173958. lajstromszámú szabadalom • Eljárás benzizotiazolon-származékok előállítására
15 173958 16 tűk. A szerves fázist vízmentes magnéziumszulfáton szárítottuk, szűrtük, és a szűrletet bepároltuk. 9,45 g N-[0-(2'-piridil)-etil]-2-metoxikarbonil-4-metil-benzolszudfénamidot kaptunk olaj formájában. A kapott nyers intermediert 40 ml etanolban oldottuk, hozzáadtunk 10 ml etanolban oldott 0,12 g nátriumhidroxidot, és a reakcióelegyet 2 órán át forraltuk visszafolyató hűtő alatt. Az etanolt ezután csökkentett nyomáson lepároltuk, a maradékhoz 100 ml vizet és 50 ml kloroformot adtunk, és összerázás után a szerves fázist elválasztottuk, 100 ml vízzel mostuk, vízmentes magnéziumszulfáton szárítottuk, és az oldószert csökkentett nyomáson lepároltuk. A maradékot alumíniumoxidon végzett kromatografálással tisztítottuk, eluálószerként diklórmetánt használva. 5,0 g (67%) 5 - me t il - 2 - [ß-( 2’-piridil )-etil ]-1,2-benzizotiazol-3-on-t kaptunk, op. 103-105 °C (vizes etanol). Biológiai adatok A fenti példák szerint előállított vegyületeket megvizsgáltuk, hogy milyen mértékben gátolják in vitro a vérlemezkék aggregációját. 20 ml emberi vért szívtunk műanyagfecskendőbe, és a véralvadás megakadályozására azonnal 0,1 térfogat 3,8g/ml koncentrációjú trinátrium-citrát-dihidrát-oldattal elegyítettük. A vérlemezkékben dús vérplazmát úgy állítottuk elő, hogy a fenti, véralvadásgátlót tartalmazó vért 12 percig centrifugáltuk szobahőmérsékleten 180 g intenzitással. 0,9g/ml koncentrációjú nátriumklorid-oldatban keverőgépes emulgeáló berendezés segítségével kollagént (marha Achilles-int) szuszpendáltunk. A vérlemezkékben dús vérplazmát 0,1 térfogat fiziológiás sóoldattal (kontroll), továbbá sóoldatban oldott valamely vizsgálandó vegyülettel elegyítettük, és 3 percig inkubáltuk 37 °C-on a kollagén hozzáadása előtt. A vízben oldhatatlan vegyületeket 0,005 térfogat dimetilformamidban oldva adtuk a vérlemezkékben dús vérplazmához, és ezt az oldószert ebben az esetben a kontroll is tartalmazta. Mindegyik vegyületnél a végső koncentráció 100 mikromól volt. A kollagén hatására bekövetkező vérlemezke-aggregációt fotometriásan mértük [Born. G. V. R., Nature. 194, 927 (1962)] Vitatron lineáris írókészülékkel összekapcsolt Bryston aggregométer segítségével. A vegyületek aktivitását a kontroll vizsgálatnál éppen maximális fényátbocsátás-változást kiváltó kollagéndózis hatására fellépő aggregáció százalékos gátlásaként fejeztük ki. Az eredményeket az 1. táblázat tartalmazza. 1. Táblázat Példa száma Gátlás, % Példa száma Gátlás, % 1. 100 14. 100 2. 100 15. 92 3. 100 16. 100 1. Táblázat folytatása Példa száma Gátlás, % Példa száma Gátlás, 4. 100 17. 100 5. 100 18. 91 6. 100 19. 92 7. 100 20. 100 8. 100 21. 91 9. 100 22. 100 10. 100 23. 23 11. 100 26. 100 12. 100 27. 100 13. 100 31. 100 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás (I) általános képletű benzizotiazolon-származékok és gyógyászatiig alkalmas savaddíciós sóik előállítására, ahol R1 és R2 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, kisszénatomszámú alkil-, kisszénatomszámú alkoxi- vagy halogénezett kisszénatomszámú alkil-csoport, vagy halogénatom, X jelentése vegyértékkötés vagy 1-8 szénatomos, egyenes vagy elágazó láncú alkilén-csoport, R jelentése 5—7 tagú, egy nitrogénatomot tartalmazó heterociklusos csoport, amely adott esetben még egy nitrogén-, kénvagy oxigénatomot tartalmaz és/vagy egy karbociklusos gyűrűvel lehet kondenzálva, vagy valamely -NHR3 általános képletű csoport, ahol R3 jelentése 5-7 tagú, egy nitrogénatomot tartalmazó heterociklusos csoport, és adott esetben az R vagy R3 csoport szubsztituensként oxo-, kisszénatomszámú alkil- vagy kisszénatomszámú alkoxi-karbonil-csoportot tartalmaz, azzal a feltétellel, hogy (1) ha X jelentése vegyértékkötés, akkor R jelentése pirimidil-, piridil-, tiazolinil- vagy benztiazolil-csoporttól eltérő, és (2) ha R1 és R2 az 5-ös és 7-es helyzetben van és jelentésük hidrogén- vagy halogénatom, továbbá X jelentése kisszénatomszámú alkilén-csoport, akkor R jelentése a X csoporthoz nitrogénatomon keresztül kapcsolódó piperidinil-, pirrolidinil-, morfolinil- vagy piperazinil-csoporttól eltérő, azzal jellemezve, hogy 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
