172939. lajstromszámú szabadalom • Eljárás madárinfluenza elleni inaktivált vakcina előállítására
7 172939 8 titerű amnion-allantois folyadékot 0,5% mennyiségű 1 :2000 hígításé vizes (3-propiolakton oldattal inaktiváljuk. A kapott vakcinát 0 C° és 4 C° közötti hőmérsékleten tároljuk. 4. példa Az 1. példa szerinti módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy 00124 MNG számon letétbe helyezett 2. szerotípusú madárinfluenza törzsből indulunk ki. Az inaktivált vírust tartalmazó folyadék 200 ml-éhez adjuvánsként 50 ml 2%-os Al(OH)3 gélt adunk. A kapott vakcinát 0 C° - és 4 C° közötti hőmérsékleten tároljuk. 5. példa Az 1. példa szerinti módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy 00132 MNG számon letétbe helyezett 4. szerotípusú madárinfluenza törzset használunk fel, továbbá inaktiválás céljából a vírust tartalmazó amnion-allantois folyadék mennyiségére számítva 0,8% 10%-os vizes formaldehid oldatot használunk. A kapott vakcinát 0 C° és 4 C° közötti hőmérsékleten tároljuk. 6. példa Az 1. példa szerinti módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy 00147 MNG számon letétbe helyezett 5. szerotípusú madárinfluenza törzsből indulunk ki, és az inaktivált vírust tartalmazó amnion-allantois folyadék pH-ját 0,1 n sósavval 7,0-ra állítjuk be. A kapott vakcinát 0C° és 4C° közötti hőmérsékleten tároljuk. 7. példa Az 1. példa szerinti módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a 00131 MNG számon deponált 6. szerotípusú madárinfluenza törzsből indulunk ki, és a vírust tartalmazó amnion-allantois folyadékot annak mennyiségére számítva 0,5% 10%-os vizes formaldehid oldattal kezeljük inaktiválás végett. A kapott vakcinát 0C° és 4C° közötti hőmérsékleten tároljuk. 8 8. példa Az 1. példa szerinti módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a 00146 MNG számon letétbe helyezett ismeretlen szerotípusú madárinfluenza törzsből indulunk ki, és az inaktiválást oly módon végezzük, hogy a vírust tartalmazó amnion-allantois folyadékhoz annak térfogatára számítva 0,5% 1 :2000 hígítású vizes /3-propiolakton oldatot adunk. A kapott vakcinát OCr és 4C° közötti hőmérsékleten tároljuk. 9. példa Az 1. példa szerinti módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a 00151 MNG számon letétbe helyezett ismeretlen szerotípusú madárinfluenza törzsből indulunk ki, és az inaktiválást úgy végezzük, hogy a vírust tartalmazó amnion-allantois folyadékhoz annak térfogatára számítva 0,8% 10%-os vizes formaldehid oldatot adunk. A kapott vakcinát 0 C° és 4 C° közötti hőmérsékleten tároljuk. Megjegyezzük, hogy a fenti példákban ismertetett módszerrel bivalens vagy polivalens vakcinát is készíthetünk bármely, a példákban említett vírustörzs felhasználásával. Az alábbiakban ismertetjük immunizálási vizsgálataink eredményeit. Kísérleteinkben ismert szerotípusú (3-4. átmeneti) törzzsel, az 1. példa szerint készített vakcinával a hazai viszonyok között a madárinfluenza szempontjából jelenleg elsősorban jelentős gyöngytyúkot immunizáltunk, éspedig 4600 állatot egyszer, ezek közül 400 állatot 4 héttel később mégegyszer, tehát kétszer oltottunk. A madárinfluenza törzset 0,1% koncentrációjú formaiinnal inaktiváltunk és ásványolaj helyett — ami az azóta megjelent irodalmi adatok alapján a baromfinál kedvezőtlen hatású — a legkorszerűbb alumíniumfoszfát depot-anyagot használtunk. Eredményeink: Míg a fentebb idézett Narayan és munkatársai nem nézték az oltás utáni titer alakulását — ami pedig lényeges kérdés — csupán az oltás előtti és az élővírussal történt fertőzés után életben maradt állatok hemagglutináció-gátló (HÁG) titerértékét, addig kísérleteinkben a következő eredményeket kaptuk: 30 gyöngytyúk I. oltás előtti HÁG (átlag) titere 1/20 63 gyöngytyúk I. oltás utáni HÁG (átlag) titere 1/28 60 gyöngytyúk II. oltás után 2 héttel titere 1/69 A II. oltás után kapott titerű ellenanyag más fajok influenzájára vonatkozó irodalmi adatok alapján elegendő az állatok megvédésére az esetlegesen fellépő természetes influenza fertőzéssel szemben. Ezt bizonyítja az a kísérleti eredményünk is, amelyben a 4600 vakcinázott gyöngytyúktól származó gyöngypipék napos korban élő vírussal történt ráfertőzéskor lényegesen kisebb számban és enyhébb tünetekkel betegedtek meg, mint a nem oltott anyák hasonló korú pipéi. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás a madárinfluenza-megbetegedések által okozott veszteségek csökkentésére alkalmas inaktivált vakcina előállítására, 9—12 napig előnyösen 10 napig előkeltetett tyúktojásokon való tenyésztéssel, azzal jellemezve, hogy ezeket beoltjuk legalább egy, természetes esetből izolált madárinfluenza 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
