172931. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és reagens szubsztrátumok vagy enzimaktivitások meghatározására
13 172931 14 A B jelű tesztpapírt az A jelűre helyezzük és mindkettőt összehegesztjük egy poliészterfólia és nylon-háló között. A vizsgálandó vizeletet az így előállított tesztcsíkra csepegtetjük. A kapott eredmények megfelelnek a 9. példában ismertetetteknek. 11. példa Tesztpapír vér kimutatására székletben Szűrőpapírt egymás után a következő oldatokkal impregnálunk, majd 40 C° hőmérsékleten megszánt juk. 1-es oldat 1,2 mólos citrát-puffer, pH 5,25 10 ml aszkorbátoxidáz, 100 E/mg 0,3 g víz 100,0 ml-re feltöltve 2-es oldat gvajakgyanta 3 g toluol 100 ml-re feltöltve Az oldatot szűrjük és csak a szűrletet használjuk impregnálásra. A kapott tesztpapírra székletet kenünk. Ha a másik oldalra 3%-os vizes hidrogénperoxid-oldatot csepegtetünk, úgy kék színeződést kapunk, ha a széklet kb. 2% vért tartalmaz. Ez a színeződés aszkorbinsav-tartalmú (kb. 15mg/100g) székleteknél is jelentkezik, míg az aszkorbátoxidáz nélküli tesztpapíroknál a színeződés nem jelentkezik. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás szubsztrátumok vagy enzimaktivitások meghatározására, mérési reakcióként redox-reakciót alkalmazva, azzal jellemezve, hogy aszkorbátoxidáz jelenlétében, előnyösen 4,0—8,5 pH-értéknél dolgozunk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 0,002—100 E aszkorbátoxidáz/ml vizsgált anyag mennyiséget alkalmazunk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az aszkorbátoxidázt egy hidrogénperoxidot képző enzimmel együtt alkalmazzuk. 4. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az aszkorbátoxidázt egy tetrazólium-sóval együtt alkalmazzuk. 5. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy aszkorbátoxidázt egy nukleofil reagensekkel oxidative kapcsolható fenollal, előnyösen 2,4-diklór-fenollal, 2 6-diklór-fenollal, 1,2-diklór-fenollal, 1,3-diklór-fenollal, 1,4-diklór-fenollal, 2-klór-fenollal, 3-klór-fenollal, 4-klór-fenollal, 2-metil-fenollal, 3-metil-fenollal, 4-metil-fenollal együtt alkalmazzuk. 6. Az 1—5. igénypont bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az eljárást 4,0 és 8,5 közötti pH-értéken végezzük. 7. Az 1 —6. igénypont bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy Zucchiiből (Cucurbita pepo medullosa) származó aszkorbátoxidázt alkalmazunk. 8. Reagens szubsztrátumok vagy enzimaktivitások enzimatikus meghatározására, mely szubsztrátum vagy enzim meghatározására szolgáló rendszert tartalmaz, mérési reakcióként redox-reakciót alkalmazva, azzal jellemezve, hogy járulékosan aszkorbátoxidázt, továbbá előnyösen foszfát- vagy citrátpuffert tartalmaz. > 9. A 8. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a rendszer szubsztrátum meghatározására szolgál, glükóz meghatározásához és peroxidázt, glükóz-oxidázt, o-dianizidint vagy 2-azino-di-3-etil-benztiazolin-szulfonát(6)-ot és puffert tartalmaz. 10. A 9. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a rendszer szubsztrátum meghatározására szolgál húgysav meghatározásához és peroxidázt, urikázt, egy fenolt, így 2,4-diklórfenolt, aminoantipirint és puffert tartalmaz. 11. A 9. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a rendszer szubsztrátum meghatározására szolgál glükóz meghatározásához és hexokinázt, glükóz-6-foszfát-dehidrogenázt, nikotinamid-adenin-dinukleotidfoszfátot (NADP), diaforázt, tetrazóliumsót és puffert tartalmaz. 12. A 9. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a rendszer szubsztrátum meghatározására szolgál glutamát meghatározásához és glutamát-dehidrogenázt, diaforázt, nikotinamid-adenin-dinukleotidot, tetrazóliumsót és puffert tartalmaz. 13. A 9. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a rendszer szubsztrátum meghatározására szolgál tirozin meghatározásához és tirozinázt, 3-metil-6-káliumszulf<?nil-benztíazolon-hidrazon-(2)-t és puffert tartalmaz. 14. A 9. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a rendszer szubsztrátum meghatározására szolgál pirokatechin meghatározásához és difenoloxidázt, 3-metil-6-káliumszulfonil-benztiazolon-hidrazon-(2)-t és puffert tartalmaz. 15. A 9. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a rendszer szubsztrátum meghatározására szolul és az aszkorbátoxidáz szívóképes hordozóanyagon, előnyösen papíron impregnált alakban van. 16. A 15. igénypont szerinti reagens kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy gliikózoxidázzal, peroxidázzal, aszkorbátoxidázzal, 9-(7-dimetil-ami-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
