172600. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vízoldható kivonatok előállítására Mycobacteriumokból és ezek immunológiai adjuvásként való alkalmazása
13 172600 14 „D. viasz” nevű komponens jelenléte kimutatható, azzal jellemezve, hogy a lipid-mentesített Mycobacterium-maradékot piridinnel kezeljük, adott esetben ecetsav jelenlétében, majd a kapott terméket etanollal kicsapjuk és a vízoldható 5 anyagot fizikokémiai módszerek segítségével izoláljuk és tisztítjuk. (Elsőbbsége: 1973. május 4.) 4. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy enyhe extrakcióként a lipid-mentesített Mycobacterium-maradék vizes 10 közegben való homogenizálását hajtjuk végre és a terméket egymás után végzett derítéssel, centrifugálással, dialízissel és adott esetben kromatografálással izoláljuk. (Elsőbbsége: 1972. június 20.) 5. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 15 módja azzal jellemezve, hogy Mycobacteriumként a párizsi Pasteur Intézetből beszerezhető patogén Mycobacterium tuberculosis var. Hominis Peurois törzset alkalmazzuk. (Elsőbbsége: 1972. június 20.) 6. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 20 módja azzal jellemezve, hogy Mycobacteriumként a Mycobacterium tuberculosis var. hominis H37Ra törzsét — ATCC 25177 - vagy a Mycobacterium tuberculosis var. hominis Test törzsét - amely a párizsi Pasteur Intézetből szerezhető be — alkal- 25 mázzuk. (Elsőbbsége: 1973. május 4.) 7. A 2., 4. és 5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy vizes közegben való homogenizálás és centrifugálás után két derítést hajtunk végre 30 ammóniumszulfáttal, mindegyik derítés után centrifugáljuk az elegyet majd a kapott felülúszót desztillált vízzel szemben dializáljuk, oszlopon kromatografáljuk és izoláljuk az aktív vízoldható kivonatot, amely vízoldható kivonat liofilizálás 35 után az alábbi jellemzőket mutatja: megjelenés: laza fehér por, összetétel: a) aminosavak, mólarány: alanin 3, glutaminsav 2, alfa^lfa’-diaminopimelinsav 2, b) aminocukrok, mólarány: N-acetil-glukózamin 2, N-glikolilmuraminsav 2, N-acetil-galaktózamin jelen van, c) redukáló nem-amino-cukrok: arabinóz, galaktóz, mannóz jelen van, d) lipidek: 0,5%-nál alacsonyabb, molekulasúly, molekulánkénti 3 alanin maradék alapján számítva: 14000 ±2000, ülepedési állandó: S2o= 2. (Elsőbbsége: 1972. június 20.) 8. A 3." és 6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a lipid-mentesített Mycobacterium-maradékot piridin és ecetsavanhidrid elegyével kezeljük, etanolt adagolunk, az alkoholban oldhatatlan frakciót vízben felvesszük, majd a vízoldható kivonatot izoláljuk és kromatografálással tisztítjuk, amely vízoldható kivonat liofilizálás után az alábbi tulajdonságokkal rendelkeznek: megjelenés: laza sárga por, összetétel: a) aminosav, mólarány: alanin 3, glutaminsav 2, alfa^lfa’-diaminopimelinsav 2, b) aminocukrok, mólarány: N-acetil-glukózamin 2, N-acetil-muraminsav 2, c) redukáló nem-amino-cukrok: mannóz, glukóz, arabinóz jelen van, galaktóz nincs jelen, d) lipidek nincsenek jelen, molekulasúly (a molekulánkénti 3 alanin-maradék alapján számítva): 4000 ± 200. (Elsőbbsége: 1973. május 4.) 9. A 3. és 6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy egy lipid-mentesített Mycobacterium-maradékot piridinnel kezelünk, etanolt adunk az elegyhez, vizes közegben való homogenizálással extraháljuk az alkoholban oldhatatlan frakciót, majd centrifugálás után a vízoldható frakciót kétszer kicsapjuk ammóniumszulfáttal, mindegyik kicsapás után centrifugálva az elegyet, majd a kapott felülúszót desztillált vízzel szemben dializáljuk, végül a vízoldható kivonatot elkülönítjük, kinyerjük és kromatografálással tisztítjuk, amely vízoldható kivonat liofilizálás után az alábbi tulajdonságokkal rendelkezik: megjelenés: fehér por, 40 összetétel: a) aminosav, mólarány: alanin 3, glutaminsav 2, alfa^lfa’-diaminopimelinsav 2, b) aminocukor, mólarány: N-acetil-glukózamin 2, 45 N-glikolil-muraminsav 2, c) redukáló nem-amino-cukrok: galaktóz, mannóz, arabinóz, molekulasúly (a molekulánkénti 3 alanin-maradék alapján számítva): 6000 ± 500. (Elsőbbsége: 1973. 50 május 4.) A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 794026 - Zrínyi Nyomda 7
