173788. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-amino-2-spiro[oxa-(vagy tia)-cikloalkil-pentán]-3-karbonsav-származékok előállítására

173788

10

(XV általános képletű vegyület, n = m = 2, X szulfmilcsoportot, Rí hidrogénatomot és R2 2-fenil-acetilcsoportot jelent)

J) vegyület: 6-(2”-amino-2”-fenil-acetamido)-2’,3 ’,5 ’,6’-tetrahidro-spiro[penám-2,4’-(4H)-tiopiránj-3-karbonsav-l’-oxid (XV általános képletű vegyület, n = m = 2, X szulfmilcsoportot, Rí hidrogénatomot és R2 2-amino-2-fenil-acetilcsoportot jelent)

a) Penicillin G-vel végzett összehasonlító kísérletek

9

Kísérleti törzs

Penicillin G

A. vegyület

E. vegyület

H. vegyület

S. aureus 6538

1

2

10

1

S. aureus 52149

1

2

1

1

E coli B

1

4

5

1

E. coli B Ampi-R

1

2

>2-b) Oxacillinnel végzett összehasonlító

kísérlet

Kísérleti törzs

Oxacillin

C) vegyület

S. aureus 6538

1

2

S. aureus 52149

1

1

c) Ampicillin-nel végzett összehasonlító

kísérletek

s

Q>

JjS

*o

‘SL

g

>S

>

%

r

r

Kísérleti törzs

<

ai

u*

H"»

S. aureus 6538

1

1

2

2

E. coli

1

3,5

7

1

E. coli B Ampi-R

1

1

3

2

E. coli K 12-44

1

3,5

10

3

E. coli K 12—44S

1

1,9

15

3

E. coli K 12-44R

1

1,5 >1,5

2

d) 6-Amino-penicillánsawal végzett kísérletek

Kísérleti Penicillán- D)

törzs sav vegyület

S. aureus 6538 1 0,5

S. aureus 52149 1 0,5

E. coli B 1 0,3

E. coli B Ampi-R 1 0,3

e) Methicillin-nel végzett összehasonlító kísérlet

Kísérleti törzs Methicillin G) vegyület

S. aureus 52149 1 0,5

Az eredményekbó'l látható, hogy a XV általános képletű vegyületek aktivitása lényegében azonos nagyságrendű a megfelelő ismert penicillinekével. E vegyületek rendkívüli jelentősége viszont abból tűnik ki, hogy — eltérően az ismert penicillinektől - megnövekedett ellenállóképességet tanúsítanak a béta-laktamázokkal, azaz a penámgyűrű laktámfunkcióját hidrolizálni és ezáltal a penicillin-származékot hatástalanítani képes enzimekkel szemben.

Ezen tulajdonságukat olyan összehasonlító kísérletek eredményeivel demonstráljuk, amelyben a B) vegyület hidrolízisének kinetikáját az Ampicillinével hasonlítjuk össze, Gram-negatív baktériumoktól származó kétféle béta-laktamázt használva. A kapott eredményeket a 6. oldalon levő táblázatban foglaljuk össze:

Az eredményekből látható, hogy béta-laktamáz TEM jelenlétében végzett, 6 percen át tartó inkubálás után az Ampicillin aktivitása nem mutatható ki, míg ugyanakkor 438 mikro mól B) vegyületnek megfelelő aktivitás mutatható ki, vagyis a B) vegyület eredeti aktivitásának 87%-a észlelhető. A béta-laktamáz P 99 esetében ugyanez figyelhető meg, vagyis 9 percen át tartó inkubálás után az Ampicillin aktivitása nem mutatható ki, míg a B) vegyület aktivitása 334 mikromólnak felel meg, azaz az eredeti aktivitás 67%-a észlelhető.

Ezek az eredmények ugyanakkor bizonyíthatók az előzőekben ismertetett aktivitási vizsgálatokban is. így például a B) vegyületnek az Escherichia coli B törzsön, illetve e törzs mutánsán, az Escherichia coli B Ampi-R törzsön (amely rendkívül erős béta-laktamáz termelő) mutatott hatása közötti különbség faktora 3,5.

Az F) vegyület esetében is megnövelt ellenállóképességet tapasztalhatunk az említett béta-laktamázokkal szemben. Ez az ellenállóképesség azonban nem annyira kifejezett, mint a B) vegyület esetében. Az Ampicillinhez képest viszont nem

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

5