173464. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szinergetikus hatású gyógyászati készítmények előállítására
15 173464 16 A fenti komponenseket külön-külön meg őr ölj ük és alaposan összekeverjük. A keveréket steril körülmények között megfelelő tartályokba töltjük és lezárjuk. Injekciós oldat előállítása céljából a fenti porkeveréket 2 ml injekciós célokra alkalmas vízben okijuk. 4. példa Injekciós oldat készítése céljából 1,0 g penicillin G4 100 mg (lR)-l-(L-alanil-amino)-etil-foszfonsavat tartalmazó 2 ml oldatban (per 1 ml megfelelő puffer) oldunk. A puffer összetétele a következő: Nátriumklorid 8,3 mg Klórkrezol 1,0 mg Jégecet 12- mg Nátriumhidroxid q.s. ad pH = 4,5 Injekciós célokra alkalmas víz ad 1,00 ml Az alábbi példákban az (1 R)-l -(L-alanil-amino)-etil-foszfonsav előállítását részletesen ismertetjük. 5. példa 14,1 g (0,168 mól) szilárd nátriumkarbonátot 7 g (0,056 mól) (lRJS)-l-aminoetil-foszfonsavnak 280 ml vízzel és 140 ml etanollal képezett oldatához adunk keverés közben 0 C*-on. Az elegyhez 0 C*-on keverés közben 17,9 g (0,056 mól) N-benzik>xikarbonil-L-alanin-N-hidroxi-szukcinimid-észter és 140 ml meleg etanol oldatát csepegtetjük kb. 15 perc alatt. A kapott oldatot 70 ml etanollal mossuk. A heterogén elegyet 1 órán át 0C°-on, majd 16 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, az elegy homogénné válik. Az elegyet bepároljuk, majd 200 ml vízzel ismét bepároljuk. A gumiszerű maradékot 500 ml vízben oldjuk. Az oldatot előbb 500 ml, majd 2 x 250 ml kloroformmal extraháljuk, majd kb. 80 ml 2n sósavval pH = 2-re savanyítjuk és ismét 500 ml, majd 2x250 ml kloroformmal extraháljuk. A vizes réteget bepároljuk és kationcserélő gyanta oszlopon (B.D.H., Zerolit 225, SRC 13, RS03H, 750 g, frissen regenerált savas ciklusban) átvezetjük. Az oszlopot vízzel eluáljuk, összesen 6 x 250 ml frakciót gyűjtünk össze. Az első négy frakciót egyesítjük, bepároljuk, majd a sósav eltávolítása céljából vízzel ismét bepároljuk. Végső maradékként (lR,S)-l-[N-benziloxikarbonil-L-alanil)-amino]-etil-foszfonsavat kapunk, melyet a következőképpen választunk szét: Az utóbbi maradékot 400 ml vízben oldjuk és 1 mólos benzilamint adunk titrálásszerűen pH = 4,5 érték eléréséig hozzá (titer 75 ml, elméleti fogyás 56 ml). A kapott oldatot bepároljuk, a maradékot vízből kristályosítjuk. J,3g (lS)-l-[(N-benziloxikarbonil-L-alanil)-amino]-etil-foszfonsav-benzilaminsót kapunk. Op.: 210-215 C*. Az anyalúgok bepárlása, majd vizes átkristályosítása után (lR)-l-[(N-benziloxi-karbonil-L-alanil)-amino]-etil-foszfonsav-benzilaminsót kapunk. Az első generáció súlya 0,59 g [op.: 226-228 C* bomlás, [a]^0 =-32,3° (c=l% ecetsavban], a második generáció súlya 0,825 g [op.: 225-227 C° (bomlás), [a]|,0 =-33* (c=l%, ecetsavban). Az első generáció vízből történő átkristályosításakor 0,333 g tiszta R-sztereoizomer-benzilaminsót kapunk, op.: 226—228 C (bomlás), [a]í0 = _33,l* (c= 1%, ecetsavban). 1,1 g (2,5 millimól) (lR)-l-[(N-benziloxikarbonil-L-alanil)-amino]-etil-foszfonsav-benzilaminsót 4 ml 2 n ammóniumhidroxidban oldunk, az oldatot kationcserélő gyanta-oszlopon (B. D. H., Zerolit 225, SRC 13, RSO3H, 120 g, savas ciklusban frissen regenerált) átvezetjük és vízzel eluáljuk. Összesen 200 ml savas eluátumot gyűjtünk öszsze, melyet 100ml-re bepárolunk. Ezután egymásután 100 ml metanolt, 0,3 g 5%-os palládium-szén katalizátort és 3 csepp j égecetet adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten és atmoszférikus nyomáson hidrogénezzük. A katalizátort leszűrjük és az oldószert ledesztilláljuk. A visszamaradó gumiszerű anyagot 50—50 ml n-propanollal háromszor bepároljuk. 0,6 g gumiszerű maradékot kapunk, op.: 275-280 C* (bomlás). Víz-etanol elegyből történő újabb átkristályosítás után 02 g (lR)-l-(L-alanil-amino)-etil-foszfonsavat kapunk. Op.: 295-296 C* (bomlás), [a]^° = -44° (c= 1%, vízben). 6. példa 30 g (0,24 mól) (1 R,S)-1 -aminoetil-foszfonsav és 120 ml (0,48 mól) 4 n nátriumhidroxid oldatához 14 C*on keverés közben 180 ml (0,72 mól) 4 n nátriumhidroxid-oldatot és 102 g (0,60 mól) klórhangyasav-benzilésztert adunk felváltva 4 részletben. A keverést folytatjuk, majd 2 óra múlva a hőmérsékletet 20 C*-ra emeljük. Az elegyet további 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 600 ml étert adunk hozzá és a fölös mennyiségű klórhangyasav-benzilészter kioldása céljából 2 órán át erőteljesen keverjük. A rétegeket elválasztjuk és a vizes fázist kb. 100 ml 5n sósavval pH = 2 értékre savanyítjuk, miközben a hőmérsékletet 10 C* alatt tartjuk. A képződő szuszpenziót a széndioxid eltávolítása céljából kis térfogatra bepároljuk. A maradékot 100 ml 2 n nátriumhidroxid és 50 ml víz elegyében oldjuk, kationcserélőgyanta oszlopon (B. D. H., Zerolit 225, SRC 13, RSQ3, 4,750 g, savas ciklusban frissen regenerált) átvezetjük és vízzel eluáljuk. összesen kb. 3,2 liter savas eluátumot kapunk, melyet szobahőmérsékleten bepárolunk és 3 x‘500 ml vízzel újra bepároljuk. A maradékot vízben oldjuk és kristályosodni hagyjuk. A kristályokat szűrjük, jéghideg vízzel mossuk és szárítjuk. Kitermelés: 39,2 g, op.: 111-113 C* (bomlás). Az egyesített anyalúgokat bepároljuk és •a maradékot 75 ml víz és 10 ml metanol elegy&ől hűtés közben kristályosítjuk. További 6,51 g 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
