172449. lajstromszámú szabadalom • Diagnosztikai teszt-csík vérnek és más peroxidatív hatású anyagoknak a kimutatására testnedvekben
5 172449 6 Peroxidatív hatású anyagoknak a székletben való kimutatásánál lehetőség van arra is, hogy a találmány szerinti aktivátorokat a reagensekkel együtt egy vízálló filmbe dolgozzuk be, ahogy azt az 1 598 153 lajstromszámú NSZK-beli szabadalmi leírás ismerteti. Ennek az az előnye, hogy a teszt-csík felülete a színreakció leolvashatósága érdekében egyszerű letörléssel megtisztítható. A következő példák a találmány szerinti teszt-csíkok közelebbi bemutatására szolgálnak. 1. példa Szűrőpapírt egymás után a következő oldatokkal itatunk át és az átitatott szűrőpapírt 40 C°-on szárítjuk. 1. oldat 1,2 mólos, 5,25 pH-jú citrát-puffer 35,0 ml etiléndiamintetraecetsav-dinátriumsó 0,1 g dodecilbenzolszulfonsav-nátriumsó 0,2 g 2,5-dimetilhexán-2,5--dihidroperoxid (kb. 70%-os) 1,6 g foszforsavtrimorfolid 12,7 g etanol 30,0 ml desztillált vízzel kiegészítve 100,0 ml-re. 2. oldat o-tolidin 0,3 g a-sztilbazol 0,2 g toluollal kiegészítve 100,0 ml-re. 2. oldat dioktilnátriumszulfoszukcinát 0,5 g polivinilpirrolidon 0,5 g 5 diizopropilbenzolhidroperoxid (kb. 50%-os) 3,5 g foszforsavtrimorfolid 12,7 g metanollal kiegészítve 100,0 ml-re. 10 3. oldat o-tolidin 0,25 g (I) képletű vegyület 0,25 g 15 toluollal kiegészítve 100,0 ml-re Ily módon gyakorlatilag ugyanolyan tulajdonságokkal rendelkező teszt-papírokat kapunk, mint az 1. példa esetében. Az érzékenység körülbelül 5 és 20 20 eritrocita/mm3 között van és az (I) képletű vegyületek megadott sorrendjében csökken. (I) képletű vegyületek: 25 piridil-2-piridil- 3-etilén di-(piridü-2)etilén 2-(4-metoxifenilvinil)piridin 2-(4-metilfenilvínil)piridin piridil-2-piridil-4-etilén 30 2-(fenilvínil)-4-metilpiridin Az összes itt felsorolt vegyület ismert az irodalomból. összehasonlító vizsgálati eredmények: Ily módon eljárva fehér teszt-papírt kapunk, amely vértartalmú vizeletbe való bemerítéskor, körülbelül 5—20 másodperc elteltével kékes-zöldre 40 színeződik. Amennyiben az eritrociták sértetlenek, a papírok kékes-zöld pettyekkel vannak teleszórva. Amennyiben hemolízis áll elő vagy már előzőleg szabad hemoglobin került a vizeletbe, a papírok egyenletes kékes-zöld színt kapnak. Az érzékenység 45 körülbelül 5 eritrocita/mm3-nél vagy a megfelelő mennyiségű hemoglobinnál van, ennél kisebb számú sértetlen eritrocita bizonyos körülmények között még egyes zöld pontokat létesíthet a teszt-papíron. A mioglobinnal szembeni érzékenység megfelel a 50 hemoglobinnal szembeni érzékenységnek. 2. példa Szűrőpapírt egymás után a következő oldatokkal 55 itatunk át és az átitatott szűrőpapírt 40C°-on szárítjuk. 1. oldat 1,2 mólos, 5,25 pH-jú citrát-puffer etiléndiamintetraecetsav-dinátriumsó desztillált vízzel kiegészítve 60 40,0 ml 0,1 g 100,0 ml-re 65 a-Sztilbazollal, a fentiekben említett vegyületekkel, valamint a technika állása szerinti ismert kininnel készített teszt-papírokat vér és víz 1 : 1 000 000 arányú elegyébe mártunk. 30 másodperc (kininnél 120 másodperc) után a kapott színt remisszió mérésére alkalmas tartozékkal rendelkező Zeiss-fotométeren mérjük, 630 nm-nél. A remisszió százalékos értékei a zöld színeződés mértékét és ezáltal az aktivátorok hatékonyságát mutatják (0% remisszió = fekete, 100% remisszió = fehér). Aktiváló anyag Remisszió, % a-sztilbazol 27 piridil-2-piridil- 3-etilén 30 di-(piridil-2)-etilén 31 2-(4-metoxifenilvinil)-piridin 32 2-(4-metilfenilvinil)-piridin 32 piridil-2-piridii-4-etilén 38 2-(fenilvinil)-4-meti]piridin 40 kinin 82 vakérték (teszt-papír, vízzel) 86 Mint a táblázatból látható, a találmányunk szerinti aktivátorok lényegesen jobbak, mint a kinin, amelynél a remisszió gyakorlatilag a vakértéknek felel meg. 3