarbonáttal kezeljük, annyi nátriumkarbonátot adagolunk az oldatba, amíg az lakmuszra nézve lúgos nem lesz. Szilárd anyag válik le a lúgos oldatból. A levált szilárd anyagot szűrjük. így 120 mg 1 -dimetilaminoszulfonil-2-amino-5(6)-(l .3.4-0 xadiazol-2-il)-benzimidazolt kapunk, amelynek olvadáspontja 230-231 °C (bomlás). Elemzési eredmények C| i H, 2 N<,0.iS összegképletre (molekulasúly: 308) számított: C =42,85%, H =4.19%. N =27,03%. talált: C =42,61%, H =3,92%. N = 27,26%. 53. példa A 27. példa szerinti módon járunk el, azonban kiindulási anyagként 475 g 2-amino-5(6)-benzoilbenzimidazolt, 2,5 mól nátriumhidridet és 365 g ciklohexilszulfonilkloridot alkalmazunk. Így 120 g 1 -ciklohexilszulfonil-2-amino-6-benzoilbenzimidazolt kapunk, amelynek olvadáspontja 210-213 °C (bomlás). Elemzési eredmények C2oH2IN,03S összegképletre (molekulasúly: 383) számított: C =62,64%, H =5.52%, N = 10,96%, talált: C =62,43%, H =5.27%. N = 10,51%. 54. példa A 27. példa szerinti módon járuk el, azonban kiindulási anyagként 26,4 g (1,1 mól) nátriumhidridet, 260 g (1,1 mól) 2-amino-5(6)-benzoilbenzimidazolt és 200 g tiofénszulfonilkloridot alkalmazunk. Így l-(tien-2-il-szulfonil)-2-amino-5(6)-benzoilbenzimidazolt kapunk, m/e 351. Az 1 általános képletű vegyületek széles spektrumú vírusölő hatást mutatnak. Nemcsak az echovirus, Mengo-, Coxsackie- (A9, A21, B5) polio- (I., II. és III. típus) vagy rhino vírus (25 törzs) növekedését gátolják, hanem számos különböző típusú influenza vírusét is, így az alábbiakét: Ann Arbor, Maryland B, Hong Kong A. Pr—8a és Taylor C (A és B típus). Az I általános képletű vegyületek különböző vírusok növekedését gátló hatását in vitro a Siminoff által leírt plaque gátló teszttel [Applied Microbiology, 9(1), 66-72. (1961.)] szemléltetjük, amelyet az alábbiakban részletesen ismertetünk. Kísérleti módszerek 25 ml-es Falcon-lombikokban 37 °C hőmérsékleten 5% inaktivált szarvasmarhaembrió szérumot (FBS). penicillint (150 egység/ml) és sztreptomicint (150 megírni) tartalmazó 199 jelzésű közegben afrikai majom vesesejteket (BSC—1) vagy Hela sejteket tenyésztünk. Egybefüggő monoréteg kialakulása után a felső tenyészközeget eltávolítjuk, és a vírus (echo-. Mengo-, Coxsackie-, polio- vagy rhinovírus) megfelelő hígításának 0,3 ml-ét adjuk mindegyik lombikhoz. Szobahőmérsékleten 1 órán át tartó abszorpció után a vírussal megfertőzött sejtréteget befedjük egy olyan közeggel, amely 1 rész 1%-os 2. számú Ionagarból és 1 rész kétszeres erősségű. FBS-t. penicillint és sztreptomicint tartalmazó, 199 jelzésű közegből áll, amely a gyógyszert 100, 50, 25, 12, 6, 3 és 0pg/ml koncentrációban tartalmazza. A gyógyszert nem tartalmazó lombik szolgál kontrollként. A szulfonilbenzimidazol-vegyület alapoldataiból dimetilszulfoxiddal 104 mcg/ml koncentrációjú hígítást készítettünk. A lombikokat 72 órán át inkubáljuk 37 °C hőmérsékleten a polio-, Coxsackie-, echo- és Mengo-vírus esetében és 120 órán át 32 C hőmérsékleten a rhinovírus esetében. Plaque-ok (tarfoltok) láthatók az olyan területeken, ahol a vírus fertőzött és elszaporodott a sejtekben- A vírus inaktiválása és a sejtrétegnek a lombik felületéhez való rögzítése céljából mindegyik lombikba 10% formaldehidet és 2% nátriumacetátot tartalmazó oldatot adunk. A különböző sejtfelületek kristályibolyával való megfestése után megszámoljuk a vírus által okozott tarfoltokat tekintet 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 18
