173783. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nonapeptidaminok előállítására
7 173783 8 Ezt a reakciót valamely oldószer jelenlétében valósíthatjuk meg. Az oldószer bármely, a peptidek kondenzációs reakcióiban általánosan használatos oldószer lehet. így például megemlíthetjük a vízmentes vagy vizes dimetilformamidot, dimetilszulfoxidot, piridint, kloroformot, dioxánt, diklórmetánt, tetrahidrofuránt és az ilyen oldószereknek a megfelelő keverékeit. A reakció hőmérséklet abba a tartományba esik, amelyet a peptid kötések kialakításához vezető reakció esetén alkalmaznak, azaz általában körülbelül -20 °C és körülbelül 30 °C közé. Ezen túlmenően a találmány szerinti eljárással előállítani kívánt vegyületek prekurzor anyagait (védett peptideket) szintén könnyen előállíthatjuk szilárd fázisú szintetikus eljárásokkal. A kívánt kondenzációs reakció befejeződése után, ha a termék védőcsoportokat tartalmaz, ezeket a csoportokat ismert eljárásokkal távolíthatjuk el. Ilyen ismert eljárás a katalitikus redukció valamely katalizátor, így például palládiumszivacs, szénre felvitt palládium, platina vagy hasonlók jelenlétében, szolvolízis például hidrogénfluoriddal, vagy trifluorecetsawal és redukció fémnátriummal folyékony ammóniában. A kapott I általános képletű peptidek a reakcióelegyből a peptidek kinyerésére ismert eljárásokkal nyerhetjük ki, például extrakcióval, megosztással, oszlopkromatográfiával stb. Az 1 általános képletű vegyületeket só vagy fém-komplex alakjában szintén kinyerhetjük. Az I általános képletű peptidekkel sóképzésre hajlamos savak példáiként megemlíthetjük a szervetlen savakat, így sósavat, brómhidrogénsavat, perklórsavat, salétromsavat, tiociánsavat, kénsavat, foszforsavat és a szerves savakat, így a hangyasavat, ecetsavat, propionsavat, glikolsavat, tejsavat, oxálsavat, malonsavat, borostyánkősavat, maleinsavat, fumársavat, piroszőlősavat, antranilsavat, fahéjsavat, naftalinszulfonsavat, vagy szulfanilsavat. Az I általános képletű peptidekkel fémkomplex képzésére hajlamos fémek példái egyebek között a cink, nikkel, kobalt, réz és vas. Az üyen fémkomplexeket a szokásos módon állíthatjuk elő, például úgy, hogy az I általános képletű pepiidet a fentiekben említett fémek hidroxidjával vagy oxidjával reagáltatjuk 6—8 pH-értéken. A találmány szerinti eljárással előállítható I általános képletű polipeptidek LH—RH (luteinizáló hormont felszabadító hormon) aktivitást mutatnak, és ennek megfelelően képesek arra, hogy elősegítsék az LH (luteinizáló hormon) és FSH (tüsző stimuláló hormon) elválasztását. így az I általános képletű polipeptidek gyógyszerként használhatók az ovuláció emberben és állatban (például paktányban, anyajuhban, disznóban, szarvasmarhában, kancában, furjben vagy tyúkban) való elősegítésében. Ezeket a peptideket ezenkívül egyéb gyógyászati célra is felhasználhatjuk, olyan esetekben, amikor a hagyományos LH-RH, LH és FSH készítményeket alkalmazzák. Minthogy az I általános képletű polipeptidek LH-RH aktivitása körülbelül 5-60-szorosa a természetben előforduló LH—RH-nak, adagjukat minden alkalmazás esetén meg lehet határozni a fenti többszörös alapján, míg egyéb tényezőket is figyelembe kell venni, például a kezelendő személyt és a betegség fajtáját. így például az alkalmas adag körülbelül 2 ng—2 /ug/testúly kg/nap lehet. Az I általános képletű polipeptideket elsősorban nem orálisan adagoljuk, hanem például injektálással, rektálisan vagy vaginálisan, bár bizonyos esetekben orálisan is alkalmazható. Az adagolási egységek például injekciók, végbélkúpok, hüvelykúpok és porok lehetnek. Az injekciókat úgy készíthetjük, hogy az I általános képletű körülbelül 10-100 y mennyiségét 1 ml fiziológiás konyhasó-oldatban feloldjuk. Az I általános képletű polipeptideket ampullákban, liofüizált alakban is kiszerelhetjük- mannitot adva hozzá kötőanyagként, így azonnali használatra való injekcióként alkalmazhatók. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként alkalmazható peptideket a peptid-szintézisben általánosan alkalmazott ismert eljárásokkal vagy a szükségesnek talált eljárások segítségével állíthatjuk elő. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg. A példákban az alábbi rövidítések szilikagélen megvalósított vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat Rf-értékei az alábbi oldószer-rendszerben: Rf1 : kloroform-metanol-ecetsav 9:1 : 0,5 Rf2 : etilacetát-piridin-ecetsav-víz 30:10:3:5 Rf 3 : n-butanol-etilacetát-ecetsav-víz 1 :1: 1:1 A példákban használt kereskedelmi nevekkel jelölt anyagok az alábbiak: Biogel P-2: gél-szűréshez használt anyagok (gyártja BIO—RÁD, USA) Sephadex LH—20: észterezett dextrán gél (gyártja Pharmacia Fine Chemicals, Svédország) Amberlite XAD—2: polisztirol-gyanta Amberlite IR—45: gyengén bázisos anioncserélő-gyanta Amberlite IRA—410: erősen bázisos anioncserélő gyanta Amberlite CG—410: erősen bázisos anioncserélő gyanta Amberlite CG—45: gyengén bázisos anioncserélő gyanta Ezeket a gyantákat a Rohm et Haas CO. Ltd. cég (USA) gyártja. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
