173366. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szteroidok mikrobiológiai oxidálására
13 173366 14 0. 2% káliumdihidrogénfoszfát, 1.0% repceolaj és a többi víz. A táptalaj pH-értékét nátriumhidroxid-oldattal 7,0-re állítjuk be. 50 ml táptalajt 500 ml-es rázólombikba helyezünk, és 20 percig 120°-on sterilizáljuk, 5 majd lehűtjük. Ezután a lombikot 2 ml oltóközeggel beoltjuk, és 35°-on az 1. példa szerint rázógépen inkubáljuk. A főfermentáció megindítása után 40 órával 150 mg koleszterint adunk a táptalajhoz, majd 48 órával a 10 főfermentáció kezdete után 6,2 mg 2,2’-dipiridilt adunk hozzá. A 2,2’-dipiridil hozzáadása után 96 órával a fermentációt félbeszakítjuk és a fermentlevet az 1. példa szerint feldolgozzuk. Kitermelés 25 mg ADD. A fentiek szerint eljárva, de 4,0% szójabablisztet is használva, 38 mg ADD-t kapunk. A fentiek szerint eljárva, de repceolaj nélkül dolgozva 20 mg ADD-t kapunk. 6. példa A 2. példa szerint járunk el, de a főfermentáció táptalajához a IV. táblázatban felsorolt adalékokat adjuk. 1,10-Fenantrolin helyett 2,2’-dipiridilt használunk. Az olajos magokat nagy fordulatszámú őrlőgépen megőröljük. A kapott eredményeket a IV. táblázatban közöljük. IV. táblázat Kísérlet Adalék Koncentráció 2,2’-dipiridil ADD kitermelés s% mg mg 1. adalék nélkül 0 3,9 16 2. repceolaj 1,0 3,9 35 3. repceolaj + repcemagliszt 1,0+ 2,0 5,5 50 4. repcemagliszt 2,5 5,5 45 5. lenolaj 1,0 3,9 33 6. lenolaj + lenmagliszt 1,0+ 1,0 5,5 42 7. lenmagliszt 2,5 5,5 45 8. szójababolaj 1,0 3,9 33 9. szójababolaj + szójababliszt 1,0+ 1,0 5,5 49 10. szójababliszt 5,0 5,5 48 11. szezámolaj 1,0 3,9 37 12. szezámolaj + szezámliszt O + © 5,5 45 13. szezámliszt 2,5 5,5 51 40 7. példa A következő összetételű táptalajt állítjuk elő: 2.0 % nádcukor, 1.0 % nátriumnitrit, 1.0 % élesztőkivonat, 0,25% dikáliumhidrogénfoszfát, 0,03% kristályos magnéziumszulfát, 3.0 % repceolaj és a többi víz. A táptalaj pH-értékét nátriumhidroxid-oldattal 7,0-re állítjuk. 50 ml táptalajt 500 ml-es rázólombikba helyezünk. A lombikot 10 percig 120°-on sterilizáljuk, majd lehűtjük és a lombikot beoltjuk a 2. példa szerinti tenyészettel és rázógépen 30°-on az 1. példa szerint inkubáljuk. Az inkubálás kezdete után 25 órával 250 mg koleszterint és 30 órával 5,5 mg 2,2’-dipiridilt adunk hozzá. Az V. táblázatban megadott inkubációs idő után 1,0 mg repceolajat adunk a tenyészethez. Az inkubáció kezdete után 110 órával a fermentlevet az 1. példában leírt módon feldolgozzuk és a kapott ADD-t elválasztjuk. Ezt a kísérletet többször megismételjük, de a repceolaj hozzáadásának időpontját változtatjuk. Az eredményeket az V. táblázatban adjuk meg. V. táblázat Repceolaj hozzáadásának ADD kitermelése időpontja, óra mg 0 47 20 52 30 48 42 45 70 23 90 22 adalék nélkül 22 8. példa A következő összetételű oltóközeget állítjuk elő: 1,0% élesztőkivonat, 1,0% húskivonat, 1,0% pepton és a többi víz. Az oltóközeg pH-értékét nátriumhidroxid-oldattal 7,0-re állítjuk be. 100 ml oltóközeget 500 ml-es rázólombikba teszünk, és 15 percig 120*-on sterilizál-45 50 55 60 65
